精子分析儀使用方法儀器的使用方法因型號,、廠家差異不盡相同，操作人員上崗前必須經(jīng)過嚴(yán)格培訓(xùn),，了解工作原理,、操作規(guī)程,、校正方法等，使用前必須仔細(xì)閱讀說明書,。一般儀器都會經(jīng)歷如下操作步驟[1]：開機(jī)接通電源,，打開計算機(jī)輔助**分析系統(tǒng)。1.輸入患者信息及**理學(xué)檢查結(jié)果,。2.加樣取液化的**1滴,，滴入精子計數(shù)板的計數(shù)池中，置顯微鏡操作平臺上,，點擊“活動顯示”菜單,，調(diào)節(jié)好顯微鏡焦距，顯示器上即可顯示待測標(biāo)本的精子運動圖像,。3.分析點擊“計算分析”菜單,，系統(tǒng)進(jìn)入自動分析狀態(tài)，圖像顯示區(qū)出現(xiàn)精子分割圖像并進(jìn)行分析,。4.打印報告分析結(jié)束后,，可根據(jù)需要打印出分析結(jié)果。HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數(shù),，直線性（LIN）?：曲線軌跡的直線性,。北京計數(shù)精子分析W.H.O 5

五、精子活動力檢測[正常參考值]**后30-60分鐘活動力為Ⅲ級以上的精子＞0.80：**后120分鐘內(nèi)活動力為Ⅲ級以上的精子＞0.60,；**120分鐘后0.25-0.60的精子仍能活動,。[臨床意義]活動不良或不活動的精子增多，是導(dǎo)致不育的重要原因之一,。常見于精索靜脈曲張,、泌尿生殖系的非特異性***如大腸桿菌***，某些代謝藥,、抗瘧藥,、雌***,、氧化氮芥等，也可使精子活動力下降,。六,、精子計數(shù)[正常參考值](100-150)×109/L或一次排精總數(shù)為(4-6)×108。[臨床意義]1．精子計數(shù)小于20×109/L或一次排精總數(shù)少于1×108為不正常,，見于精索靜脈曲張,、鉛金屬等有害工業(yè)污染、大劑量放射線及某些藥物影響,。2．精液多次未查到精子為無精癥,，主要見于睪丸生精功能低下，先天性輸精管,、精囊缺陷或輸精管阻塞,。輸精管結(jié)扎術(shù)2個月后精液中應(yīng)無精子，否則說明手術(shù)失敗,。3．老年人從50歲開始精子數(shù)減少以至逐步消失,。南京瀕危物種精子分析高準(zhǔn)確率CASA系統(tǒng)用量少，檢測速度快,，能夠顯著提高實驗室的工作效率,。

通過結(jié)果的生物學(xué)意義對結(jié)果質(zhì)量進(jìn)行評估?當(dāng)所有具生物學(xué)意義的參數(shù)在測試中表現(xiàn)出較小的可變性時則方法學(xué)可變性亦較低方法學(xué)可變性低則結(jié)果質(zhì)量就高。CASA系統(tǒng)獲得的數(shù)值與直觀評估獲得的數(shù)值進(jìn)行分析和比較在精子數(shù)量和綜合運動性上具有較好的相關(guān)性而·131·中國優(yōu)生與遺傳雜志2002第10卷第6期DOI:10．13404／j．cnki．cjbhh．2002．06．091在前向運動精子百分率上的相關(guān)性較低］,。Holt等報道了在常規(guī)實驗條件下采用五種不同的CASA系統(tǒng)對**參數(shù)值進(jìn)行比較,，其結(jié)果為：采用同一個測定池由不同的操作者測定**參數(shù)；變異系數(shù)（CV）是29％?活動精子比率的CV為24％?平均路徑速度（VAP）的CV為43?85％,。作者們指出該分析結(jié)果不應(yīng)看作是不同CASA系統(tǒng)間的工作情況的比較?實際上它揭示了操作者的錯誤是差異的主要來源,。目前有待于尋找進(jìn)一步的標(biāo)準(zhǔn)來評估CASA變量的結(jié)果質(zhì)量。精子***的生物學(xué)功能是使卵細(xì)胞授精?因此用夫婦中的授精結(jié)果來考察精子運動性是合理的?只有在該基礎(chǔ)上能夠確定活動性參數(shù)的重要性,。輔助生殖技術(shù)（授精I(xiàn)VF）的發(fā)展使檢測精子質(zhì)量與各參數(shù)間的關(guān)系的比較成為可能；同樣可以驗證CASA測定結(jié)果與精子真實質(zhì)量間的相關(guān)性有利于CASA結(jié)果質(zhì)量的提高,。

