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細胞內(nèi)膜打孔壓電小鼠ICSI

來源: 發(fā)布時間:2025-02-28

壓電效應可分為正壓電效應和逆壓電效應,。正壓電壓電效應是指:當晶體受到某固定方向外力的作用時,內(nèi)部就產(chǎn)生電極化現(xiàn)象,同時在某兩個表面上產(chǎn)生符號相反的電荷,;當外力撤去后,晶體又恢復到不帶電的狀態(tài),;當外力作用方向改變時,,電荷的極性也隨之改變;晶體受力所產(chǎn)生的電荷量與外力的大小成正比,。壓電式傳感器大多是利用正壓電效應制成的,。逆壓電是指對晶體施加交變電場引起晶體機械變形的現(xiàn)象。用逆壓電效應制造的變送器可用于電聲和超聲工程,。壓電敏感元件的受力變形有厚度變形型,、長度變形型、體積變形型,、厚度切變型,、平面切變型5種基本形式。壓電晶體是各向異性的,,并非所有晶體都能在這5種狀態(tài)下產(chǎn)生壓電效應,。例如石英晶體就沒有體積變形壓電效應,但具有良好的厚度變形和長度變形壓電效應,。Piezo-ICSI 相比常規(guī) ICSI方法,,可有效提高ICSI受精率。細胞內(nèi)膜打孔壓電小鼠ICSI

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以piezo操作系統(tǒng)為技術支撐,,在掌握小鼠卵母細胞胞漿內(nèi)精子注射技術(ICSI)的基礎上,,進行了ICSI技術生產(chǎn)試管小鼠及轉基因小鼠的嘗試。實驗結果表明以Hepes-CZB+3%蔗糖做操作液,,用來自成年KM鼠附睪尾的新鮮精子頭和pEGFP-N1質粒孵育處理凍融精子頭,,直接注射到B6D2F1小鼠卵母細胞質中,注射后1h,,83.3%的卵母細胞仍然存活,,鮮精組和凍精組各有92.3%和83.0%成活卵子排出極體,、出現(xiàn)原核。用CZB溶液繼續(xù)培養(yǎng)ICSI胚胎,,兩組的卵裂率,、桑椹胚率、囊胚率分別為(97.8%vs94.7%),、(64%vs64.5%),、(5%,vs24.7%),。其中桑椹胚率,、囊胚率均***低于體內(nèi)受精對照組(64%,64.5%vs88%,;5%,,24.7%vs70%P<0.01);將鮮精組原核期120枚胚胎和82枚2-cell胚胎及凍精組135枚原核期胚胎移植后移植到同期km假孕母鼠受體內(nèi),,分別出生28只,、3只、18只ICSI小鼠(黑色或灰色),,效率分別為23.3%,,4%,13.3%,。健康成年的31只ICSI小鼠,,沒有明顯的生理和行為異常。隨機抽取六對鮮精組性成熟ICSI小鼠做交配實驗,,一個月后都有小鼠出生(平均窩產(chǎn)10.7只),。本實驗表明,ICSI精子載體法可以比較高地制造小鼠轉基因胚胎,,小鼠附睪新鮮精子及無抗凍劑保護冷凍致死精子都具有足夠的全程發(fā)育潛力,。昆明prime tech壓電克隆PMM利用壓電單元的快速形變的慣性力來驅動顯微注射針,可以平滑地穿透透明帶和彈性細胞膜,。

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“ICSI”(intracytoplasmicsperminjection)指卵胞漿單精子注射,,其操作主要涉及“精子制動-精子拾取-破膜-注射”幾個步驟,其中在“破膜”(即使用注射針刺破卵膜,,以便將單個精子送入卵胞漿)這一步,,部分患者的卵子會出現(xiàn)“無破膜感”這一特征,這是怎么回事呢,?原來,進行ICSI操作的時候,,并不是直接用注射針徑直扎破卵膜,。技術書籍這樣描述道:“調節(jié)顯微操作作針和卵膜至同一水平面,,將注射針中的精子推至針尖處,注射針從卵子3點鐘位置穿入透明帶并繼續(xù)進針,,至卵中心或越過中心位置,。由于卵膜的彈性,進針處卵膜出現(xiàn)‘漏斗狀’,,但卵膜仍未破裂,,需輕微回吸注射針以確認膜破裂。一旦刺破卵膜可見到胞漿和精子的一個‘快速反流’的過程或可見卵膜‘回彈’現(xiàn)象,,之后將精子注入卵子胞質內(nèi),。這是正常情況下的破膜操作,而文章開頭提到的“無破膜感”,,則是指注射針穿入透明帶的同時也立即穿透卵膜,,不形成漏斗狀結構,看不到胞漿的快速返流或回彈現(xiàn)象,。學術界給具有這一特征的卵子細胞膜起了個特有名稱——脆性卵膜,。

