紡錘體觀測儀在補(bǔ)救ICSI中的應(yīng)用我們知道,,成熟的卵母細(xì)胞含有1個極體,,也就是***極體。IVF加入精子后,,精子會穿透層層障礙**終進(jìn)入卵子,,隨著時間的推移,~6小時后卵子的紡錘體會將染色單體拉向兩極,,進(jìn)而排出第二極體,,再往后大約加精后9~16小時,,雌雄原核會出現(xiàn),而原核的出現(xiàn)才是受精的標(biāo)志,。但是對于那些沒有受精的卵子,,到了原核出現(xiàn)的時間窗發(fā)現(xiàn)沒有受精時再去補(bǔ)救ICSI,往往錯過了卵子的比較好受精時間,,因?yàn)闆]有受精的卵子會在體外老化,,即使受精,胚胎的發(fā)育潛能也很低,。所以,,我們在加精后的4~6小時,通過觀察第二極體的排出來初步判斷是否受精,,**的增加了那些受精障礙患者的受精率,,也避免了卵子的老化。當(dāng)然,,偶爾也會出現(xiàn)錯誤補(bǔ)救,。文獻(xiàn)報道對IVF受精后的未排出第二極體的卵母細(xì)胞進(jìn)行補(bǔ)救,實(shí)驗(yàn)組用紡錘體觀測儀觀察并統(tǒng)計(jì)紡錘體的數(shù)目,,82.7%含有一個紡錘體,,17.3%含有兩個紡錘體,并對含有一個紡錘體的卵母細(xì)胞進(jìn)行補(bǔ)救ICSI,;而對照組并未用紡錘體觀測儀觀察紡錘體,,只對未排出第二極體的卵母細(xì)胞進(jìn)行補(bǔ)救ICSI,。結(jié)果發(fā)現(xiàn)使用紡錘體觀測儀觀察紡錘體的數(shù)目能顯著提高正常受精率,,降低多原核受精比率。紡錘體的微管在細(xì)胞分裂過程中起著橋梁和牽引的作用,。上??寺〖忓N體改善分級
在生殖醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,,卵母細(xì)胞冷凍保存技術(shù)作為輔助生殖技術(shù)的重要組成部分,,近年來取得了進(jìn)展。尤其是針對成熟卵母細(xì)胞紡錘體的冷凍保存研究,,不僅關(guān)乎女性生育能力的保存,,還涉及到遺傳學(xué)的穩(wěn)定性和安全性。成熟卵母細(xì)胞,,即處于第二次減數(shù)分裂中期(MII期)的卵母細(xì)胞,,其內(nèi)部包含一個高度復(fù)雜且精細(xì)的紡錘體結(jié)構(gòu)。紡錘體由微管組成,,這些微管通過動態(tài)變化,,將染色體緊密地聯(lián)系在一起,,并確保在細(xì)胞分裂過程中染色體的正確分離。成熟卵母細(xì)胞的紡錘體對溫度變化和機(jī)械刺激極為敏感,,這使得其冷凍保存過程充滿了挑戰(zhàn),。深圳非侵入式成像紡錘體卵質(zhì)量評估紡錘體微管的數(shù)量和分布隨細(xì)胞分裂階段而變化。
卵母細(xì)胞的冷凍保存技術(shù)一直是研究的熱點(diǎn)之一,,特別是針對不同成熟階段的卵母細(xì)胞,如MI期卵母細(xì)胞的冷凍保存,。MI期卵母細(xì)胞具有獨(dú)特的生物學(xué)特性和發(fā)育潛能,,其紡錘體的穩(wěn)定性和形態(tài)對于后續(xù)的受精和胚胎發(fā)育至關(guān)重要。因此,,針對MI期紡錘體卵冷凍的研究不僅具有理論價值,,更具有重要的臨床應(yīng)用前景。MI期卵母細(xì)胞的紡錘體由微管組成,,這些微管結(jié)構(gòu)精細(xì)且脆弱,,容易受到冷凍過程中溫度變化和滲透壓變化的影響而發(fā)生損傷。紡錘體的損傷不僅會影響卵母細(xì)胞的正常發(fā)育,,還可能導(dǎo)致受精失敗或胚胎發(fā)育異常,。