精液顯微鏡檢查精子計數(shù)：正常人精子計數(shù)為0．6×1012～1．5×0.012/L,，相當(dāng)于一次排出的精子總數(shù)為400×106～600×106。當(dāng)精子計數(shù)值＜20×106/ml或一次排精總數(shù)＜100×106為精子減少,，超過致孕極限而導(dǎo)致不育,。精液直接涂片或離心沉淀后均未查到精子為無精癥。見于先天性睪丸發(fā)育不全,、畸形或后天睪丸損傷和萎縮(如睪丸結(jié)核,、炎癥、淋病,、垂體或腎上腺功能異常的內(nèi)分泌性疾病等),、輸精管阻塞或是先天性輸精管及精囊缺陷,，是導(dǎo)致少精或無精的重要原因，也是導(dǎo)致不育的重要原因,。檢查有無精子也是檢查輸精管結(jié)扎術(shù)的效果觀察,。結(jié)扎六周后，連續(xù)檢查無精子,，說明手術(shù)成功,，如果結(jié)扎兩個月后，精液中仍有精子,，說明手術(shù)不成功,。精子分析系統(tǒng)較傳統(tǒng)的分析法比較，具有速度快,、量比性好,、準(zhǔn)確性高、為臨床和科研提供客觀的檢測依據(jù),。

CASA系統(tǒng)雖然有諸多優(yōu)點,，但是很多因素都會影響到CASA儀器的使用及準(zhǔn)確性。CASA系統(tǒng)進(jìn)行**分析應(yīng)注意以下幾點：3.1標(biāo)本的采集與制作（1）采集前禁欲2?7天,，禁欲時間過長,、過短對**質(zhì)量都有一定影響。（2）容器要清潔,。（3）特殊情況下,，*可使用專門為采集**設(shè)計的無毒性避孕套，普通的乳膠避孕套因含有損害精子活力的物質(zhì)不可使用,。（4）注意保溫（20?37℃）,，并于30分鐘內(nèi)送檢驗科。（5）標(biāo)本置于37℃水浴.精子運動參數(shù)具有溫度敏感性,，因此要求計數(shù)池應(yīng)于分析儀恒溫板上預(yù)溫,。（6）密切注意**液化的情況，確保液化時間準(zhǔn)確,，因**樣本隨放置時間的延長,，精子活動力及活動率有減少的趨勢。標(biāo)本液化后取混勻樣本**1滴滴在樣品池中間,，然后進(jìn)行分析,。（7）檢測精子活動力，標(biāo)本密度應(yīng)控制在2×106/ml到50×106/ml之間,。具有高密度（如高于50×106/ml）精子的標(biāo)本,，通常會增加碰撞的頻率，并可能由此出現(xiàn)錯誤的結(jié)果,。在這種情況下,，建議用同源精漿稀釋標(biāo)本,。Hamilton Thorne精子分析儀的操作簡單易懂，用戶無需具備專業(yè)知識也能夠輕松上手使用,。計數(shù)精子分析W.H.O 6

全自動精子分析儀在臨床Z療中展現(xiàn)了明顯的優(yōu)勢,。北京計數(shù)精子分析W.H.O 5

CASA系統(tǒng)也可用于精子形態(tài)學(xué)評估。CASA系統(tǒng)可用來定量分析精子頭部形態(tài)學(xué),、中段甚至主段的形態(tài),，可以把精子頭部和中段分類為正常或者不正常,，還可以給出頭部和中段尺度,、頭部橢圓率和勻稱性的均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差和中位數(shù),，以及對染色的精子頂體區(qū)進(jìn)行測量[3],。與人工操作相比，自動化系統(tǒng)更具客觀性,，精確度和重復(fù)性的潛力[4],。精確度和重復(fù)性不低于7%[5]，這優(yōu)于有經(jīng)驗的技術(shù)人員的手工評估,。兩個研究已經(jīng)提示在CASA結(jié)果與生育力之間存在***聯(lián)系,。Coetzee等發(fā)現(xiàn)自動分析的正常精子形態(tài)的結(jié)果是預(yù)示體外受精率和妊娠率的有意義指標(biāo)[6]。Garrett等發(fā)現(xiàn)**中能與透明帶結(jié)合的,、具有某些頭部形態(tài)特征的精子所占的百分比（Z%）,，和直線速度（VSL）的精子的百分比，與大樣本的低生育力夫婦的自然妊娠率是有***且**的關(guān)系,。Z%和VSL與生育力間的關(guān)系顯示是連續(xù)的,，而且沒有顯示臨界值；高于臨界值,，妊娠率也不會進(jìn)一步增加[7],。北京計數(shù)精子分析W.H.O 5