世界衛(wèi)生組織(WHO)《人類精液及精子—宮頸粘液相互作用實驗室檢驗手冊》于1980年***出版,,以滿足臨床與科研對人類精液標(biāo)準(zhǔn)化檢測程序日益增長的需求,。該手冊是人類精液實驗室檢查和處理程序及方法的標(biāo)準(zhǔn)操作指南,,旨在提高精液分析的質(zhì)量和提高不同實驗室結(jié)果的可比性,。在過去40年里,,該手冊進(jìn)行了4次修訂與補(bǔ)充(1987年,、1992年,、1999年和2010年),,內(nèi)容涉及精液檢查的標(biāo)準(zhǔn)化操作程序,、精子功能、精漿生化,、精液處理與冷凍以及質(zhì)量保證等,,已成為國際公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn),被世界各地臨床和實驗室***使用,。中國衛(wèi)生部已在2003年將其納入人類輔助生殖技術(shù)規(guī)范,。WHO《人類精液檢查與處理實驗室手冊(第5版)》精液參考值的數(shù)據(jù)是來自全球3大洲8個國家的前瞻性、多中心臨床研究的結(jié)果,,通過循證醫(yī)學(xué)研究獲得的精液參數(shù)參考值具有里程碑式意義,。自2010年出版以來成為WHO很受歡迎的出版物之一,即使在**近幾年其下載量也在穩(wěn)步增長,。它是男科實驗室及全球范圍內(nèi)開展精液分析操作的其他實驗室,、醫(yī)院和研究機(jī)構(gòu)使用的標(biāo)準(zhǔn)操作手冊。該手冊在國際大會,、科學(xué)會議,、以及WHO合作中心、專業(yè)學(xué)會和其他學(xué)術(shù)機(jī)構(gòu)的培訓(xùn)項目中進(jìn)行了***傳播,。截止到2021年,已被3000余篇同行評議論文和評論引用,。Hamilton Thorne精子分析儀具備快速和高效的分析功能,,能夠在短時間內(nèi)處理大量樣本,提高工作效率,。香港綿羊精子分析重復(fù)性高
CASA系統(tǒng)進(jìn)行**分析應(yīng)注意以下幾點:3.2**分析儀閾值的確定(1)精子灰度,、對比度閾值:由于分析儀是根據(jù)灰度的高低來判斷精子的真?zhèn)危瑢α炼群蛯Ρ榷纫筇貏e高,,檢測時應(yīng)多次試用,,尋找能準(zhǔn)確識別精子的比較好灰度閾值[8],。(2)碎片:測定精子濃度準(zhǔn)確性受**中細(xì)胞成份和非精子的顆粒物質(zhì)的干擾,測定活動精子的百分率也受精子中非精子物質(zhì)的影響[9],,這些也是需要注意的,。對于系統(tǒng)誤認(rèn)為精子的非精子成分,如精原細(xì)胞,、白細(xì)胞和非白細(xì)胞顆粒等,,可人為準(zhǔn)確記數(shù)后在可刪除雜質(zhì)一欄將其舍去。3.3出現(xiàn)1次異常結(jié)果應(yīng)間隔復(fù)查反復(fù)檢查2?3次方能得出比較正確的結(jié)果,。3.4對于無精子的患者應(yīng)仔細(xì)進(jìn)行視野檢查注意不要將雜質(zhì)誤認(rèn)為精子計數(shù)在內(nèi),,應(yīng)將**3000ɡ離心15分鐘后,再涂片檢查,,確認(rèn)無精后再出報告,。上海山羊精子分析DAPCASA系統(tǒng)可以給出多種精子運(yùn)動狀態(tài)的參數(shù),這些參數(shù)能夠幫助更有效地了解精子的運(yùn)動特性,。
五,、精子活動力檢測[正常參考值]**后30-60分鐘活動力為Ⅲ級以上的精子>0.80:**后120分鐘內(nèi)活動力為Ⅲ級以上的精子>0.60;**120分鐘后0.25-0.60的精子仍能活動,。[臨床意義]活動不良或不活動的精子增多,,是導(dǎo)致不育的重要原因之一。常見于精索靜脈曲張,、泌尿生殖系的非特異性***如大腸桿菌***,,某些代謝藥、抗瘧藥,、雌***,、氧化氮芥等,也可使精子活動力下降,。六,、精子計數(shù)[正常參考值](100-150)×109/L或一次排精總數(shù)為(4-6)×108。[臨床意義]1.精子計數(shù)小于20×109/L或一次排精總數(shù)少于1×108為不正常,,見于精索靜脈曲張,、鉛金屬等有害工業(yè)污染、大劑量放射線及某些藥物影響,。2.精液多次未查到精子為無精癥,,主要見于睪丸生精功能低下,先天性輸精管,、精囊缺陷或輸精管阻塞,。輸精管結(jié)扎術(shù)2個月后精液中應(yīng)無精子,否則說明手術(shù)失敗,。3.老年人從50歲開始精子數(shù)減少以至逐步消失,。
