紡錘體觀測儀在補(bǔ)救ICSI中的應(yīng)用我們知道,，成熟的卵母細(xì)胞排出***極體,。IVF加入精子后，精子會穿透層層障礙**終進(jìn)入卵子,，隨著時間的推移,，卵子的紡錘體會將染色單體拉向兩極,，進(jìn)而排出第二極體，再往后大約加精后9-16小時,，雌雄原核會出現(xiàn),，而原核的出現(xiàn)才是受精的標(biāo)志。但是對于那些沒有受精的卵子,，到了原核出現(xiàn)的時間窗,，發(fā)現(xiàn)沒有受精時再去補(bǔ)救ICSI，往往錯過了卵子的比較好受精時間,，因?yàn)闆]有受精的卵子會在體外老化,，即使受精，胚胎的發(fā)育潛能也很低,。所以,，我們在加精后的4-6小時，通過觀察第二極體的排出來初步判斷是否受精,，**的增加了那些受精障礙患者的受精率,，也避免了卵子的老化。當(dāng)然,，偶爾也會出現(xiàn)錯誤補(bǔ)救,。文獻(xiàn)報道對IVF受精后的未排出第二極體的卵母細(xì)胞進(jìn)行ICSI補(bǔ)救，實(shí)驗(yàn)組用紡錘體觀測儀觀察并統(tǒng)計紡錘體的數(shù)目,，82.7%含有一個紡錘體,，17.3%含有兩個紡錘體，并對含有一個紡錘體的卵母細(xì)胞進(jìn)行補(bǔ)救ICSI,；而對照組并未用紡錘體觀測儀觀察紡錘體,，只對未排出第二極體的卵母細(xì)胞進(jìn)行補(bǔ)救ICSI。結(jié)果發(fā)現(xiàn),，使用紡錘體觀測儀觀察紡錘體的數(shù)目能顯著提高正常受精率,，降低多原核受精比率。紡錘體的研究有助于揭示細(xì)胞分裂過程中的不對稱性和極化現(xiàn)象,。北京哺乳動物紡錘體紡錘體結(jié)構(gòu)

紡錘體,，顧名思義，其形狀類似于紡織用的紡錘，是在細(xì)胞分裂前初期到末期形成的一種特殊細(xì)胞器,。它的主要元件包括微管,、附著微管的動力分子分子馬達(dá)，以及一系列復(fù)雜的超分子結(jié)構(gòu),。微管是紡錘體的基礎(chǔ)骨架,，由αβ-微管蛋白二聚體組成，這些微管相互交錯,，形成紡錘狀結(jié)構(gòu),，將染色體緊密地聯(lián)系在一起。在動物細(xì)胞中,，紡錘體的形成和組裝通常由中心體引導(dǎo)和控制,。中心體是一個位于細(xì)胞質(zhì)中的復(fù)合體，由兩個中心粒嵌套在被稱為pericentriolarmaterial（PCM）的區(qū)域內(nèi)組成,。PCM富含微管相關(guān)蛋白和其他蛋白質(zhì),，如谷氨酸脫羧酶等微管主要蛋白，這些蛋白質(zhì)共同協(xié)作,，確保紡錘體的正確組裝和穩(wěn)定,。相比之下，高等植物細(xì)胞的紡錘體并不包含中心體,，而是由細(xì)胞極板附近的微管組織形成,。美國無需染色紡錘體卵冷凍研究紡錘體微管的微妙調(diào)整，確保了遺傳信息在細(xì)胞分裂中的準(zhǔn)確無誤傳遞,。

盡管紡錘體成像技術(shù)已經(jīng)取得了明顯的進(jìn)展,，但仍存在一些挑戰(zhàn)和限制。例如,，目前的高分辨率成像技術(shù)往往需要對樣品進(jìn)行特殊處理或標(biāo)記,，這可能會對細(xì)胞的活性和功能產(chǎn)生影響。此外,，成像速度和分辨率之間仍存在權(quán)衡關(guān)系,，如何在保持高分辨率的同時提高成像速度是當(dāng)前研究的重點(diǎn)之一。未來,，隨著成像技術(shù)的不斷創(chuàng)新和進(jìn)步,，紡錘體成像技術(shù)有望實(shí)現(xiàn)更高的分辨率、更快的成像速度和更好的細(xì)胞活性保持能力,。例如,，基于量子點(diǎn)的熒光標(biāo)記技術(shù)、基于人工智能的圖像重建算法以及基于超快激光的成像技術(shù)等都有望為紡錘體成像技術(shù)的發(fā)展帶來新的突破,。此外,，結(jié)合其他細(xì)胞生物學(xué)技術(shù),，如基因編輯、蛋白質(zhì)組學(xué)等,，紡錘體成像技術(shù)將能夠更深入地揭示細(xì)胞分裂的復(fù)雜機(jī)制和紡錘體的功能作用,。

