檢查具備條件受檢者,,經(jīng)歷一段經(jīng)常排精過程后,禁房事5-7天(上次排精到取標(biāo)本間隔時間至少不得少于100小時);[1]備大口有蓋清潔干燥容器一個,,以**方式獲取精液,一次全部射入容器,,蓋上蓋,,記錄標(biāo)本離體時間;貼身保溫,,30分鐘內(nèi)送到化驗室,,并向檢驗員提供標(biāo)本取出時間。精液常規(guī)觀察:精液總?cè)萘浚ê辽?,精子活動情況,,精子密度(個/毫升),,精液液化時間(標(biāo)本取出到精液液化的時間),不動精子(個/高倍視野)等,。見不動精子,,須染色方可區(qū)分:不活動的精子、死精子,、未成熟精子等,。找不到精子必須離心后檢驗,仍然找不到精子,;方可報告無精,。經(jīng)三次取樣化驗,結(jié)果仍然找不到精子方可確認(rèn)無精子癥,。Hamilton Thorne精子分析儀具有良好的數(shù)據(jù)管理和報告生成功能,,能夠方便用戶查閱和分享分析結(jié)果。南京計算機(jī)輔助精子分析ALH
精液檢查前有什么注意事項,?一、留精液前,,病人應(yīng)停止**4~7天,。檢查前1周不能用丙酸睪丸酮、**睪丸酮,、苯丙酸諾龍,。采取精液時,可用軟皂或石蠟油做**按摩,,將標(biāo)本收集在無菌的試管中,;也可用避孕套(沖洗干凈,不含殺精子藥物)或采用**中斷法收集精液,,但這樣收集的量往往不多,。如用上述方法采不到精液,可經(jīng)直腸內(nèi)按摩精囊及輸精管末端,、壓迫采尿,,檢查沉渣中有無精子。不要將精液暴露在過熱和過冷的環(huán)境中,。及時交給醫(yī)生備查,,不得超過30分鐘。冷天要注意保暖,,送檢時可放在內(nèi)衣口袋里保溫,。二、如果要進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng),,應(yīng)先沖洗,、消毒尿道口,,再將精液收集在無菌試管中。夫妻同居3年以上,,沒有采取任何避孕措施而未能受孕的稱不孕癥,。如果是不孕癥,在雙方未進(jìn)行檢查前,,不能盲目懷疑某一方,,更不能認(rèn)為不孕的原因是女方。妊娠是夫妻雙方的事,。實現(xiàn)受孕,,男方的精液含量應(yīng)正常,形態(tài)和動力也應(yīng)正常,。女方能正常排卵,,精子和卵子能結(jié)合成受精卵,這種受精卵能在子宮內(nèi)膜種植,。上述的幾個環(huán)節(jié)中的某一個環(huán)節(jié)發(fā)生障礙,,都可引起不孕。三,、如果上述檢查結(jié)果精液是正常的,,女方也應(yīng)去醫(yī)院檢查,包括全身情況,、生殖***,、卵巢排卵功能、輸卵管通暢否,、免疫檢查,。美國慢速運動精子分析DAPCASA系統(tǒng)可以給出多種精子運動狀態(tài)的參數(shù),這些參數(shù)能夠幫助更有效地了解精子的運動特性,。
方法:使用兩種已知濃度的質(zhì)控乳膠珠溶液,1份濃度為(35±5)×106/ml,另1份濃度為(18.0±2.5)×106/ml,評價4種計數(shù)方法的準(zhǔn)確性和精確性,并比較4種方法計數(shù)精液的結(jié)果,。結(jié)果:計數(shù)乳膠珠時,CellVU計數(shù)池的結(jié)果**接近已知濃度,分別為(39.70±4.76)、(19.09±2.02)×106/ml,變異系數(shù)(CV)值分別為12.80%和10.58%;血細(xì)胞計數(shù)池和Makler計數(shù)池結(jié)果均高于已知濃度,前者為(44.84±4.86)×106/ml,、(21.04±1.87)×106/ml,CV值分別為10.81%和8.89%,后者為(52.36±7.78)×106/ml,、(24.54±3.67)×106/ml,CV值分別為14.86%和14.96%;CASA系統(tǒng)結(jié)果低于已知濃度,為(28.53±2.06)、(14.62±0.95)×106/ml,但CV值比較低,分別為7.22%和6.50%,。計數(shù)精液時,CellVU計數(shù)池與CASA系統(tǒng)結(jié)果差異無***性(P=0.71),分別為(45.28±34.52),、(41.96±31.93)×106/ml,血細(xì)胞計數(shù)池和Makler計數(shù)池結(jié)果差異無***性(P=0.14),分別為(76.98±59.90)、(63.89±53.84)×106/ml,CellVU計數(shù)池,、CASA系統(tǒng)與血細(xì)胞計數(shù)池,、Makler計數(shù)池結(jié)果間差異***(P<0.05或P<0.01)。結(jié)論:計數(shù)精液時,CASA系統(tǒng)與CellVU計數(shù)結(jié)果差異無***性,。各實驗室可選擇合適的手工或CASA計數(shù)方法,。