精液一般檢查(1)精液量:正常人一次排精2~5ml,。(2)顏色和透明度:正常剛射出的精液呈乳白色或灰白色,液化后呈半透明乳白色,,久未排精者可呈淡黃色,。鮮紅色或暗紅色的血精見于生殖系統(tǒng)炎癥、結(jié)核,、和**,,黃色膿樣精液,見于精囊炎或前列腺炎,。(3)粘稠度和液化:正常新鮮的精液排出后數(shù)秒呈粘稠膠凍狀,,在精液中纖溶酶的作用下30分鐘后開始液化。如果粘稠度降低呈米湯樣,,可能是精子數(shù)量減少,,見于生殖系統(tǒng)炎癥,精液不凝固見于精囊阻塞或損傷,;如果精液1小時后不液化,,可能是由于炎癥破壞纖溶酶所致,如前列腺炎,,精子不液化可以抑制精子活動力而影響受孕,。(4)酸堿度:pH值。正常精液呈弱堿性pH7.2~8.0,,以利于中和酸性的陰道分泌物,,pH值小于7或大于8都能影響精子的活動和代謝,不利于受孕,。HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數(shù),,直線性(LIN)?:曲線軌跡的直線性。
1.基本檢查:是確定精液變量穩(wěn)定的常規(guī)方法,,不僅是男科實驗室,,任何開展精液檢查的實驗室都能遵循。精子計數(shù)依然推薦使用改良Neubauer血細(xì)胞計數(shù)板的方法,,但計數(shù)的方法有了改變,。明確推薦了伊紅笨胺黑染色法作為精子存活率診斷的優(yōu)先方法,伊紅染色和低滲腫脹實驗只作為備選方法,。刪減了參考值下限的描述,。對于精子活動率大于40%的樣本沒有必要做存活率評估。與第5版手冊中淡粉色判讀為活精子不同,,明確了只有精子頭為白色的精子為活精子,、淡粉色為死精子,。臨床數(shù)據(jù)表明,,鑒別快速前向運(yùn)動精子非常重要,。因此,關(guān)于精子活力分級,,第6版手冊建議恢復(fù)到快速前向運(yùn)動,、慢速前向運(yùn)動、非前向運(yùn)動和不活動4個活力級別,,但精子活動率的參考值范圍卻依然是按前向運(yùn)動(PR),、非前向運(yùn)動(NP)、不活動(IM)3個活力級別計算,。第6版手冊強(qiáng)調(diào),,精子形態(tài)學(xué)評估的價值不僅在于其可用于判斷自然妊娠和輔助生殖技術(shù)(ART)結(jié)局的預(yù)后,還可以為男性生殖***包括睪丸和附睪功能判斷提供更多診斷信息,。對于3%和5%的精子“正?!毙螒B(tài)率的判斷,則要求必須由訓(xùn)練有素的人員評估1500個精子來完成,;對于無尾精子(只有頭部的精子)超過總精子數(shù)20%的精液,,應(yīng)單獨(dú)計算并在報告中注明;在精子研發(fā)的歷程中,,計算機(jī)輔助精子檢測經(jīng)歷了黑白圖像機(jī),、彩色圖像檢測。目前先進(jìn)的是熒光精子圖像檢測,。廣州濃度精子分析ALH
HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數(shù),,鞭打頻率(BCF)?:精子曲線路徑跨越其平均路徑的平均頻率。香港綿羊精子分析重復(fù)性高
CASA系統(tǒng)雖然有諸多優(yōu)點,,但是很多因素都會影響到CASA儀器的使用及準(zhǔn)確性,。CASA系統(tǒng)進(jìn)行**分析應(yīng)注意以下幾點:3.1標(biāo)本的采集與制作(1)采集前禁欲2?7天,禁欲時間過長,、過短對**質(zhì)量都有一定影響,。(2)容器要清潔。(3)特殊情況下,,*可使用專門為采集**設(shè)計的無毒性避孕套,,普通的乳膠避孕套因含有損害精子活力的物質(zhì)不可使用。(4)注意保溫(20?37℃),,并于30分鐘內(nèi)送檢驗科,。(5)標(biāo)本置于37℃水浴.精子運(yùn)動參數(shù)具有溫度敏感性,因此要求計數(shù)池應(yīng)于分析儀恒溫板上預(yù)溫,。(6)密切注意**液化的情況,,確保液化時間準(zhǔn)確,因**樣本隨放置時間的延長,,精子活動力及活動率有減少的趨勢,。標(biāo)本液化后取混勻樣本**1滴滴在樣品池中間,,然后進(jìn)行分析。(7)檢測精子活動力,,標(biāo)本密度應(yīng)控制在2×106/ml到50×106/ml之間,。具有高密度(如高于50×106/ml)精子的標(biāo)本,通常會增加碰撞的頻率,,并可能由此出現(xiàn)錯誤的結(jié)果,。在這種情況下,建議用同源精漿稀釋標(biāo)本,。香港綿羊精子分析重復(fù)性高