為什么具有“脆性卵膜”的卵子ICSI后容易退化?如下:一,、卵子成熟度不足,。卵子的成熟包括核成熟(以排出***極體為標志)以及胞質成熟,而胞質成熟往往滯后于核成熟,,兩者并不完全同步,。有對照研究表明,脆性卵膜組的成熟卵細胞比例***低于正常破膜組,,ICSI后卵子退化率也高于正常破膜組,,這提示了卵子成熟度與卵膜脆性具有一定的相關性,并**終影響了卵子ICSI后是否存活,。二,、雌***水平。到目前為止,,關于雌***水平對脆性卵膜的影響,,現(xiàn)有的研究結論并不一致,但歸根到底仍然可能是通過影響卵子成熟來改變卵膜的特性,。三,、ICSI機械操作。一方面ICSI是侵襲性操作,,可能破壞卵膜,、細胞骨架等細胞器,另一方面是具有脆性卵膜的卵子缺乏“漏斗”的保護作用,,細胞骨架和卵膜更容易在ICSI過程中崩解,。為避免脆性卵膜卵子ICSI后退化,,除了改善注射方式(如進針前利用激光穿透或削薄透明帶,操作盡可能輕柔等),,還可采用改進的Piezo-ICSI(壓電脈沖破膜輔助ICSI),,能有效改善注射后卵子退化的情況。此外,,在臨床促排卵方面,,也可考慮調整藥物用量,在保證卵泡大小均勻的情況下,,盡量推遲扳機時間,,提高卵母細胞成熟度,減輕ICSI后卵子退化的比例,,以盡可能保證ART***的效果,。壓電破膜儀 PMM PIEZO-ICSI的推廣和應用將為不孕不育患者帶來新的希望和機會,改善他們的生活質量,。

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雖然Piezo-ICSI對于大齡試管準媽媽們的***來說非常有意義,,但這項技術的使用卻對生殖中心有著比較高的門檻。日本英醫(yī)院擁有三臺Piezo-ICSI儀器,,儀器的顯微鏡來自日本精工企業(yè),,手動精密操作臺來自德國。作為**精密儀器,,它的每一個組件成本都達百萬,,整體造價超過千萬。使用Piezo-ICSI不單單是設備升級,,對培養(yǎng)師的操作要求和難度也是直線升級的,。具體說來,因為受精操作是在高倍顯微鏡下利用操作桿來進行的,,需要培養(yǎng)師同時配合操作觀察操作桿,、顯微鏡、受精針和顯示屏,。這么聽起來是不是感覺難度似乎還可以,?然而事實上,在操作的過程中,,培養(yǎng)師需要不斷的進行距離判斷的「切換」:想象一下,,**挪動1cm,鏡下實際只會挪動0.1mm,,但出現(xiàn)在視野中的范圍,,實際上會有5cm那么大!PMM PIEZO的使用不僅可以提高受孕成功率,還可以減少患者的心理壓力和焦慮感,,增強他們的信心,。深圳prime tech壓電克隆

PMM具備快速響應的特點,能夠在短時間內(nèi)完成實驗操作,,減少了操作時間和不確定性。細胞內(nèi)膜打孔壓電小鼠ICSI

壓電式破膜儀的原理壓電式破膜儀的原理基于壓電效應,。當壓電陶瓷通電后,,它會產(chǎn)生高頻振動。這種振動被傳遞到顯微操作針上,,使針產(chǎn)生振動,。這種振動用于在顯微操作過程中打孔或穿孔細胞膜,特別是在哺乳動物胚胎透明帶細胞膜的穿孔任務中,。壓電式破膜儀可以配合顯微操作臂和顯微注射儀使用,,以提高克隆動物中核移植、小鼠ICSI等工作的成功率,。由于壓電脈沖能直接無損失地傳輸?shù)讲僮麽樕?,使得細胞膜的穿孔更加精確和可靠。這種顯微操作方式提高了多種實驗的成功率,,包括胚胎干細胞或誘導多能干細胞的寒胚移植,、小鼠ICSI等。此外,,壓電式破膜儀操作直觀,、簡單快捷,具有可重復性的參數(shù)設置,,實驗參數(shù)可記憶,,也可以選用人體工程學腳踏或儀器上的旋鈕進行操作。細胞內(nèi)膜打孔壓電小鼠ICSI