雖然外泌體作為藥物載體具有生物兼容性,、穩(wěn)定性和內(nèi)在靶向性等潛在優(yōu)勢,，但是外泌體在藥物遞送中的應(yīng)用研究才剛剛起步,，尚有許多問題需解決：選擇何種細(xì)胞作為外泌體的供體：如DCs來源的外泌體可用于免疫治理，因其富含組織相容復(fù)合物（MHC）及T細(xì)胞共刺激分子,，能在體內(nèi)喚醒T淋巴細(xì)胞,，進(jìn)而抑制瘤細(xì)胞增殖；骨髓來源的間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）來源的外泌體對(duì)KRAS基因有抑制作用,；γδT細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞（NK）,、瘤細(xì)胞等均有研究報(bào)道可作為載藥級(jí)別外泌體的細(xì)胞來源,。外泌體作為核酸分子的藥物載體主要用于基因治理。成都干細(xì)胞外泌體

外泌體的提取方法：免疫磁珠法,，這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整,，特異性高、操作簡單,、不需要昂貴的儀器設(shè)備,，但是非中性pH和非生理性鹽濃度會(huì)影響外泌體生物活性，不便進(jìn)行下一步的實(shí)驗(yàn),。PS親和法,，該方法將PS（磷脂酰絲氨酸）與磁珠結(jié)合，利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS,。該方法與免疫磁珠法相似,，獲得的外泌體形態(tài)完整，純度較高,。由于不使用變性劑,，不影響外泌體的生物活性，外泌體可用于細(xì)胞共培養(yǎng)和體內(nèi)注射,。PS法可提取相當(dāng)高純度的外泌體,。色譜法，這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一，但是需要特殊的設(shè)備,，應(yīng)用不寬泛,。北京外泌體攝取外泌體在體液中十分穩(wěn)定，同時(shí)外囊泡所含的蛋白質(zhì)和RNA被外泌體的脂質(zhì)雙層膜所包被也不會(huì)分解,。

外泌體可以由體內(nèi)或體外培養(yǎng)的幾乎所有類型的細(xì)胞分泌,并廣fan存在于血漿,、膽汁、尿液,、母乳,、唾液、胸腔積液,、淋巴,、胃酸、支氣管肺泡灌洗液,、腦脊液,、眼淚、滑膜液,、羊水,、腹水、鼻分泌物和子宮抽吸物液體等體液中,。目前,基于不同的分離原理,研究者建立了五種主要的提取純化技術(shù),分別為基于質(zhì)量密度的超速離心技術(shù),、基于粒徑大小的分離技術(shù)、基于溶解性質(zhì)的聚合物沉淀技術(shù),、基于免疫親和原理的分離技術(shù)和基于流體性質(zhì)的微流控技術(shù),。

目前市面上開發(fā)的外泌體提取試劑盒，是根據(jù)外泌體表面由類似于細(xì)胞膜的脂質(zhì)雙分子層具有一定疏水性這一特性,，用試劑捆綁水分子,，從而可通過常規(guī)離心收集沉淀獲取外泌體。這種快速提取外泌體的方法雖簡便快捷,、樣本需求少,、對(duì)設(shè)備要求低，但與差速離心方法類似,，其分離得到的沉淀包含其他細(xì)胞分泌的囊泡,，且血清中含有大量血清蛋白分子，成分復(fù)雜,，很可能摻雜一些未知的疏水大分子物質(zhì),。Sabapatha等曾根據(jù)來源于胎盤的外泌體表面特異表達(dá)這一特性，使用耦合到磁珠的抗抗體,，采用磁珠分選方法分離血漿中胎盤來源外泌體,。此法可以提取的胎盤外泌體量少,，不適用于大規(guī)模提取制備，且免疫磁珠價(jià)格昂貴,，不利于提取技術(shù)的普及,。外泌體是細(xì)胞在特定條件下分泌的小囊泡，是細(xì)胞間傳遞信號(hào),，相互溝通和影響的重要工具,。

科學(xué)家也嘗試?yán)猛饷隗w的壓制發(fā)病機(jī)制功能。例如,，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者的滑膜成纖維細(xì)胞所釋放的外泌體,，高濃度集聚誘導(dǎo)細(xì)胞死亡的TNF-α，可使類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎惡化,。通過上述介紹可以知道癥狀細(xì)胞來源的外泌體含有與癥狀進(jìn)展相關(guān)的分子,，神經(jīng)細(xì)胞來源的外泌體含有與神經(jīng)退行性疾病相關(guān)的分子，因此,，通過壓制或去除這些外泌體,，有希望壓制疾病發(fā)生。隨著今后的研究發(fā)展,，外泌體功能逐步清晰,，并擴(kuò)大臨床應(yīng)用，有望將外泌體應(yīng)用在各種疾病醫(yī)治上,。甚至可嘗試?yán)猛饷隗w將siRNA和抗藥劑等運(yùn)輸?shù)侥繕?biāo)細(xì)胞中,。外泌體的形成始于細(xì)胞內(nèi)陷，成熟于多囊泡胞內(nèi)體,，終于膜融合,。黑龍江CD63外泌體慢病毒包裝

外泌體本身的惰性相當(dāng)高,，但它們與細(xì)胞膜融合可將所攜帶的物質(zhì)和信號(hào)傳遞到受體細(xì)胞并改變其生物學(xué)功能,。成都干細(xì)胞外泌體

有研究表明外泌體通過喚醒瘤相關(guān)信號(hào)通路、誘導(dǎo)免疫耐受,、重塑細(xì)胞外基質(zhì),、增強(qiáng)瘤細(xì)胞侵襲性和調(diào)控瘤微環(huán)境促進(jìn)瘤的發(fā)生和發(fā)展，外泌體在瘤的診斷上有諸多優(yōu)勢：外泌體可保護(hù)其中的核酸類物質(zhì),，防止其迅速降解,；外泌體的形成與親源細(xì)胞的狀態(tài)密切相關(guān)；針對(duì)外泌體內(nèi)容物的檢測比傳統(tǒng)的瘤標(biāo)志物更具有特異性,；外泌體寬泛存在于多種體液樣本中,，以其為基礎(chǔ)的瘤診斷可在病情發(fā)展過程中及時(shí)監(jiān)測分子標(biāo)志物的變化，這種檢測更易監(jiān)控且樣本更易收集,。成都干細(xì)胞外泌體