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香港雙折射性紡錘體卵冷凍研究

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024-11-15

在紡錘體卵冷凍過程中,利用紡錘體實(shí)時(shí)成像技術(shù)可以實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)紡錘體的變化,。通過觀察冷凍過程中紡錘體的形態(tài),、位置及動(dòng)態(tài)變化,研究者可以判斷冷凍保護(hù)劑的效果,、冷凍速率等因素對(duì)紡錘體的影響,,從而優(yōu)化冷凍方案,減少紡錘體損傷,。解凍后,,利用紡錘體實(shí)時(shí)成像技術(shù)可以對(duì)卵母細(xì)胞內(nèi)的紡錘體進(jìn)行再次評(píng)估。通過比較解凍前后紡錘體的形態(tài)和穩(wěn)定性,,研究者可以判斷冷凍過程對(duì)紡錘體的損傷程度,,并篩選出紡錘體形態(tài)完好的卵母細(xì)胞進(jìn)行后續(xù)操作,提高受精率和胚胎發(fā)育質(zhì)量,。紡錘體微管的正極朝向細(xì)胞兩極,,負(fù)極則靠近染色體。香港雙折射性紡錘體卵冷凍研究

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如何觀察紡錘體呢,?

在普通光學(xué)顯微鏡下,,人類卵母細(xì)胞是半透明的,無(wú)法對(duì)紡錘體的結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察和分析,。傳統(tǒng)方法是用一種特異的DNA熒光染料對(duì)卵母細(xì)胞染色,,在紫外光下可顯示紡錘體,這種免疫熒光方法對(duì)卵母細(xì)胞有損傷,,不能應(yīng)用于臨床,。為了更好的觀測(cè)紡錘體,美國(guó)海洋生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的R.Oldenbourg等利用紡錘體的雙折射特性,,開發(fā)出偏振光顯微鏡?,F(xiàn)今,偏振光顯微鏡已經(jīng)發(fā)展成為一種無(wú)創(chuàng)性的觀察和分析紡錘體動(dòng)態(tài)結(jié)構(gòu)的顯微觀測(cè)系統(tǒng),,我們也叫它紡錘體觀測(cè)儀,。它不僅能對(duì)雙折射性紡錘體信號(hào)的有無(wú)進(jìn)行定性分析,還能對(duì)信號(hào)的強(qiáng)弱進(jìn)行定量分析,。 武漢偏光成像紡錘體價(jià)格紡錘體微管的穩(wěn)定性受到細(xì)胞內(nèi)外多種信號(hào)的調(diào)節(jié),。

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    盡管紡錘體在有絲分裂與減數(shù)分裂中的作用有所不同,但兩者也存在一些共性。首先,,紡錘體的形成都依賴于中心體的復(fù)制和分離,,以及微管的動(dòng)態(tài)生長(zhǎng)和縮短。其次,,在有絲分裂和減數(shù)分裂的中期,,染色體都排列在赤道板上,形成了清晰的紡錘體結(jié)構(gòu),。此外,,在有絲分裂和減數(shù)分裂的后期,染色體的著絲點(diǎn)都一分為二,,導(dǎo)致姐妹染色單體或同源染色體分離,,分別移向細(xì)胞的兩極。這一過程確保了每個(gè)子細(xì)胞都能獲得完整的染色體組,。盡管紡錘體在有絲分裂與減數(shù)分裂中存在共性,但兩者也存在明顯的差異,。

紡錘體,,顧名思義,其形狀類似于紡織用的紡錘,,是在細(xì)胞分裂前初期到末期形成的一種特殊細(xì)胞器,。它的主要元件包括微管、附著微管的動(dòng)力分子分子馬達(dá),,以及一系列復(fù)雜的超分子結(jié)構(gòu),。微管是紡錘體的基礎(chǔ)骨架,由αβ-微管蛋白二聚體組成,,這些微管相互交錯(cuò),,形成紡錘狀結(jié)構(gòu),將染色體緊密地聯(lián)系在一起,。在動(dòng)物細(xì)胞中,,紡錘體的形成和組裝通常由中心體引導(dǎo)和控制。中心體是一個(gè)位于細(xì)胞質(zhì)中的復(fù)合體,,由兩個(gè)中心粒嵌套在被稱為pericentriolarmaterial(PCM)的區(qū)域內(nèi)組成,。PCM富含微管相關(guān)蛋白和其他蛋白質(zhì),如谷氨酸脫羧酶等微管主要蛋白,,這些蛋白質(zhì)共同協(xié)作,,確保紡錘體的正確組裝和穩(wěn)定。相比之下,,高等植物細(xì)胞的紡錘體并不包含中心體,,而是由細(xì)胞極板附近的微管組織形成。紡錘體形成缺陷是多種遺傳疾病的共同特征。