CASA系統(tǒng)進(jìn)行**分析應(yīng)注意以下幾點:3.2**分析儀閾值的確定(1)精子灰度,、對比度閾值:由于分析儀是根據(jù)灰度的高低來判斷精子的真?zhèn)危瑢α炼群蛯Ρ榷纫筇貏e高,,檢測時應(yīng)多次試用,,尋找能準(zhǔn)確識別精子的比較好灰度閾值[8]。(2)碎片:測定精子濃度準(zhǔn)確性受**中細(xì)胞成份和非精子的顆粒物質(zhì)的干擾,,測定活動精子的百分率也受精子中非精子物質(zhì)的影響[9],,這些也是需要注意的。對于系統(tǒng)誤認(rèn)為精子的非精子成分,,如精原細(xì)胞,、白細(xì)胞和非白細(xì)胞顆粒等,可人為準(zhǔn)確記數(shù)后在可刪除雜質(zhì)一欄將其舍去,。3.3出現(xiàn)1次異常結(jié)果應(yīng)間隔復(fù)查反復(fù)檢查2?3次方能得出比較正確的結(jié)果,。3.4對于無精子的患者應(yīng)仔細(xì)進(jìn)行視野檢查注意不要將雜質(zhì)誤認(rèn)為精子計數(shù)在內(nèi),應(yīng)將**3000ɡ離心15分鐘后,,再涂片檢查,,確認(rèn)無精后再出報告。傳統(tǒng)的CASA系統(tǒng)仍使用傳統(tǒng)閾值圖像處理方法,,準(zhǔn)確率有待提高,。
全自動的IVOS可以提供**快的分析速度以及高質(zhì)量數(shù)據(jù)輸出??梢允褂靡淮涡缘暮涂芍貜?fù)的載玻片,深度從10um~100um,。每次分析捕捉100幀圖像,,掃描速度每秒60幀。**的軟件升級,。IVOS能提供:精確,、客觀、具有重復(fù)性的結(jié)果,。高速分析,,在60Hz下半秒掃描30幀,為實驗室節(jié)省成本,。[1]主要功能IVOS自動精子活動,、濃度、形態(tài)分析系統(tǒng),。HamiltonThorne的CASA系統(tǒng)適用于臨床,、研究實驗室、動物繁殖基地,、水產(chǎn)業(yè),、制藥公司等各種領(lǐng)域,,成為了精液分析業(yè)的金標(biāo)準(zhǔn)??梢詰?yīng)用于包括人類,、公牛、馬,、野豬,、狗、兔子,、老鼠,、綿羊、山羊,、魚以及各種瀕危動物,。在TOXIVOS上有**的大鼠精液分析軟件。?HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數(shù),,前向性(STR)?:平均路徑的直線性,。北京前向運動精子分析W.H.O 5
IVOS和CEROS集成了智能化的分析軟件,能夠自動識別和計算精子的各項參數(shù),,減少了人工操作的誤差,。南京計算機(jī)輔助精子分析ALH
CASA,即計算機(jī)輔助精子分析,,是一種利用技術(shù)手段對精子活力,、濃度和形態(tài)進(jìn)行精確評估的方法。WHO第五版指南強(qiáng)調(diào),,相比人工檢測,,CASA提供更準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)和精子動力學(xué)參數(shù),如前向運動和超活化運動,,以及獲能精子特征參數(shù),。研究顯示,CASA檢測的精子參數(shù)與體內(nèi)外受精成功率和受孕時間有***關(guān)聯(lián),。使用CASA分析儀,,通常通過相差顯微鏡識別活動精子,適用于精子動力學(xué)分析,。但要確??煽拷Y(jié)果,操作者需注意標(biāo)本制備,、幀頻率,、精子濃度等因素。每份樣本至少需要分析200個活動精子的運動軌跡,更多精子樣本有助于分類和變異性的分析,。國內(nèi)已有自主研發(fā)的精子分析儀,,通常進(jìn)行兩次分析,每次至少200個精子,,結(jié)果通過統(tǒng)計學(xué)分析得出,。CASA在評估精子濃度時,需精確測量精子體積,,確保**完全液化并充分混勻,。計數(shù)板的精確性和計數(shù)一致性是關(guān)鍵,每次檢測需滿足5個視野和200條以上精子的比較低要求,。對于高濃度**,,可能需要稀釋以減少誤差。形態(tài)分析方面,,CASA能夠定量評估精子頭部,、中段和主段,尾部缺陷可通過活力評估,。對于碎片過多或黏稠的**,,可能需要洗滌以減少背景干擾。CASA中涉及一系列術(shù)語,,如VCL(曲線速度),、VSL(直線速度)等,它們反映了精子運動的不同特性,。南京計算機(jī)輔助精子分析ALH