壓電式破膜儀的原理壓電式破膜儀的原理基于壓電效應(yīng),。當(dāng)壓電陶瓷通電后,它會產(chǎn)生高頻振動,。這種振動被傳遞到顯微操作針上,,使針產(chǎn)生振動。這種振動用于在顯微操作過程中打孔或穿孔細(xì)胞膜,,特別是在哺乳動物胚胎透明帶細(xì)胞膜的穿孔任務(wù)中,。壓電式破膜儀可以配合顯微操作臂和顯微注射儀使用,以提高克隆動物中核移植,、小鼠ICSI等工作的成功率,。由于壓電脈沖能直接無損失地傳輸?shù)讲僮麽樕希沟眉?xì)胞膜的穿孔更加精確和可靠,。這種顯微操作方式提高了多種實驗的成功率,,包括胚胎干細(xì)胞或誘導(dǎo)多能干細(xì)胞的寒胚移植、小鼠ICSI等,。此外,,壓電式破膜儀操作直觀、簡單快捷,,具有可重復(fù)性的參數(shù)設(shè)置,,實驗參數(shù)可記憶,也可以選用人體工程學(xué)腳踏或儀器上的旋鈕進(jìn)行操作,。 壓電顯微操作儀PMM 6可用于牛卵母細(xì)胞和胚胎的ICSI等實驗,。美國壓電4G
Piezo-ICSI程序:
使用直徑100-mm的細(xì)胞培養(yǎng)皿上蓋,準(zhǔn)備操作盤;按照Piezo操作系統(tǒng)的要求,,將4μL左右的汞從后部裝入注射針中,,輕輕將汞推至針尖處,,在20-25℃室溫下,準(zhǔn)備進(jìn)行顯微操作,。具體操作前,,首先取10枚卵母細(xì)胞置于15L含3 % suerose的HEPES-CZB操作滴中備用;然后將2.5μL精子溶液與5pLHEPES-CZB+ 12 % PVP-360操作滴充分混合,;再將單個精子從尾部吸入注射針,,用Piezo脈沖從頸部斷開頭和尾;連續(xù)剪切5個精子后,,將吸入全部精子頭的注射針轉(zhuǎn)移到放置卵母細(xì)胞的操作滴中,,準(zhǔn)備將精子頭逐個注射至卵母細(xì)胞質(zhì)中。注射時,,從時鐘9點的方向吸住卵母細(xì)胞,,使紡錘體保持在6點或12點的位置,從3點的方向輕輕進(jìn)針,,同時用Piezo脈沖擊穿透明帶,,將透明帶碎片吹出注射針的同時,將精子頭吹至針尖處,,繼續(xù)進(jìn)針,,直至針尖插入卵母細(xì)胞深處,幾乎貼近對側(cè)質(zhì)膜時,,用Piezo弱脈沖擊穿卵母細(xì)胞質(zhì)膜,,將精子頭吐出,回吸注入卵內(nèi)多余的操作液,,輕輕退針,,完成一次注射。依次操作,,盡快實現(xiàn)該批卵母細(xì)胞的注射,,室溫放置5min,然后用大量CZB溶液洗滌ICSI胚胎,并且移入CO?箱培養(yǎng),。依法進(jìn)行第二批卵母細(xì)胞的精子頭注射,,在注射HCG后17 h,完成全部卵母細(xì)胞的精子注射。 日本PMM 壓電平口針日本PRIME TECH 從PMM 150FU到PMM 4G,,再到新一代的PMM 6,。
壓電式壓力傳感器的優(yōu)點是具有自生信號,輸出信號大,,較高的頻率響應(yīng),,體積小,結(jié)構(gòu)堅固,。其缺點是只能用于動能測量,。需要特殊電纜,在受到突然振動或過大壓力時,,自我恢復(fù)較慢,。壓電式加速度傳感器壓電元件一般由兩塊壓電晶片組成。在壓電晶片的兩個表面上鍍有電極,,并引出引線,。在壓電晶片上放置一個質(zhì)量塊,質(zhì)量塊一般采用比較大的金屬鎢或高比重的合金制成,。然后用一硬彈簧或螺栓,,螺帽對質(zhì)量塊預(yù)加載荷,整個組件裝在一個原基座的金屬殼體中,。當(dāng)傳感器受振動力作用時,,由于基座和質(zhì)量塊的剛度相當(dāng)大,而質(zhì)量塊的質(zhì)量相對較小,,可以認(rèn)為質(zhì)量塊的慣性很小,。因此質(zhì)量塊經(jīng)受到與基座相同的運(yùn)動,并受到與加速度方向相反的慣性力的作用,。這樣,,質(zhì)量塊就有一正比于加速度的應(yīng)變力作用在壓電晶片上。由于壓電晶片具有壓電效應(yīng),,因此在它的兩個表面上就產(chǎn)生交變電荷(電壓),,當(dāng)加速度頻率遠(yuǎn)低于傳感器的固有頻率時,傳感器給輸出電壓與作用力成正比,,亦即與試件的加速度成正比,,輸出電量由傳感器輸出端引出,輸入到前置放大器后就可以用普通的測量儀器測試出試件的加速度,;如果在放大器中加進(jìn)適當(dāng)?shù)姆e分電路,,就可以測試試件的振動速度或位移。
