方法:使用兩種已知濃度的質(zhì)控乳膠珠溶液,1份濃度為(35±5)×106/ml,另1份濃度為(18.0±2.5)×106/ml,評價4種計數(shù)方法的準確性和精確性,并比較4種方法計數(shù)精液的結(jié)果。結(jié)果:計數(shù)乳膠珠時,CellVU計數(shù)池的結(jié)果**接近已知濃度,分別為(39.70±4.76),、(19.09±2.02)×106/ml,變異系數(shù)(CV)值分別為12.80%和10.58%;血細胞計數(shù)池和Makler計數(shù)池結(jié)果均高于已知濃度,前者為(44.84±4.86)×106/ml,、(21.04±1.87)×106/ml,CV值分別為10.81%和8.89%,后者為(52.36±7.78)×106/ml,、(24.54±3.67)×106/ml,CV值分別為14.86%和14.96%;CASA系統(tǒng)結(jié)果低于已知濃度,為(28.53±2.06),、(14.62±0.95)×106/ml,但CV值比較低,分別為7.22%和6.50%。計數(shù)精液時,CellVU計數(shù)池與CASA系統(tǒng)結(jié)果差異無***性(P=0.71),分別為(45.28±34.52)、(41.96±31.93)×106/ml,血細胞計數(shù)池和Makler計數(shù)池結(jié)果差異無***性(P=0.14),分別為(76.98±59.90),、(63.89±53.84)×106/ml,CellVU計數(shù)池,、CASA系統(tǒng)與血細胞計數(shù)池、Makler計數(shù)池結(jié)果間差異***(P<0.05或P<0.01),。結(jié)論:計數(shù)精液時,CASA系統(tǒng)與CellVU計數(shù)結(jié)果差異無***性,。各實驗室可選擇合適的手工或CASA計數(shù)方法。計算機輔助精子分析（computer- assisted sperm analysis）是2014年公布的泌尿外科學名詞,。美國瀕危物種精子分析DAP

CASA可將每個精子的活力按以下分級：（1）前向運動型（PR）：精子運動活躍,、線性運動或者在較大的范圍內(nèi)運動。（2）非前向運動型（NP）：所有其他非前向運動的形式,，如精子在較小的范圍內(nèi)運動,，精子頭部輕微移位或只觀察到尾部擺動。（3）完全不動型（IM）：精子完全不動,。CASA系統(tǒng)檢測的這些參數(shù)有一套標準的術(shù)語,。（1）VCL=曲線速度（mm/s）。精子頭沿其實際的曲線,，即在顯微鏡下見到的二維方式運動軌跡的平均速度,。檢測細胞活力。（2）VSL=直線速度（mm/s）,。根據(jù)精子頭在開始檢測時的位置與***所處位置之間的直線運動的時間平均速度,。（3）VAP=平均路徑速度（mm/s）。精子頭沿其空間平均軌跡移動的時間平均速度,。（4）ALH=精子頭側(cè)擺幅度（mm）,。精子頭沿其空間平均軌跡側(cè)擺的幅度。以側(cè)擺的最大值或平均數(shù)值表示,。（5）LIN=直線性,。曲線軌跡的直線性。即VSL/VCL,。（6）WOB=擺動性,。精子頭沿其實際軌跡的空間平均路徑擺動的尺度。即VAP/VCL,。（7）STR=前向性,。空間平均路徑的直線性,。即VSL/VAP。（8）BCF=鞭打頻率（Hz）,。精子曲線軌跡越過其平均路徑軌跡的時間平均速率,。（9）MAD=平均移動角度（度）。精子頭沿其曲線軌跡瞬間轉(zhuǎn)折角度的時間平均***值。美國計算機輔助精子分析高準確率全自動精子分析儀極大提高臨床檢驗水平,，廣泛應用于泌尿科,，男性科以及計劃生育、優(yōu)生優(yōu)育研究等,。

精子分析儀工作原理以灰度識別CASA為例,，采用高分辨率的攝影技術(shù)與顯微鏡結(jié)合，**標本液化后吸入計數(shù),，通過顯微鏡放大后,，用圖像采集系統(tǒng)獲取精子動、靜態(tài)圖像后輸入計算機,。根據(jù)設(shè)定的精子大小和灰度,、精子運動移位及運動參數(shù)，對采集圖像進行精子密度,、活動力,、活動率、運動特征等幾十項檢驗項目動態(tài)分析,，由計算機處理后,，打印出“**分析檢查報告以及精子動態(tài)特征分布圖”。一次能對1000個精子進行動態(tài)檢測分析,，2-3分鐘即可完成檢測[1],。優(yōu)點：操作簡便，用量少,，檢測速度快,，重復性優(yōu)于人工檢測，并且能夠快速,、準確的測定精子密度,、活力、精子分級等,，還可提供精子運動狀態(tài)的多種參數(shù)等,。缺點：影響分析結(jié)果的因素較多，除**本身性質(zhì)所含的固有誤差外,，不同的精子計數(shù)池的相對準確性和精確性可產(chǎn)生明顯不一致的效果,。

