紡錘體的形成是一個(gè)復(fù)雜而精細(xì)的過(guò)程,,涉及多種蛋白質(zhì)的參與和調(diào)控,。在有絲分裂的前間期,,細(xì)胞進(jìn)入S期,,中心體開(kāi)始復(fù)制倍增,為接下來(lái)的紡錘體形成做準(zhǔn)備,。進(jìn)入G2期后,,中心體完成復(fù)制,并在細(xì)胞進(jìn)入分裂前期時(shí)分離,,每個(gè)中心體各自形成放射狀排列的微管,,即星體。這些微管通過(guò)持續(xù)增加和丟失組成微管的微管蛋白亞基,,實(shí)現(xiàn)微管的聚合和解聚,,使紡錘體得以形成和維持。微管的組裝和去組裝過(guò)程受到多種調(diào)節(jié)蛋白的精確調(diào)控,,如蛋白激酶,、磷酸酶等。這些調(diào)節(jié)蛋白能夠影響微管蛋白的聚合和解聚速率,,從而控制紡錘體的形態(tài)和穩(wěn)定性,。此外,紡錘體的形成還依賴于動(dòng)粒微管與染色體動(dòng)粒的結(jié)合,,這一過(guò)程由動(dòng)粒上的驅(qū)動(dòng)蛋白和動(dòng)力蛋白介導(dǎo),,確保了染色體能夠被紡錘體正確地捕獲和牽引。 紡錘體微管的動(dòng)態(tài)變化受到細(xì)胞周期蛋白的調(diào)控,。昆明輔助生殖紡錘體廠家
紡錘體特殊細(xì)胞器紡錘體(SpindleApparatus),,形似紡錘,是產(chǎn)生于細(xì)胞分裂前初期(Pre-Prophase)到末期(Telophase)的一種特殊細(xì)胞器,。其主要元件包括微管(Microtubules),,附著微管的動(dòng)力分子分子馬達(dá)(Molecularmotors),以及一系列復(fù)雜的超分子結(jié)構(gòu)。一般來(lái)講,在動(dòng)物細(xì)胞中,,中心體是紡錘體的一部分,。高等植物細(xì)胞的紡錘體不含中心體。而***細(xì)胞的紡錘體含紡錘極體(SpindlePoleBody),,一般被視為中心體的同源細(xì)胞器,。紡錘體是由大量微管縱向排列組成的中部寬闊、兩級(jí)縮小的如紡錘狀的結(jié)構(gòu),。在細(xì)胞分裂中,,紡錘體對(duì)卵母細(xì)胞染色體的運(yùn)動(dòng),、平衡,、分配以及極體排出都非常重要。卵母細(xì)胞紡錘體的異常會(huì)導(dǎo)致減數(shù)分裂異常,,產(chǎn)生非整倍體的卵母細(xì)胞或者成熟阻滯的卵母細(xì)胞,。紡錘體實(shí)時(shí)成像紡錘體玻璃底培養(yǎng)皿紡錘體的形成需要多種蛋白質(zhì)的參與,包括微管相關(guān)蛋白和中心體蛋白等,。
在修復(fù)紡錘體異常方面,,基因轉(zhuǎn)移方法可以通過(guò)將正常紡錘體相關(guān)基因?qū)氲交颊呒?xì)胞中,從而恢復(fù)紡錘體的正常結(jié)構(gòu)和功能,。這種方法特別適用于那些由于基因缺失或突變導(dǎo)致紡錘體異常的患者,。基因調(diào)控是通過(guò)調(diào)節(jié)基因表達(dá)水平來(lái)診療疾病的方法,。在修復(fù)紡錘體異常方面,,基因調(diào)控策略可以通過(guò)調(diào)節(jié)紡錘體相關(guān)基因的表達(dá)水平,從而恢復(fù)紡錘體的正常功能,。例如,,針對(duì)某些疾病中紡錘體異常導(dǎo)致的染色體不穩(wěn)定性,基因調(diào)控策略可以通過(guò)抑制相關(guān)基因的表達(dá),,從而降低染色體的不穩(wěn)定性,,進(jìn)而抑制細(xì)胞的生長(zhǎng)和侵襲。
