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來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2023-11-30

Exosome(外泌體)是由活細(xì)胞分泌小囊泡,具有典型的脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu),;參與細(xì)胞之間的交流,,物質(zhì)的運(yùn)輸以及正常生理過(guò)程的維持,此外還與疾病的產(chǎn)生有關(guān),。對(duì)分離的外泌體進(jìn)行體外標(biāo)記或示蹤,,有助于對(duì)外泌體的功能進(jìn)行進(jìn)一步的研究。目前對(duì)于外泌體的標(biāo)記方法有很多種,,包括親脂性的染料和膜滲透型的化合物等,。PKH67的體內(nèi)熒光半衰期為10-12天。相比于PKH-67,,PKH-26具有更長(zhǎng)的半衰期,,標(biāo)記在兔紅細(xì)胞上的PKH26半衰期長(zhǎng)達(dá)100天以上。特別適用于體外增殖研究以及長(zhǎng)期的體內(nèi)細(xì)胞跟蹤研究,。外泌體主要來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,,經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中 。提取試劑盒價(jià)格

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外泌體不只可作為疾病診斷的生物標(biāo)志,,而且可作為天然的藥物傳遞載體,。外泌體能夠負(fù)載的治理物質(zhì)包括小分子化合物、蛋白質(zhì),、寡核苷酸等,,且在體液中寬泛分布且具有定向歸巢能力。外泌體獨(dú)特的生物兼容性,、高穩(wěn)定性,、瘤靶向性使其在未來(lái)瘤治理中有很大的利用價(jià)值。外泌體能夠裝載的治理物質(zhì)包括小分子化合物,、蛋白質(zhì),、寡核苷酸等,。作為小分子化合物載體,外泌體裝載姜黃素,、紫杉醇,、阿霉素等主要是用于抗瘤研究;已經(jīng)發(fā)現(xiàn)外泌體可遞送多種蛋白質(zhì),,例如酶,,細(xì)胞骨架蛋白質(zhì)和跨膜蛋白質(zhì);外泌體作為核酸分子的藥物載體主要用于基因治理,,外泌體天然的可以攜帶遺傳(例如miRNA,,siRNA)到靶細(xì)胞中,從而在生物學(xué)和致病過(guò)程中誘導(dǎo)遺傳修飾,。提取試劑盒價(jià)格以前無(wú)法用超速離心法提取的微囊泡,也通過(guò)運(yùn)用PS親和法實(shí)現(xiàn)高純度提取,。

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外泌體作為細(xì)胞外囊泡的一個(gè)亞群,直徑集中于30~150nm,。目前,基于粒徑大小分離外泌體的方法有超濾法、尺寸排除色譜法,、靜水過(guò)濾透析法和非對(duì)稱(chēng)場(chǎng)流分離法等,。超濾法利用不同孔徑的濾膜,對(duì)樣品進(jìn)行選擇性分離以獲得外泌體,一般分為壓力超濾和離心超濾。其中離心超濾效果更好,不jin能減輕力對(duì)外泌體的破壞,而且可通過(guò)增大離心力和延長(zhǎng)離心時(shí)間提高外泌體產(chǎn)物濃度,。但離心力過(guò)大或離心時(shí)間過(guò)長(zhǎng)均有可能導(dǎo)致超濾膜或外泌體破裂,。此外,超濾法可以和切向流過(guò)濾法、微控流法,、超速離心法或凝膠過(guò)濾色譜法等方法結(jié)合進(jìn)一步提高分離效率,。

外泌體是指包含了復(fù)雜RNA和蛋白質(zhì)的小膜泡(30-150nm),現(xiàn)今,,其特指直徑在40-100nm的盤(pán)狀囊泡,。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,,經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中?,F(xiàn)在外泌體特指直徑在40-100nm的盤(pán)狀囊泡。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體,。其主要來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,,經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。外泌體及活性蛋白能直接穿透皮膚間隙,,快速直達(dá)基底層起效,。

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在利用外泌體運(yùn)輸PTX進(jìn)行抗中流的研究中,由于間充質(zhì)干細(xì)胞可以歸巢(homing)至中流細(xì)胞微環(huán)境并且可以不通過(guò)基因操作即可對(duì)PTX運(yùn)輸,,因此Pessina等采用間充質(zhì)干細(xì)胞SR4987作為分泌外泌體的母代細(xì)胞,,而后將SR4987與PTX共混,,使SR4987分泌的外泌體含有PTX,再利用超速離心法將載有PTX的外泌體分離出來(lái),,研究其對(duì)體外人胰腺ai細(xì)胞株的影響,。結(jié)果表明外泌體可以有效的運(yùn)載PTX并不破壞其功能,小泡(主要指外泌體)溶液的蛋白質(zhì)濃度在0.047~0.095mg/mL之間時(shí)可以誘導(dǎo)中流細(xì)胞凋亡50%,,這種抑制效果與純PTX對(duì)體外ai細(xì)胞的抑制效果相當(dāng),。通過(guò)壓制或去除這些外泌體,有希望壓制疾病發(fā)生,。提取試劑盒價(jià)格

外泌體可參與到機(jī)體免疫應(yīng)答,、抗原提呈、細(xì)胞遷移,、細(xì)胞分化等方方面面,。提取試劑盒價(jià)格

通過(guò)對(duì)28例前列腺ai癥患者和19例正常人尿液外泌體中的miRNA進(jìn)行深度測(cè)序分析,發(fā)現(xiàn)兩種miRNA(miR-196a-5p和miR-501-3p)在前列腺ai患者組明顯下調(diào),,表明尿液外泌體中的特異性miRNA可能作為前列腺ai的新型生物標(biāo)志物,。Khurana等[100]將研究對(duì)象由miRNAs擴(kuò)大至多種類(lèi)型RNA,通過(guò)對(duì)慢性腎病患者尿液外泌體中各類(lèi)RNA進(jìn)行系統(tǒng)研究,,在慢性腎病患者組中識(shí)別出30種明顯差異的lncRNAs,,表明尿液外泌體中的lncRNAs具有作為慢性腎病早期診斷標(biāo)志物的潛力。Skotland等的研究則表明尿液外泌體中的脂質(zhì)能夠作為前列腺ai的新型標(biāo)志物,,3種脂質(zhì)標(biāo)志物結(jié)合使用能夠有效提高對(duì)前列腺ai的診斷靈敏度(93%)和特異性(100%),。提取試劑盒價(jià)格

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