二,、生化及免疫學檢驗：5、精漿肉堿測定【正常參考值】濃度為239.56±l05.59umol/L,。【臨床意義】精漿肉堿測定精漿中的肉堿主要由附睪分泌,，其次是精囊,。精漿中肉堿分為游離肉堿和乙酰肉堿二種,，附睪中含高濃度的肉堿，主要與精子在附睪成熟時所需的能量來源有關(guān)?，F(xiàn)認為精漿肉堿含量和果糖含量的變化,，常反映附睪、精囊的功能,。精漿肉堿及果糖含量正常，表明附睪,、精囊功能正常,。當肉堿含量高于正常的50%,，而果糖含量降低,，則提示精囊功能障礙,，附睪功能正常；精漿肉堿約為正常含量的50%左右,，果糖含量正常,，說明附睪功能障礙，精囊功能正常,；而肉堿急劇下降,，果糖含量亦減少,，表示精囊,、附睪功能均發(fā)生障礙,。6,、抗精子抗體(AsAb)測定【正常參考值】陰性,?！九R床意義】AsAb檢測對不育原因檢查有重要臨床意義。存在于血清或生殖道分泌液中的AsAb,，可抑制精子的活動，干擾精子的運行,，阻礙精子穿透及精卵結(jié)合,，使受精發(fā)生障礙。即使已經(jīng)受精,，也可能影響發(fā)育中的胚胎，造成免疫性流產(chǎn),。不育夫婦AsAb陽性者占25%-30%,，當精子輸出管道受阻、睪丸損傷,、炎癥、附睪等生殖系***時,，系精子外逸而產(chǎn)生的自身抗體,。HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數(shù)，鞭打頻率（BCF）?：精子曲線路徑跨越其平均路徑的平均頻率,。

采集精液前5～7天內(nèi)必須停止性生活，并且不得有**,、夢遺等情況,，還應禁煙戒酒,，忌服對生精功能有影響的藥物等,。采取精液時間以晨起為佳，采精前用溫水將雙手,、**，尤其是**洗凈,?？刹捎?*法或電動按摩**法引起排精。精液的排出具有一定順序,，開頭部分來自前列腺,、附睪及壺腹，伴有大量精子,，***部分來自精囊,，故應收集整份精液，不要遺漏任何部分,，尤其是開頭部分,。正因為易丟失精液的***部分,故不能用體外**法收集精液。盛精液的容器應干凈,、無菌,、干燥，采精前容器的溫度應與室溫相同,；瓶子不應過大,，但瓶口不應過小，以免將精液射出瓶外,；還應貼上標簽,，記錄姓名及取精時間。在冷天應將精液標本保溫,，放置在貼身內(nèi)衣袋中,，不可傾斜或倒置,，盡可能在1小時內(nèi)送到實驗室。計算機輔助精子分析根據(jù)初估的精子濃度選擇合適的檢測方法,，確保檢測過程的準確性和可靠性?。魚精子分析重復性高

CASA系統(tǒng)減少了人為因素對檢測結(jié)果的影響,，提高了檢測的客觀性和可重復性?。美國瀕危物種精子分析DAP

全自動的IVOS可以提供**快的分析速度以及高質(zhì)量數(shù)據(jù)輸出,?？梢允褂靡淮涡缘暮涂芍貜偷妮d玻片，深度從10um～100um,。每次分析捕捉100幀圖像,，掃描速度每秒60幀,。**的軟件升級,。IVOS能提供：精確,、客觀、具有重復性的結(jié)果,。高速分析,，在60Hz下半秒掃描30幀,，為實驗室節(jié)省成本。[1]主要功能IVOS自動精子活動,、濃度,、形態(tài)分析系統(tǒng)。HamiltonThorne的CASA系統(tǒng)適用于臨床,、研究實驗室、動物繁殖基地,、水產(chǎn)業(yè),、制藥公司等各種領(lǐng)域，成為了精液分析業(yè)的金標準,?？梢詰糜诎ㄈ祟?、公牛、馬,、野豬,、狗、兔子,、老鼠,、綿羊、山羊,、魚以及各種瀕危動物。在TOXIVOS上有**的大鼠精液分析軟件,。美國瀕危物種精子分析DAP