盡管成熟卵母細(xì)胞紡錘體冷凍保存技術(shù)取得了進(jìn)展，但仍面臨一些挑戰(zhàn),。首先,，冷凍損傷仍然是制約其臨床應(yīng)用的主要問題之一。盡管玻璃化冷凍法能夠在一定程度上減少冷凍損傷,，但仍無法完全避免。其次,，冷凍保存后的卵母細(xì)胞在體外受精和胚胎發(fā)育過程中的表現(xiàn)仍存在不確定性,。這可能與冷凍過程中紡錘體和染色體的損傷有關(guān)，也可能與冷凍保護(hù)劑的殘留毒性有關(guān),。此外,，法律倫理問題也是卵母細(xì)胞冷凍保存技術(shù)面臨的一大挑戰(zhàn)。不同國家和地區(qū)對卵母細(xì)胞冷凍保存的法律和倫理規(guī)定各不相同,，這在一定程度上限制了該技術(shù)的普及和應(yīng)用,。紡錘體在細(xì)胞分裂過程中展現(xiàn)出驚人的自我組裝能力。

近年來,，隨著玻璃化冷凍技術(shù)的不斷發(fā)展,，成熟卵母細(xì)胞紡錘體的冷凍保存研究取得了進(jìn)展。研究表明,，采用玻璃化冷凍法冷凍保存的成熟卵母細(xì)胞,，在解凍后其紡錘體和染色體的形態(tài)及功能均能得到較好的保持。這主要得益于玻璃化冷凍過程中避免了冰晶形成對細(xì)胞的損傷,，以及冷凍保護(hù)劑對細(xì)胞的有效保護(hù),。然而，值得注意的是,，盡管玻璃化冷凍法在提高解凍存活率和妊娠成功率方面取得了成效,，但仍存在一些問題。例如,，冷凍過程中紡錘體的微管結(jié)構(gòu)可能受到低溫的影響而發(fā)生解聚,，導(dǎo)致染色體分離異常。此外,，冷凍保護(hù)劑的毒性也可能對卵母細(xì)胞造成一定的損傷,。為了克服這些問題，研究者們進(jìn)行了大量的實(shí)驗(yàn)和優(yōu)化工作,。例如,，通過改進(jìn)冷凍保護(hù)劑的配方和濃度,，降低其對細(xì)胞的毒性；通過優(yōu)化冷凍速率和程序,，減少冷凍過程中對細(xì)胞的機(jī)械損傷,；以及通過篩選和評估不同冷凍載體和保存時間對卵母細(xì)胞冷凍效果的影響，尋找好的冷凍保存條件,。紡錘體微管與染色體上的動粒結(jié)合,，形成穩(wěn)定的連接。武漢Hamilton Thorne紡錘體加熱臺

紡錘體的中心體在細(xì)胞分裂前會復(fù)制并分離到細(xì)胞兩極,。北京哺乳動物紡錘體紡錘體結(jié)構(gòu)

隨著技術(shù)的不斷成熟和成本的降低,，無損觀察紡錘體卵冷凍技術(shù)有望在更多醫(yī)療機(jī)構(gòu)中得到應(yīng)用和推廣。這將為更多女性提供生育能力保存的機(jī)會,，同時也為生殖醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的發(fā)展注入新的活力,。此外，隨著國家對輔助生殖技術(shù)的重視和支持力度的加大,，無損觀察紡錘體卵冷凍技術(shù)有望在政策層面得到更多支持和推廣,。無損觀察紡錘體卵冷凍研究是一項(xiàng)具有重要意義的研究課題。通過技術(shù)創(chuàng)新和臨床應(yīng)用推廣,，我們可以更好地評估卵母細(xì)胞的質(zhì)量,、優(yōu)化冷凍保存條件、提高解凍后卵母細(xì)胞的存活率和發(fā)育潛能,，為女性生育能力的保存和利用提供更加可靠和有效的解決方案,。北京哺乳動物紡錘體紡錘體結(jié)構(gòu)