Ham’sF-12營養(yǎng)混合物(Ham’sF-12NutrientMixture)Ham’sF-12營養(yǎng)混合物(Ham’sF-12NutrientMixture)是由Ham在1969年以Ham’sF-10營養(yǎng)混合物為基礎(chǔ)設(shè)計而成的,,初用于CHO細胞的無血清培養(yǎng),。Ham’sF-12常作為無血清培養(yǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)液,在低血清含量下時,,特別適合單細胞培養(yǎng)和克隆化培養(yǎng),,添加血清后也廣泛應用于細胞和原代細胞的培養(yǎng),如大鼠肝細胞,、大鼠前列腺上皮細胞,、軟骨細胞,、大鼠成肌細胞、雞胚胎細胞等,。此外,,Ham’sF-12與DMEM等體積混合后,得到的DMEM/F12培養(yǎng)基營養(yǎng)更為豐富,,使用更為較廣,。Ham’sF-12營養(yǎng)混合物(Ham’sF-12NutrientMixture)L-谷氨酰胺(Glutamine)是細胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)元素,但其在溶液中不穩(wěn)定,,會自發(fā)降解,,不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基,可以根據(jù)研究需要任意調(diào)整L-谷氨酰胺的用量,,在使用時添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細胞的生長。 MCDB131是MCDB培養(yǎng)基的一種,是由Knedler和Ham設(shè)計開發(fā)出來的,,初用于培養(yǎng)人微血管內(nèi)皮細胞(HMVEC),。廣東樣本細胞培養(yǎng)基全國發(fā)貨
MEMα是一種改良的MEM培養(yǎng)基,與MEM培養(yǎng)基相比MEMα培養(yǎng)基營養(yǎng)更為豐富,,在MEM的基礎(chǔ)上又添加了NEAA,、**酸鈉、硫酸鋅,、VB12,、生物素,、抗壞血酸等成分,,廣泛應用于各種哺乳動物懸浮和貼壁細胞的培養(yǎng),。不含核苷和脫氧核苷的MEMα培養(yǎng)基常常用作DG44和其他DHFR-缺陷型細胞的篩選培養(yǎng)基。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(Alanyl-glutamine,,Ala-Glu),,又名丙氨酰谷氨酰胺、丙谷二肽,,是一種高級細胞培養(yǎng)添加劑,,可直接替代細胞培養(yǎng)基中的L-谷氨酰胺。L-谷氨酰胺(Glutamine)是細胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)素,,但其在溶液中不穩(wěn)定,會自發(fā)降解生成氨和焦谷氨酸,,其中氨對細胞有害,;而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的穩(wěn)定,,不會自發(fā)的降解。細胞利用其機制是:在細胞培養(yǎng)時,,細胞會逐漸向培養(yǎng)液中釋放一種肽酶,將L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺,而后細胞會將這兩種水解產(chǎn)物吸收利用。細胞利用L-丙氨酰-L-谷氨酰的過程與流加培養(yǎng)策略相似,,連續(xù)的將低濃度水平的L-谷氨酰胺加入到培養(yǎng)液中,,從而提高了L-谷氨酰胺的利用率,且不會生成多余的氨,,更利于細胞的生長,。L-丙氨酰-L-谷氨酰可以代替等摩爾的L-谷氨酰胺,,適用于所有的細胞,,幾乎無需適應,。 海南醫(yī)療細胞培養(yǎng)基生產(chǎn)產(chǎn)家M199有兩種平衡鹽成分,,Earle’s鹽成分常用于CO2環(huán)境,,Hank’s鹽成分用于非CO2的環(huán)境,。
