卵子***是人類胚胎發(fā)育的起始步驟,,該過程主要由細胞內的鈣釋放調控,,當成熟的卵母細胞發(fā)育到MII期后,只有精子的PLCζ進入卵母細胞的胞漿,,才能***鈣震蕩,,促使卵母細胞完成完整的減數(shù)分裂。TFF(Totalfertilizationfailure,,完全受精失敗)是指MII期卵母細胞無法完成受精的過程,,有1-3%的ICSI失敗是源于IFF。TFF與精子及卵子的異常均有關,,其中卵子***異常是主要因素,。卵子因素主要是由蛋白合成不足或異常信號傳導導致的胞質不成熟;精子因素主要是PLCζ蛋白的結構,、表達和定位異常,。受精失敗與女方年齡、不育類型和取卵數(shù)目等因素無關,。精子的解凝功能異常和魚精蛋白缺失與TFF密切相關,。精子染色質組裝異常或精子DNA損傷可導致精子的解凝異常,,無法***卵子及合子形成,。研究表明精子染色質組裝異常的精子中精子解凝功能受阻的精子比例高于正常精子。精細胞染色質的魚精蛋白的合成與組裝對于精細胞的基因組濃縮也是非常重要的,。若魚精蛋白的量減少,,精子在ICSI后提前解凝,導致受精失敗,。當精子進入卵子后精子染色質提前濃縮也導致其提前解凝,,精子和卵子遺傳物質的同步節(jié)奏被打破,也造成受精失敗,。不過這種同步性異常主要還是卵子因素造成的,。PMM 壓電顯微操作儀提高ICSI成功率。香港透明帶打孔壓電胚胎干細胞
下面我們利用壓電陶瓷測試壓電效應和逆壓電效應,。
常用的壓電陶瓷是由鋯鈦酸鉛(PZT)材料做成的,。將PZT材料做成的壓電陶瓷片粘在圓形黃銅片上就構成了壓電陶瓷元件。它具有明顯的壓電效應,。首先,,將壓電陶瓷片A的兩根引線通過一個按鈕開關與信號發(fā)生器相聯(lián)。將壓電陶瓷片B的兩根引線與擴音器(帶喇叭)的輸入端相連,。將A,、B兩個壓電陶瓷片用黑封泥固定在同一個木板制成的箱子上。當觀察者將按鈕開關按下,接通信號發(fā)生器和壓電陶瓷A時,,由于逆壓電效應,,A開始振動,并把振動傳給木箱,,木箱的振動傳給壓電陶瓷B,,由于壓電效應,使B兩邊產(chǎn)生變化電信號,,再傳給擴音器使喇叭發(fā)聲,,所以這個實驗同時演示了壓電效應和逆壓電效應。 昆明透明帶打孔壓電核轉移壓電顯微操作儀PMM 6可用于豬卵母細胞和胚胎的ICSI等實驗,。
在正常受精過程中,,精子進入卵子后,會導致卵細胞內的鈣離子濃度發(fā)生持續(xù)數(shù)小時的周期性的短暫升高,,這個過程被稱為卵子的“鈣震蕩”,,鈣震蕩會引發(fā)大量生化反應事件,代謝活動重新活躍起來,,這個過程稱為卵子***,。精子***后的卵子會發(fā)生一系列的變化,包括細胞內鈣離子濃度升高,,皮質反應,,透明帶反應等,然后卵子完成第二次減數(shù)分裂,,排出第二極體,,開啟后續(xù)的胚胎發(fā)育過程。第二代試管嬰兒(ICSI)授精后,,成熟卵子見不到2原核的受精標志,,稱為ICSI完全受精失敗。ICSI受精失敗在ICSI周期中比例約為1%-3%,,其中30%的夫婦會發(fā)生反復持續(xù)的受精失敗,,是臨床中極其棘手的難題。即使是經(jīng)驗豐富的胚胎學家,,也無法避免這種情況,。卵母細胞***失敗是ICSI受精失敗的主要原因之一。
ICSI技術作為輔助受精的一種手段,,在近10年獲得長足發(fā)展,。ICSI技術在動物受精機理研究、野生動物遺傳資源保存,、拯救珍稀動物和胚胎工廠化生產(chǎn)等方面有著非常廣闊的應用前景。該技術已經(jīng)成為人類臨床醫(yī)學上***男性不育癥的重要手段,并在全世界得到廣泛應用,。