傳統(tǒng)的ICSI是通過授精針刺破卵子,,將挑選好的精子注入使之受精,。本質(zhì)上對卵子來說是一種物理性侵入,特別對于幼弱老化的卵子可能會有一定損傷的風(fēng)險,。而全新的壓電式胞漿內(nèi)單精子注射(Piezo-ICSI)技術(shù),,可以減少對卵子的傷害,相較于常規(guī)式的ICSI相比更能提高受精率,。
Piezo-ICSI超音振動顯微受精法,,采用極細(xì)(0.908毫米)的平口注射針,比常規(guī)的注射針(1.473mm)細(xì)小了將近一半,,能夠?qū)⒙殉驳膫档奖容^低,。另一方面,,精子注射的過程對卵子的影響也極其重要。Piezo-ICSI技術(shù)通過超音振動來打開卵子透明帶再將精子注入,,減少了對卵子的損傷,,也能夠提高胚胎成功受精的幾率。研究數(shù)據(jù)顯示,,以原有的人工授精療法ICSI與Piezo-ICSI進(jìn)行比較,,受精率從83.1%提高到90.3%,細(xì)胞分裂優(yōu)化由84.60%提高到88.10%,。 “PIEZO PMM 6”是一種壓電顯微操作系統(tǒng),,作為壓電注射的先驅(qū),投入了大量的資源進(jìn)行其研發(fā),。
在正常受精過程中,,精子進(jìn)入卵子后,會導(dǎo)致卵細(xì)胞內(nèi)的鈣離子濃度發(fā)生持續(xù)數(shù)小時的周期性的短暫升高,,這個過程被稱為卵子的“鈣震蕩”,,鈣震蕩會引發(fā)大量生化反應(yīng)事件,代謝活動重新活躍起來,,這個過程稱為卵子***,。精子***后的卵子會發(fā)生一系列的變化,包括細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度升高,,皮質(zhì)反應(yīng),,透明帶反應(yīng)等,然后卵子完成第二次減數(shù)分裂,,排出第二極體,,開啟后續(xù)的胚胎發(fā)育過程。第二代試管嬰兒(ICSI)授精后,,成熟卵子見不到2原核的受精標(biāo)志,,稱為ICSI完全受精失敗。ICSI受精失敗在ICSI周期中比例約為1%-3%,,其中30%的夫婦會發(fā)生反復(fù)持續(xù)的受精失敗,,是臨床中極其棘手的難題。即使是經(jīng)驗豐富的胚胎學(xué)家,,也無法避免這種情況,。卵母細(xì)胞***失敗是ICSI受精失敗的主要原因之一。通過使用PMM PIEZO-ICSI,,醫(yī)生可以更加精確地進(jìn)行受精操作,,提高受孕成功率,為患者創(chuàng)造更多的生命奇跡,。武漢透明帶穿孔壓電力度溫和
Piezo-ICSI 相比常規(guī) ICSI方法,,可有效提高ICSI受精率,。美國壓電4G
piezoelectric polymer壓電現(xiàn)象是由于應(yīng)力作用于材料,在材料表面誘導(dǎo)產(chǎn)生電荷的過程,,一般這一過程是可逆的,,即當(dāng)材料受到電參數(shù)作用,材料也會產(chǎn)生形變能,。木材纖維素、腱膠原和各種聚氨基酸都是常見的高分子壓電性材料,,但是其壓電率太低,,而沒有使用價值。在有機(jī)高分子材料中聚偏氟乙烯等類化合物具有較強(qiáng)的壓電性質(zhì),。壓電率的大小取決于分子中含有的偶極子的排列方向是否一致,。除了含有具有較大偶極矩的C-F鍵的聚偏氟乙烯化合物外,許多含有其他強(qiáng)極性鍵的聚合物也表現(xiàn)出壓電特性,。如亞乙烯基二氰與乙酸乙烯酯,、異丁烯、甲基丙烯酸甲酯,、苯甲酸乙烯酯等的共聚物,,均表現(xiàn)出較強(qiáng)的壓電特性。而且高溫穩(wěn)定性較好,。主要作為換能材料使用,,如音響元件和控制位移元件的制備。前者比較常見的例子是超聲波診斷儀的探頭,、聲納,、耳機(jī)、麥克風(fēng),、電話,、血壓計等裝置中的換能部件。將兩枚壓電薄膜貼合在一起,,分別施加相反的電壓,,薄膜將發(fā)生彎曲而構(gòu)成位移控制元件。利用這一原理可以制成光學(xué)纖維對準(zhǔn)器件,、自動開閉的簾幕,、唱機(jī)和錄像機(jī)的對準(zhǔn)件。美國壓電4G