目前為止已鑒別了2500余種miRNAs分子,。例如,，血液外泌體miR-21的升高已被證實(shí)與胰腺ai、結(jié)直腸ai,、肝ai,、乳腺ai、卵巢ai及食管ai等多種中流相關(guān),，可能與其參與中流xue管生成有關(guān),，研究表明肺ai細(xì)胞釋放的外泌體miR-21會(huì)通過(guò)STAT3依賴機(jī)制誘導(dǎo)周圍支氣管細(xì)胞血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascularendothelialgrowthfactor，VEGF）的產(chǎn)生,，從而促進(jìn)血管生成,。在食管ai中，miR-21還可以反映中流的惡性程度,，食管ai患者的miR-21水平與良性中流患者相比急劇上升,，上升的miR-21水平也與中流的淋巴侵襲和轉(zhuǎn)移相關(guān)。在膀胱ai患者中,，尿液中的miR-21和miR-4454會(huì)明顯上調(diào),。抗體親和法和密度梯度離心法,，雖然可以提取到高純度的外泌體,，但不能提取完整外泌體。河南外泌體PKH26

前列腺ai患者尿液外泌體中的miR-574-3p,、miR-141-5p和miR-21-5p的表達(dá)水平明顯上升,，表明這些miRNAs可用于前列腺ai的早期篩查,。膽管ai是惡性程度較高的消化系統(tǒng)中流，發(fā)展隱蔽且臨床癥狀及體征出現(xiàn)晚，故給早期診斷帶來(lái)困難,。高通量小RNA測(cè)序篩查了來(lái)自膽管ai和膽囊ai患者外泌體中一系列差異表達(dá)的miRNA,，小RNA長(zhǎng)度在正常個(gè)體,、膽管ai患者和膽囊ai患者之間的分布存在明顯差異,，膽管ai患者的外泌體中miR-96-5p、miR-151a-5p、miR-191-5p,、miR-4732-3p明顯升高,，而膽囊ai患者的外泌體中miR-151a-5p略有升高，為膽管ai和膽囊ai提供了一套新的生物診斷標(biāo)志物,。雙歧桿菌外泌體以前無(wú)法用超速離心法提取的微囊泡,，也通過(guò)運(yùn)用PS親和法實(shí)現(xiàn)高純度提取。

為了解決外泌體實(shí)驗(yàn)遇到的上述的各種問(wèn)題,Wako研發(fā)出MagCapture?外泌體提取試劑盒PS（MagCapture?ExosomeIsolationKitPS）提取高純度細(xì)胞外囊泡,。外泌體膜含有分泌細(xì)胞源的蛋白和脂質(zhì),，眾所周知磷脂酰絲氨酸（PS）在活細(xì)胞通過(guò)翻轉(zhuǎn)酶作用導(dǎo)向細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)，暴露在外泌體膜外側(cè)3）,。另外,，T-cellimmunoglobulindomainandmucindomain-containingprotein4（Tim4通過(guò)巨噬細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞凋亡的吞噬受體）蛋白通過(guò)細(xì)胞外域IgV域與含有鈣離子的PS結(jié)合4）?；谏鲜鲋R(shí),，我們利用Tim4固化磁珠，在鈣離子存在下捕捉培養(yǎng)上清和血清等樣品中的外泌體,，再添加螯合劑洗脫外泌體,，這種外泌體純化方法是和金澤大學(xué)醫(yī)學(xué)系免疫學(xué)華山教授共同開(kāi)發(fā),，并取得了成功,。5）這是迄今為止取代黃金標(biāo)準(zhǔn)超速離心法的新型外泌體純化方法。

基于免疫細(xì)胞來(lái)源的外泌體能夠介導(dǎo)和調(diào)節(jié)機(jī)體對(duì)中流的免疫反應(yīng),，外泌體在中流免疫zhiliao方面的潛力受到廣fan關(guān)注,。其中樹(shù)枝狀細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體包含大量的MHC-多肽復(fù)合物和免疫刺激相關(guān)的分子，能夠激huo相關(guān)的T細(xì)胞,，介導(dǎo)體內(nèi)抗中流應(yīng)答,，在多個(gè)臨床試驗(yàn)中表現(xiàn)出良好的抗中流療效。Morse等考察了樹(shù)枝狀細(xì)胞外泌體對(duì)非小細(xì)胞肺ai患者的療效,。結(jié)果表明,，患者對(duì)樹(shù)枝狀細(xì)胞外泌體耐受性良好，1/3患者表現(xiàn)出了對(duì)樹(shù)枝狀細(xì)胞外泌體的T細(xì)胞響應(yīng),，2/4患者自然殺傷細(xì)胞活性得以激huo,。在從體液中提取外泌體后，體液可長(zhǎng)期穩(wěn)定保存,。

一類外泌體中常見(jiàn)的細(xì)胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白,，是鳥(niǎo)苷酸三磷酸酶(GTPases,)家族的一種。它可以調(diào)節(jié)外泌體膜與受體細(xì)胞的融合,，有文獻(xiàn)報(bào)道稱RAB4,RAB5和RAB11主要出現(xiàn)于早期以及回收的核內(nèi)體中,，RAB7和RAB9主要出現(xiàn)于晚期的核內(nèi)體。現(xiàn)有大量的研究發(fā)現(xiàn)外泌體中含有40種RAB蛋白。除了RAB蛋白,，外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯(lián)蛋白（包括膜聯(lián)蛋白1,、2、4,、5,、6、7,、11等）,。外泌體膜上富含參與外泌體運(yùn)輸?shù)乃目缒さ鞍准易濉嵝菘说鞍准易?。其它一些外泌體中的蛋白包括多種的代謝類的酶,、核糖體蛋白（RPS3）、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)因子（黑色素瘤分化相關(guān)因子,ARF1,CDC42,人類紅細(xì)胞膜整合蛋白,SLC9A3R1）,、粘附因子,、細(xì)胞骨架蛋白以及泛素等。通過(guò)壓制或去除這些外泌體,，有希望壓制疾病發(fā)生,。細(xì)胞外泌體優(yōu)勢(shì)

實(shí)際上，用PS親和法提取的人白血病細(xì)胞釋放的外泌體,。河南外泌體PKH26

通過(guò)改變外泌體的溶解性或者分散性,可以將它們從體液或細(xì)胞培養(yǎng)液中沉淀出來(lái),。常見(jiàn)的方法是使用聚乙二醇或凝集素來(lái)沉淀樣品中的外泌體。聚乙二醇是一種水溶性非離子化合物,不含水的聚乙二醇可以通過(guò)“劫持”水分子增加疏水性蛋白和脂質(zhì)分子的相互結(jié)合力,從而迫使其脫離溶液,進(jìn)而在低速離心條件下發(fā)生沉降,。凝集素是一種具有高度特異性的碳水化合物結(jié)合蛋白,可通過(guò)與外泌體質(zhì)膜糖蛋白上的糖鏈結(jié)合來(lái)改變外泌體的溶解性,。此外,還可使用魚(yú)精蛋白、醋酸鈉,、有機(jī)溶劑沉淀等方法進(jìn)行沉淀分離,。河南外泌體PKH26