隨著科技的進(jìn)步,冷凍與解凍技術(shù)也在不斷創(chuàng)新,。例如,,玻璃化冷凍技術(shù)因其快速冷凍和解凍的特點(diǎn),能夠有效減少冷凍過程中的冰晶形成和滲透壓變化對紡錘體的損傷,。此外,,一些研究者還嘗試將微流控技術(shù)應(yīng)用于卵母細(xì)胞的冷凍保存中,以實(shí)現(xiàn)更精確的溫度控制和更均勻的冷凍保護(hù)劑分布,。無損觀察技術(shù)如偏光顯微鏡(Polscope)和冷凍電鏡(Cryo-EM)等的應(yīng)用為MI期紡錘體卵冷凍研究提供了新的視角,。這些技術(shù)能夠在不破壞卵母細(xì)胞活性的情況下實(shí)時觀察紡錘體的形態(tài)和變化,從而更準(zhǔn)確地評估冷凍保存的效果,。紡錘體形成和功能的調(diào)控涉及多個信號通路,。
Oosight影像分析系統(tǒng)采用液晶偏光成像技術(shù),,無需對卵母細(xì)胞進(jìn)行染色,,即可實(shí)時、清晰,、高對比度地進(jìn)行紡錘體結(jié)構(gòu)和透明帶成像,,對ICSI、核移植操作、卵母細(xì)胞質(zhì)量評價等有很好的輔助作用,。
主要應(yīng)用ICSI:在單精胞漿注射過程中定位初級卵母細(xì)胞,,避免卵的破裂損傷,增強(qiáng)胚胎的發(fā)育潛能,。卵評估:利用定量的分析數(shù)據(jù)對卵進(jìn)行分級,,改善對胚胎的選擇。體外成熟評估:在未成熟卵催化(IVM)過程判斷成熟期,,判斷依據(jù)采用的是準(zhǔn)確的識別紡錘體,,而非不準(zhǔn)確的極體。質(zhì)量控制:利用定量的分析數(shù)據(jù)對卵進(jìn)行分級,,改善對胚胎的選擇,。
核移植:顯著提高核移植的成功率。由于在核摘除的過程可以清楚的看到核質(zhì),,使得核移植的成功率增加了80%,,并減少了線粒體DNA的摘除。卵冷凍研究:對冷凍的初級卵母細(xì)胞進(jìn)行解凍前和解凍后的定量分析,,從而判斷卵的發(fā)育力,,改善妊娠率。紡錘體研究:檢測胚胎中紡錘體的發(fā)育過程,,確定正常和非正常分裂率(只可用于搭配有培養(yǎng)箱的顯微鏡),。可以對染色體非正常的或非整倍體的胚胎成像,,從而選擇***的前體做PGD診斷,。透明帶研究:測量卵母細(xì)胞的透明帶;準(zhǔn)確測量紡錘體和透明帶中分子排列方向的差別變化,,判斷紡錘體和透明帶是否處于正常狀態(tài) 紡錘體在細(xì)胞分裂過程中展現(xiàn)出驚人的自我組裝能力,。上海無需染色紡錘體改善分級
紡錘體的異常可能導(dǎo)致遺傳信息的丟失或重復(fù),,進(jìn)而引發(fā)遺傳性疾病,。上海克隆紡錘體改善分級
神經(jīng)退行性疾病是一類以神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞功能障礙和死亡為主要特征的疾病,,包括阿爾茨海默病(Alzheimer'sdisease,AD),、帕金森?。≒arkinson'sdisease,PD)、亨廷頓?。℉untington'sdisease,HD)等,。近年來,研究表明紡錘體功能障礙在神經(jīng)退行性疾病的發(fā)生和發(fā)展中起著重要作用。阿爾茨海默病是最常見的神經(jīng)退行性疾病之一,,其主要病理特征是淀粉樣蛋白(Aβ)沉積和tau蛋白過度磷酸化形成的神經(jīng)纖維纏結(jié),。研究表明,紡錘體功能障礙在阿爾茨海默病的發(fā)生和發(fā)展中起著重要作用,。 上??寺〖忓N體改善分級