盡管ICSI已取得很大成就,,但是其存在的問題也不容忽視。首先,,由于人為地選擇,,動物自身對精子優(yōu)勝劣汰的選擇遭到破壞。這對動物種群的發(fā)展產(chǎn)生的影響還需長期深入的研究,。如果能詳細了解精子的表型和基因型之間的關系,,相信ICSI技術的可靠性會有所明確。其次,,作為胚胎生物技術的一部分,。ICSI 技術也存在總體效率低的問題,而且胚胎移植后妊娠率低而流產(chǎn)率高亦是目前存在的普遍問題,。另外,,存在出生動物的死亡和畸形等不良后果。因此要更深入地研究其機理和操作等問題,,進一步改善ICSI技術,。比如Piezo-ICSI技術就可以有效提高成功率。 壓電破膜儀 PMM PIEZO-ICSI操作簡便,,醫(yī)生只需掌握基本的操作技巧,,即可熟練操作。
機器人安裝接近覺傳感器主要目的有以下三個:其一,,在接觸對象物體之前,,獲得必要的信息,為下一步運動做好準備工作,;其二,,探測機器人手和足的運動空間中有無障礙物。如發(fā)現(xiàn)有障礙,,則及時采取一定措施,,避免發(fā)生碰撞;其三,,為獲取對象物體表面形狀的大致信息,。超聲波是人耳聽不見的一種機械波,頻率在20KHZ以上,。超聲傳感器包括超聲發(fā)射器,、超聲接受器、定時電路和控制電路四個主要部分,。它的工作原理大致是這樣的:首先由超聲發(fā)射器向被測物體方向發(fā)射脈沖式的超聲波,。發(fā)射器發(fā)出一連串超聲波后即自行關閉,,停止發(fā)射。同時超聲接受器開始檢測回聲信號,,定時電路也開始計時,。當超聲波遇到物體后,就被反射回來,。等到超聲接受器收到回聲信號后,,定時電路停止計時。此時定時電路所記錄的時間,,是從發(fā)射超聲波開始到收到回聲波信號的傳播時間,。利用傳播時間值,可以換算出被測物體到超聲傳感器之間的距離,。這個換算的公式很簡單,,即聲波傳播時間的一半與聲波在介質中傳播速度的乘積。超聲傳感器整個工作過程都是在控制電路控制下順序進行的,。壓電材料除了以上用途外還有其它相當廣泛的應用,。如鑒頻器、壓電震蕩器,、變壓器,、濾波器等。通過使用PMM PIEZO-ICSI,,醫(yī)生可以更加精確地進行受精操作,,提高受孕成功率,為患者創(chuàng)造更多的生命奇跡,。深圳prime tech壓電顯微注射
PRIME TECH PMM 6兼容多種顯微操作系統(tǒng),。香港透明帶打孔壓電胚胎干細胞
Piezo-ICSI程序:
使用直徑100-mm的細胞培養(yǎng)皿上蓋,準備操作盤;按照Piezo操作系統(tǒng)的要求,,將4μL左右的汞從后部裝入注射針中,,輕輕將汞推至針尖處,在20-25℃室溫下,,準備進行顯微操作,。具體操作前,首先取10枚卵母細胞置于15L含3 % suerose的HEPES-CZB操作滴中備用,;然后將2.5μL精子溶液與5pLHEPES-CZB+ 12 % PVP-360操作滴充分混合,;再將單個精子從尾部吸入注射針,用Piezo脈沖從頸部斷開頭和尾,;連續(xù)剪切5個精子后,,將吸入全部精子頭的注射針轉移到放置卵母細胞的操作滴中,準備將精子頭逐個注射至卵母細胞質中,。注射時,,從時鐘9點的方向吸住卵母細胞,,使紡錘體保持在6點或12點的位置,從3點的方向輕輕進針,,同時用Piezo脈沖擊穿透明帶,,將透明帶碎片吹出注射針的同時,,將精子頭吹至針尖處,,繼續(xù)進針,直至針尖插入卵母細胞深處,,幾乎貼近對側質膜時,,用Piezo弱脈沖擊穿卵母細胞質膜,將精子頭吐出,,回吸注入卵內多余的操作液,,輕輕退針,完成一次注射,。依次操作,,盡快實現(xiàn)該批卵母細胞的注射,室溫放置5min,然后用大量CZB溶液洗滌ICSI胚胎,,并且移入CO?箱培養(yǎng),。依法進行第二批卵母細胞的精子頭注射,在注射HCG后17 h,完成全部卵母細胞的精子注射,。 香港透明帶打孔壓電胚胎干細胞