1.細胞培養(yǎng)基的種類按照細胞培養(yǎng)基的發(fā)展歷史,,細胞培養(yǎng)基大致可分為平衡鹽溶液,、天然細胞培養(yǎng)基、合成細胞培養(yǎng)基,、無血清細胞培養(yǎng)基,、限定化學成分細胞培養(yǎng)基等幾大種類,。(balancedsaltsolution,BSS)BSS主要是由無機鹽,、葡萄糖組成,,它的作用是維持細胞滲透壓平衡,,保持pH穩(wěn)定及提供簡單的營養(yǎng)。其主要用于細胞的漂洗,、配制其他試劑等,。幾種常用的BSS配方如下(表1-1)。D-Hank's與Hank's的一個主要區(qū)別是前者不含有Ca2+和Mg2+,,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因為Ca2+,、Mg2+是細胞膜的重要組成成份,,參與細胞粘附等功能,,使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細胞結(jié)團,。此外,Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎(chǔ)溶液,,前者緩沖能力較弱,,適合于密閉培養(yǎng),;后者緩沖能力較強,,適合于5%CO2的培養(yǎng)條件,。天然培養(yǎng)基指來自動物體液或利用組織分離提取的一類培養(yǎng)基,,如血漿、血清,、雞胚浸出液等,。其優(yōu)點是營養(yǎng)成分豐富,培養(yǎng)效果良好,,但缺點是成分復雜,,來源受限且制作過程復雜,、批間差異大。目前使用的天然培養(yǎng)基是血清,,另外各種組織提取液、促進細胞貼壁的膠原類物質(zhì)在培養(yǎng)某些特殊細胞也是必不可少,。水解乳蛋白是乳白蛋白經(jīng)蛋白酶和肽酶水解的產(chǎn)物。
Dulbecco’s改良培養(yǎng)基–DMEM(Dulbecco’sModifiedEagleMedium)是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的,,與MEM培養(yǎng)基相比,,氨基酸的含量增加了2倍,維生素的含量增加了4倍,,同時還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及酸鈉,。DMEM培養(yǎng)基*初設(shè)計葡萄糖含量為1000mg/L(低糖型),,后來又發(fā)展出葡萄糖含量為4500mg/L(高糖型),現(xiàn)已廣泛應用于各種細胞的培養(yǎng),。針對較廣的細胞培養(yǎng)應用,,我們提供多種組分的DMEM改良培養(yǎng)基。青霉素-鏈霉素混合液通常也被稱為“雙抗”,,是體外培養(yǎng)中為預防微生物污染*常用的,其中,,青霉素能夠干擾細菌細胞壁的合成,,對革蘭陽性菌特別有效;而鏈霉素能夠與細菌核糖體30S亞單位結(jié)合,,抑制細菌蛋白質(zhì)的合成,,對革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌均有效,,但對革蘭氏陰性菌特別有效,。青霉素和鏈霉素聯(lián)合使用可以預防絕大部分的細菌污染。本產(chǎn)品含有多類細胞培養(yǎng)所需的氨基酸,、維生素,、無機鹽等多種成分,,但不含蛋白質(zhì),、脂類或任何生長因子,,故此產(chǎn)品需搭配血清或無血清添加物使用。注意事項本產(chǎn)品經(jīng)過濾除菌,,使用時應注意無菌操作,,避免污染;為保持本產(chǎn)品的比較好使用效果,,請勿進行凍融處理,;本產(chǎn)品用于科研或進一步研究使用,不用于診斷,。 DMEM/F12培養(yǎng)基常作為開發(fā)無血清培養(yǎng)基的基礎(chǔ),,也適用于低血清含量下哺乳動物細胞的培養(yǎng)以及克隆密度培養(yǎng),。
