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外泌體成分鑒定

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024-01-10

幾乎所有的細(xì)胞都可以在自發(fā)或在一定刺激條件下產(chǎn)生外泌體,不同的細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體具有不同的功能,,這些外泌體參與了一系列生理和病理過(guò)程,,如ai癥發(fā)生與發(fā)展、抗原呈遞,、免疫調(diào)節(jié),、組織愈合等。來(lái)自血細(xì)胞(包括血小板,、白細(xì)胞和紅細(xì)胞)的外泌體具有參與凝血,、提供促血管生成因子、誘導(dǎo)血管生成等生理功能;妊娠期外泌體能夠影響局部血管生成,、調(diào)節(jié)分化,、激huo免疫、促進(jìn)胚胎發(fā)育;肝臟細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體有利于維護(hù)肝臟內(nèi)穩(wěn)態(tài),。由此可見(jiàn),,正常細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體對(duì)維持機(jī)體的正常生命活動(dòng)起重要作用?;顑?nèi)的外泌體動(dòng)態(tài)(哪個(gè)外泌體遷移至何處)也會(huì)成為今后需要努力研究的重要課題,。外泌體成分鑒定

外泌體成分鑒定,外泌體提取試劑盒

外泌體在心臟修復(fù)中起著關(guān)鍵作用。外泌體通過(guò)內(nèi)含的miRNA直接調(diào)控基因表達(dá),,將信息傳遞給靶細(xì)胞,。盡管干細(xì)胞移植治理是一種很有前景的修復(fù)損傷心臟組織并使其再生的輔助手段,但由于缺血心臟中移植細(xì)胞的存活狀況不佳,,一般只能觀察到心臟功能的輕度改善,。近期的研究表明,干細(xì)胞釋放的外泌體可以作為心臟修復(fù)潛在的無(wú)細(xì)胞治理劑,。干細(xì)胞分泌的外泌體相比干細(xì)胞有如下優(yōu)點(diǎn):(1)旁分泌效應(yīng),,外泌體作為干細(xì)胞旁分泌作用的一種媒介;(2)組合起效,,外泌體可與現(xiàn)有的組合物或方法進(jìn)行組合,;(3)個(gè)性化,外泌體可改造特定活性成分;(4)靶向特異性,,外泌體被工程化改造后,,具有靶向特定細(xì)胞類(lèi)型或組織的功能;(5)安全性高,,外泌體治理屬于無(wú)細(xì)胞療法,。外泌體生產(chǎn)線高濃度集聚誘導(dǎo)細(xì)胞死亡的TNF-α,可使類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎惡化,。

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外泌體研究可以指導(dǎo)診治肝損傷,、酒精或非酒精性脂肪肝等其他肝臟疾病。藥物誘導(dǎo)肝損傷(DILI)大鼠模型中,,尿外泌體中的蛋白含量減少,,包括CD26、CD81和其他潛在的標(biāo)志物蛋白,。而另一項(xiàng)研究則發(fā)現(xiàn)DILI大鼠血清中分離到的外泌體含有更高水平的蛋白,,如HSP70、HSP90等,。MSCs來(lái)源的外泌體可以誘導(dǎo)肝細(xì)胞增殖相關(guān)基因表達(dá),,減弱CCL4誘導(dǎo)的肝損傷。而酒精刺激會(huì)促進(jìn)外泌體的分泌,,miRNAs水平也會(huì)升高,,并促進(jìn)細(xì)胞因子的分泌,喚醒單核細(xì)胞的分化,。盡管已取得上述成果,,我們對(duì)外泌體的研究尚不夠深入,外泌體在肝臟生理和病理中的重要作用及其臨床應(yīng)用仍有待繼續(xù)探索,。

膜封閉的囊泡釋放到周?chē)h(huán)境中已經(jīng)成為近幾年來(lái)越來(lái)越受關(guān)注的問(wèn)題,。令人信服的證據(jù)表明囊泡可交換復(fù)雜的信息有助于這種興趣的興起。但是,,也已經(jīng)清楚,,不同類(lèi)型的分泌囊泡共存,具有不同的細(xì)胞內(nèi)起源和形成模式,,因此可能具有不同的組成和功能,。外泌體是分泌囊泡的一種亞型。它們?cè)谡婧思?xì)胞內(nèi)的多泡小體中形成,,并且當(dāng)這些多泡小體與質(zhì)膜融合時(shí)分泌到細(xì)胞外,。有趣的是,,不同的分子家族已被證明參與細(xì)胞內(nèi)形成外泌體及其隨后的分泌,,這表明即使在外泌體中也存在不同的亞型。外泌體復(fù)雜的內(nèi)容物被認(rèn)為是疾病診斷的無(wú)創(chuàng)或微創(chuàng)生物標(biāo)志物。

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目前市面上開(kāi)發(fā)的外泌體提取試劑盒,,是根據(jù)外泌體表面由類(lèi)似于細(xì)胞膜的脂質(zhì)雙分子層具有一定疏水性這一特性,,用試劑捆綁水分子,從而可通過(guò)常規(guī)離心收集沉淀獲取外泌體,。這種快速提取外泌體的方法雖簡(jiǎn)便快捷,、樣本需求少、對(duì)設(shè)備要求低,,但與差速離心方法類(lèi)似,,其分離得到的沉淀包含其他細(xì)胞分泌的囊泡,且血清中含有大量血清蛋白分子,,成分復(fù)雜,,很可能摻雜一些未知的疏水大分子物質(zhì)。Sabapatha等曾根據(jù)來(lái)源于胎盤(pán)的外泌體表面特異表達(dá)這一特性,,使用耦合到磁珠的抗抗體,,采用磁珠分選方法分離血漿中胎盤(pán)來(lái)源外泌體。此法可以提取的胎盤(pán)外泌體量少,,不適用于大規(guī)模提取制備,,且免疫磁珠價(jià)格昂貴,不利于提取技術(shù)的普及,。外泌體及其攜帶的組分參與肝臟細(xì)胞的增殖,、再生和遷移等生理過(guò)程,在肝臟疾病和肝損傷中起著重要作用,。外泌體創(chuàng)新藥是

外泌體的異質(zhì)性可以根據(jù)其大小,、含量(載物)、對(duì)受體細(xì)胞的功能影響以及細(xì)胞來(lái)源來(lái)區(qū)分,。外泌體成分鑒定

一類(lèi)外泌體中常見(jiàn)的細(xì)胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白,,是鳥(niǎo)苷酸三磷酸酶(GTPases,)家族的一種。它可以調(diào)節(jié)外泌體膜與受體細(xì)胞的融合,,有文獻(xiàn)報(bào)道稱(chēng)RAB4,RAB5和RAB11主要出現(xiàn)于早期以及回收的核內(nèi)體中,,RAB7和RAB9主要出現(xiàn)于晚期的核內(nèi)體。現(xiàn)有大量的研究發(fā)現(xiàn)外泌體中含有40種RAB蛋白,。除了RAB蛋白,,外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯(lián)蛋白(包括膜聯(lián)蛋白1、2,、4,、5、6,、7,、11等)。外泌體膜上富含參與外泌體運(yùn)輸?shù)乃目缒さ鞍准易濉嵝菘说鞍准易?。其它一些外泌體中的蛋白包括多種的代謝類(lèi)的酶,、核糖體蛋白(RPS3)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)因子(黑色素瘤分化相關(guān)因子,ARF1,CDC42,人類(lèi)紅細(xì)胞膜整合蛋白,SLC9A3R1),、粘附因子,、細(xì)胞骨架蛋白以及泛素等。外泌體成分鑒定

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