人類精子冷凍保存和儲存:增加了冷凍樣本的安全性、精液冷凍保存方案,、快速液氮熏蒸冷凍,、冷凍精液的解凍、玻璃化冷凍等內容,,更具可操作性,。本手冊對人類精子的冷凍保存提出了具體建議:將樣本分管分罐分開儲存;對使用的材料和留存標本建立定期核驗程序,;所有儲罐都應有液位監(jiān)控報警系統(tǒng),,以監(jiān)測溫度和液氮液位,傳感器應連接警報器,,可通過實驗室人員的終端進行提醒,。新證據(jù)表明,,玻璃化冷凍是冷凍保存精液的一種有價值的方法。該方法的原理是將小體積樣本與無污染液氮直接接觸并快速冷凍,,可以防止冰晶的形成,,并減少精子的滲透性損傷。在麥管玻璃化冷凍(無菌玻璃化冷凍)中,,也可以使用封閉系統(tǒng),,不需要無菌的液氮。精子分析,,平均角位移(MAD)?:精子頭沿其曲線軌跡瞬時轉折角度的時均J對值?,。廣州計算機輔助精子分析LIN
檢查具備條件
受檢者,經(jīng)歷一段經(jīng)常排精過程后,,禁房事5-7天(上次排精到取標本間隔時間至少不得少于100小時),; [1]備大口有蓋清潔干燥容器一個,以**方式獲取精液,,一次全部射入容器,,蓋上蓋,記錄標本離體時間,; 貼身保溫,,30分鐘內送到化驗室,并向檢驗員提供標本取出時間,。 精液常規(guī)觀察:精液總容量(毫升),,精子活動情況,精子密度(個/毫升),,精液液化時間(標本取出到精液液化的時間),,不動精子(個/高倍視野)等。見不動精子,,須染色方可區(qū)分:不活動的精子,、死精子、未成熟精子等,。找不到精子必須離心后檢驗,,仍然找不到精子;方可報告無精,。經(jīng)三次取樣化驗,,結果仍然找不到精子方可確認無精子癥。 兔子精子分析W.H.O 5IVOS具有高分辨率和高靈敏度的特點,,能夠捕捉到微小的細節(jié)和變化,,進一步提高了精子分析的準確性。
精液一般檢查
(1)精液量:正常人一次排精2~5ml。(2)顏色和透明度:正常剛射出的精液呈乳白色或灰白色,,液化后呈半透明乳白色,,久未排精者可呈淡黃色。鮮紅色或暗紅色的血精見于生殖系統(tǒng)炎癥,、結核,、和**,黃色膿樣精液,,見于精囊炎或前列腺炎,。(3)粘稠度和液化:正常新鮮的精液排出后數(shù)秒呈粘稠膠凍狀,在精液中纖溶酶的作用下30分鐘后開始液化,。如果粘稠度降低呈米湯樣,,可能是精子數(shù)量減少,見于生殖系統(tǒng)炎癥,,精液不凝固見于精囊阻塞或損傷,;如果精液1小時后不液化,可能是由于炎癥破壞纖溶酶所致,,如前列腺炎,,精子不液化可以抑制精子活動力而影響受孕。(4)酸堿度:pH值,。正常精液呈弱堿性pH7.2~8.0,,以利于中和酸性的陰道分泌物,pH值小于7或大于8都能影響精子的活動和代謝,,不利于受孕,。
全自動的IVOS可以提供**快的分析速度以及高質量數(shù)據(jù)輸出??梢允褂靡淮涡缘暮涂芍貜偷妮d玻片,深度從10um~100um,。每次分析捕捉100幀圖像,,掃描速度每秒60幀。**的軟件升級,。
IVOS能提供:精確,、客觀、具有重復性的結果,。高速分析,,在60Hz下半秒掃描30幀,為實驗室節(jié)省成本,。 [1]主要功能IVOS自動精子活動,、濃度、形態(tài)分析系統(tǒng),。Hamilton Thorne的CASA系統(tǒng)適用于臨床,、研究實驗室,、動物繁殖基地、水產(chǎn)業(yè),、制藥公司等各種領域,,成為了精液分析業(yè)的金標準??梢詰糜诎ㄈ祟?、公牛、馬,、野豬,、狗、兔子,、老鼠,、綿羊、山羊,、魚以及各種瀕危動物,。在TOX IVOS上有**的大鼠精液分析軟件。 精子分析,,直線速率(VSL)?:精子頭在開始檢測時的位置與終止所處位置之間的直線運動的時均速率,。
精子分析儀使用方法
儀器的使用方法因型號、廠家差異不盡相同,,操作人員上崗前必須經(jīng)過嚴格培訓,,了解工作原理、操作規(guī)程,、校正方法等,,使用前必須仔細閱讀說明書。一般儀器都會經(jīng)歷如下操作步驟 [1]:開機接通電源,,打開計算機輔助**分析系統(tǒng),。1.輸入患者信息及**理學檢查結果。2.加樣取液化的**1滴,,滴入精子計數(shù)板的計數(shù)池中,,置顯微鏡操作平臺上,點擊“活動顯示”菜單,,調節(jié)好顯微鏡焦距,,顯示器上即可顯示待測標本的精子運動圖像。3.分析點擊“計算分析”菜單,,系統(tǒng)進入自動分析狀態(tài),,圖像顯示區(qū)出現(xiàn)精子分割圖像并進行分析。4.打印報告分析結束后,可根據(jù)需要打印出分析結果,。 精子分析儀參數(shù),,平均路徑速率(VAP)?:精子頭沿其平均路徑移動時的時均速率。香港Hamilton Thorne精子分析
計算機輔助精子分析(computer- assisted sperm analysis)是2014年公布的泌尿外科學名詞,。廣州計算機輔助精子分析LIN
通過結果的生物學意義對結果質量進行評估?當所有具生物學意義的參數(shù)在測試中表現(xiàn)出較小的可變性時則方法學可變性亦較低方法學可變性低則結果質量就高,。CASA系統(tǒng)獲得的數(shù)值與直觀評估獲得的數(shù)值進行分析和比較在精子數(shù)量和綜合運動性上具有較好的相關性而·131·中國優(yōu)生與遺傳雜志2002第10卷第6期DOI:10.13404/j.cnki.cjbhh.2002.06.091在前向運動精子百分率上的相關性較低]。Holt等報道了在常規(guī)實驗條件下采用五種不同的CASA系統(tǒng)對**參數(shù)值進行比較,,其結果為:采用同一個測定池由不同的操作者測定**參數(shù),;變異系數(shù)(CV)是29%?活動精子比率的CV為24%?平均路徑速度(VAP)的CV為43?85%。作者們指出該分析結果不應看作是不同CASA系統(tǒng)間的工作情況的比較?實際上它揭示了操作者的錯誤是差異的主要來源,。目前有待于尋找進一步的標準來評估CASA變量的結果質量,。精子***的生物學功能是使卵細胞授精?因此用夫婦中的授精結果來考察精子運動性是合理的?只有在該基礎上能夠確定活動性參數(shù)的重要性。輔助生殖技術(授精IVF)的發(fā)展使檢測精子質量與各參數(shù)間的關系的比較成為可能,;同樣可以驗證CASA測定結果與精子真實質量間的相關性有利于CASA結果質量的提高,。廣州計算機輔助精子分析LIN