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紡錘體觀測(cè)儀使ICSI更加安全可靠

在進(jìn)行單精子卵胞漿內(nèi)注射(ICSI)授精時(shí),,**初人們觀察人體內(nèi)成熟的卵母細(xì)胞時(shí),,通常認(rèn)為,卵母細(xì)胞紡錘**于***極體附近,,故傳統(tǒng)的ICSI操作是轉(zhuǎn)動(dòng)卵母細(xì)胞使其***極**于6點(diǎn)或12點(diǎn)處,,然后在3點(diǎn)處注入精子。但是,,在大量使用紡錘體觀測(cè)儀后發(fā)現(xiàn),,***極體并不能很好地預(yù)測(cè)紡錘體的位置。一項(xiàng)研究提示,,在ICSI后,,用紡錘體觀測(cè)儀觀察紡錘體與***極體的夾角,結(jié)果發(fā)現(xiàn)小于30°這組卵母細(xì)胞的正常受精率更高,。極體在卵周隙中的移動(dòng),,或者紡錘體在胞質(zhì)中的易位都使兩者的位置關(guān)系發(fā)生改變,普通光學(xué)顯微鏡下ICSI穿刺部位的選擇,,可能會(huì)損傷紡錘體和(或)造成染色體的異常,。通過紡錘體觀測(cè)儀,可以精確地對(duì)卵母細(xì)胞中紡錘體的位置進(jìn)行定位,,從而避免在ICSI過程中損傷紡錘體,,使ICSI更加安全可靠。有文獻(xiàn)報(bào)道,,在進(jìn)行ICSI時(shí),,觀察到“雙折射紡錘體”的成熟卵母細(xì)胞的受精率和質(zhì)量胚胎率***高于未觀察到雙折射紡錘體組。也有學(xué)者發(fā)現(xiàn),,有些卵母細(xì)胞在普通光學(xué)顯微鏡下看到是正常的,,但在紡錘體觀測(cè)儀這個(gè)“照妖鏡”下,就能顯出原形,,表現(xiàn)為有***極體,、但缺乏雙折射的紡錘體,這類卵母細(xì)胞ICSI后的受精率和妊娠率極低,。 紡錘體的形成和功能與細(xì)胞的周期調(diào)控密切相關(guān),。香港無(wú)損觀察紡錘體卵細(xì)胞評(píng)價(jià)

紡錘體在細(xì)胞分裂過程中與細(xì)胞骨架協(xié)同工作。香港雙折射性紡錘體卵冷凍研究

無(wú)需染色紡錘體觀察技術(shù)能夠?qū)崟r(shí)監(jiān)測(cè)冷凍過程中紡錘體的形態(tài)變化,,從而準(zhǔn)確評(píng)估冷凍保存的效果,。通過對(duì)比冷凍前后紡錘體的形態(tài)和穩(wěn)定性,研究者可以優(yōu)化冷凍保護(hù)劑的配方和濃度,,以及改進(jìn)冷凍程序,,減少冷凍損傷,,提高解凍后卵母細(xì)胞的存活率和發(fā)育潛能。解凍后的卵母細(xì)胞在無(wú)需染色的情況下,,可以直接通過Polscope系統(tǒng)進(jìn)行紡錘體觀察,。這一技術(shù)能夠迅速評(píng)估解凍后卵母細(xì)胞的質(zhì)量,包括紡錘體的形態(tài),、位置,、穩(wěn)定性等關(guān)鍵指標(biāo),為后續(xù)的受精和胚胎發(fā)育提供重要參考,。香港雙折射性紡錘體卵冷凍研究