Dulbecco’s改良培養(yǎng)基–DMEM(Dulbecco’sModifiedEagleMedium)是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的,與MEM培養(yǎng)基相比,,氨基酸的含量增加了2倍,,維生素的含量增加了4倍,同時還增加了非必須氨基酸,、微量鐵離子以及**酸鈉,。DMEM培養(yǎng)基初設(shè)計葡萄糖含量為1000mg/L(低糖型),后來又發(fā)展出葡萄糖含量為4500mg/L(高糖型),,現(xiàn)已廣泛應用于各種細胞的培養(yǎng),。青霉素-鏈霉素混合液通常也被稱為“雙抗”,是體外培養(yǎng)中為預防微生物污染常用的***,,其中,,青霉素能夠干擾細菌細胞壁的合成,對革蘭陽性菌特別有效,;而鏈霉素能夠與細菌核糖體30S亞單位結(jié)合,,抑制細菌蛋白質(zhì)的合成,對革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌均有效,,但對革蘭氏陰性菌特別有效。青霉素和鏈霉素聯(lián)合使用可以預防絕大部分的細菌污染,。本產(chǎn)品含有多類細胞培養(yǎng)所需的氨基酸、維生素,、無機鹽等多種成分,,但不含蛋白質(zhì)、脂類或任何生長因子,,故此產(chǎn)品需搭配血清或無血清添加物使用,。 Ham’s F-12營養(yǎng)混合物(Ham’s F-12 Nutrient Mixture)是由Ham以Ham’s F-10營養(yǎng)混合物為基礎(chǔ)設(shè)計而成的。海南RPMI-1640細胞培養(yǎng)基生產(chǎn)產(chǎn)家
DMEM培養(yǎng)基**初設(shè)計葡萄糖含量為1000mg/L(低糖型),,后來又發(fā)展出葡萄糖含量為4500mg/L(高糖型)。廣東樣本細胞培養(yǎng)基全國發(fā)貨
MEMα是一種改良的MEM培養(yǎng)基,,與MEM培養(yǎng)基相比MEMα培養(yǎng)基營養(yǎng)更為豐富,,在MEM的基礎(chǔ)上又添加了NEAA、**酸鈉,、硫酸鋅,、VB12、生物素,、抗壞血酸等成分,,廣泛應用于各種哺乳動物懸浮和貼壁細胞的培養(yǎng),。不含核苷和脫氧核苷的MEMα培養(yǎng)基常常用作DG44和其他DHFR-缺陷型細胞的篩選培養(yǎng)基。酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑,,用以持續(xù)監(jiān)測培養(yǎng)液的酸堿度,,在低PH值時酚紅使培養(yǎng)液呈黃色,而較高的PH值時使培養(yǎng)液呈紫色,,PH值~,,**適合細胞培養(yǎng),。但酚紅也有一些缺點,研究表明酚紅可以模擬固醇類***(特別是雌***)的作用,,因此在用到雌***敏感的細胞時(如乳腺組織),比較好使用不含酚紅的培養(yǎng)基,。酚紅會干擾流式細胞分析時候的檢測,。此外,一些無血清培養(yǎng)基的配方中若存在酚紅會干擾鈉-鉀平衡,。青霉素-鏈霉素混合液通常也被稱為“雙抗”,,是體外培養(yǎng)中為預防微生物污染**常用的***,其中,,青霉素能夠干擾細菌細胞壁的合成,,對革蘭陽性菌特別有效,;而鏈霉素能夠與細菌核糖體30S亞單位結(jié)合,,抑制細菌蛋白質(zhì)的合成,,對革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌均有效,但對革蘭氏陰性菌特別有效,。青霉素和鏈霉素聯(lián)合使用可以預防絕大部分的細菌污染,。 廣東樣本細胞培養(yǎng)基全國發(fā)貨
深圳市華晨陽科技有限公司是一家致力于核酸檢測、分子診斷,、醫(yī)學檢驗,、病毒檢測等產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn),、銷售于一體的國家高新技術(shù)企業(yè),。公司擁有二十多項**,,部分專利已經(jīng)轉(zhuǎn)化應用于市場。產(chǎn)品主要應用于基因檢測,、醫(yī)療機構(gòu),、生物制藥、大型甲等醫(yī)院,、出入境檢驗檢疫,、診斷試劑、疾控機構(gòu)、刑偵法醫(yī)鑒定等,。近年來,,公司不斷加大自主研發(fā)投入,積極引進人才和技術(shù),,并與國內(nèi)外多家科研機構(gòu),、醫(yī)學檢驗所以及三甲醫(yī)院、基因檢測公司,、疾病預防控制中心等科研機構(gòu)有著緊密合作,,促進人類健康產(chǎn)業(yè)大發(fā)展。