紡錘體功能分解在細(xì)胞分裂中,,其主要作用有兩個(gè)部分,。其一為排列與分裂染色體。紡錘體的完整性決定了染色體分裂的正確性,。紡錘體的正常生成是染色體排列的必要條件,。紡錘體生成完畢后一般會(huì)有5-20分鐘的延遲,以供細(xì)胞調(diào)整著絲點(diǎn)上微管束的極性,,以及決定是否所有的著絲點(diǎn)都附著正確,。此后細(xì)胞進(jìn)入分裂后期,染色體分裂為兩組數(shù)目相等的姐妹染色單體。同樣,,紡錘體的完整性決定這個(gè)分裂過(guò)程在時(shí)間和空間上的準(zhǔn)確性,。紡錘體另一功能為決定胞質(zhì)分裂的分裂面。染色體分裂的同時(shí),,紡錘體中的一部分微管不隨染色體分裂到兩極,,而停弛在紡錘體**,形成紡錘**體(centralspindle),。在紡錘中體的**為兩組極性相反的微管交疊的區(qū)域,,稱為紡錘**區(qū)(spindlemidzone).此**區(qū)就是接下來(lái)的胞質(zhì)分裂面。胞質(zhì)分裂開(kāi)始于分裂后期的較晚期,。胞質(zhì)分裂一般結(jié)束于分裂末期后1-2小時(shí),,此期間兩個(gè)子細(xì)胞由中心顆粒體(midbody)連接。一般認(rèn)為紡錘體的分解發(fā)生在細(xì)胞分裂末期,。紡錘體在細(xì)胞分裂中的功能受到嚴(yán)格的時(shí)間和空間控制,。
無(wú)需染色紡錘體觀察技術(shù)能夠?qū)崟r(shí)監(jiān)測(cè)冷凍過(guò)程中紡錘體的形態(tài)變化,從而準(zhǔn)確評(píng)估冷凍保存的效果,。通過(guò)對(duì)比冷凍前后紡錘體的形態(tài)和穩(wěn)定性,,研究者可以優(yōu)化冷凍保護(hù)劑的配方和濃度,以及改進(jìn)冷凍程序,,減少冷凍損傷,,提高解凍后卵母細(xì)胞的存活率和發(fā)育潛能。解凍后的卵母細(xì)胞在無(wú)需染色的情況下,,可以直接通過(guò)Polscope系統(tǒng)進(jìn)行紡錘體觀察,。這一技術(shù)能夠迅速評(píng)估解凍后卵母細(xì)胞的質(zhì)量,包括紡錘體的形態(tài),、位置,、穩(wěn)定性等關(guān)鍵指標(biāo),為后續(xù)的受精和胚胎發(fā)育提供重要參考,。研究紡錘體有助于理解細(xì)胞分裂的分子機(jī)制,。武漢偏光成像紡錘體觀測(cè)儀
紡錘體微管與細(xì)胞內(nèi)的其他細(xì)胞器存在復(fù)雜的相互作用。昆明輔助生殖紡錘體廠家
紡錘體觀測(cè)儀在補(bǔ)救ICSI中的應(yīng)用我們知道,,成熟的卵母細(xì)胞排出***極體,。IVF加入精子后,精子會(huì)穿透層層障礙**終進(jìn)入卵子,,隨著時(shí)間的推移,,卵子的紡錘體會(huì)將染色單體拉向兩極,進(jìn)而排出第二極體,,再往后大約加精后9-16小時(shí),,雌雄原核會(huì)出現(xiàn),,而原核的出現(xiàn)才是受精的標(biāo)志。但是對(duì)于那些沒(méi)有受精的卵子,,到了原核出現(xiàn)的時(shí)間窗,,發(fā)現(xiàn)沒(méi)有受精時(shí)再去補(bǔ)救ICSI,往往錯(cuò)過(guò)了卵子的比較好受精時(shí)間,,因?yàn)闆](méi)有受精的卵子會(huì)在體外老化,,即使受精,胚胎的發(fā)育潛能也很低,。所以,,我們?cè)诩泳蟮?-6小時(shí),通過(guò)觀察第二極體的排出來(lái)初步判斷是否受精,,**的增加了那些受精障礙患者的受精率,,也避免了卵子的老化。當(dāng)然,,偶爾也會(huì)出現(xiàn)錯(cuò)誤補(bǔ)救,。文獻(xiàn)報(bào)道對(duì)IVF受精后的未排出第二極體的卵母細(xì)胞進(jìn)行ICSI補(bǔ)救,,實(shí)驗(yàn)組用紡錘體觀測(cè)儀觀察并統(tǒng)計(jì)紡錘體的數(shù)目,,82.7%含有一個(gè)紡錘體,17.3%含有兩個(gè)紡錘體,,并對(duì)含有一個(gè)紡錘體的卵母細(xì)胞進(jìn)行補(bǔ)救ICSI,;而對(duì)照組并未用紡錘體觀測(cè)儀觀察紡錘體,只對(duì)未排出第二極體的卵母細(xì)胞進(jìn)行補(bǔ)救ICSI,。結(jié)果發(fā)現(xiàn),,使用紡錘體觀測(cè)儀觀察紡錘體的數(shù)目能顯著提高正常受精率,降低多原核受精比率,。昆明輔助生殖紡錘體廠家