RPMI-1640細胞培養(yǎng)基RPMI-1640是Moore等人于1967年在美國紐約州法羅市的羅斯韋爾公園紀念研究所(RoswellParkMemorialInstitute,RPMI)開發(fā)出來的,,RPMI是該研究所開發(fā)的一類細胞培養(yǎng)基,,1640是培養(yǎng)基代號。
我們提供多種組分的RPMI1640改良培養(yǎng)基,。RPMI-1640細胞培養(yǎng)基L-谷氨酰胺(Glutamine)是細胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)元素,,但其在溶液中不穩(wěn)定,會自發(fā)降解,,不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基,,可以根據(jù)研究需要任意調(diào)整L-谷氨酰胺的用量,,在使用時添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細胞的生長。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺,。Alanyl-glutamine,,Ala-Glu),又名丙氨酰谷氨酰胺,、丙谷二肽,,是一種高級細胞培養(yǎng)添加劑,可直接替代細胞培養(yǎng)基中的L-谷氨酰胺,。L-谷氨酰胺(Glutamine)是細胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)素,,但其在溶液中不穩(wěn)定,會自發(fā)降解生成氨和焦谷氨酸,,其中氨對細胞有害,;而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的穩(wěn)定,不會自發(fā)的降解,。細胞利用其機制是:在細胞培養(yǎng)時,,細胞會逐漸向培養(yǎng)液中釋放一種肽酶,將L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺,,而后細胞會將這兩種水解產(chǎn)物吸收利用,。 Dulbecco’s 改良培養(yǎng)基–DMEM(Dulbecco’s Modified Eagle Medium)現(xiàn)已廣應用于各種細胞的培養(yǎng)。山東正規(guī)細胞培養(yǎng)基批發(fā)廠
Leibovitz’sL-15培養(yǎng)基的緩沖系統(tǒng)由磷酸鹽和游離堿基氨基酸組成,,代替了傳統(tǒng)的碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng),,同時,用半乳糖和**酸鈉代替葡萄糖可以防止酸性代謝副產(chǎn)物的形成,,有助于維持培養(yǎng)液PH的穩(wěn)定,,適合用于非CO2平衡環(huán)境的細胞培養(yǎng)。Leibovitz’sL-15培養(yǎng)基適用于猴腎細胞和HEP-2的培養(yǎng),、原代(如胚胎和成人組織)細胞分離、多種病毒的培養(yǎng)以及神經(jīng)元的培養(yǎng)等,。L-谷氨酰胺(Glutamine)是細胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)元素,,但其在溶液中不穩(wěn)定,會自發(fā)降解,,不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基,,可以根據(jù)研究需要任意調(diào)整L-谷氨酰胺的用量,在使用時添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細胞的生長,。 河南RPMI-1640細胞培養(yǎng)基源頭直供針對細胞培養(yǎng)應用,,我們提供多種組分的RPMI1640改良培養(yǎng)基。
Ham’sF-12營養(yǎng)混合物(Ham’sF-12NutrientMixture)Ham’sF-12營養(yǎng)混合物(Ham’sF-12NutrientMixture)是由Ham在1969年以Ham’sF-10營養(yǎng)混合物為基礎設計而成的,,初用于CHO細胞的無血清培養(yǎng),。Ham’sF-12常作為無血清培養(yǎng)的基礎培養(yǎng)液,,在低血清含量下時,特別適合單細胞培養(yǎng)和克隆化培養(yǎng),,添加血清后也廣泛應用于細胞和原代細胞的培養(yǎng),,如大鼠肝細胞、大鼠前列腺上皮細胞,、軟骨細胞,、大鼠成肌細胞、雞胚胎細胞等,。此外,,Ham’sF-12與DMEM等體積混合后,得到的DMEM/F12培養(yǎng)基營養(yǎng)更為豐富,,使用更為較廣,。Ham’sF-12營養(yǎng)混合物(Ham’sF-12NutrientMixture)L-谷氨酰胺(Glutamine)是細胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)元素,但其在溶液中不穩(wěn)定,,會自發(fā)降解,,不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基,可以根據(jù)研究需要任意調(diào)整L-谷氨酰胺的用量,,在使用時添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細胞的生長,。
門)冬氨酸、L-脯氨酸,、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA,,能降低細胞培養(yǎng)時細胞自身生產(chǎn)非必須氨基酸的副作用,有效促進細胞增殖代謝,。葡萄糖可以根據(jù)研究需要,,隨意調(diào)節(jié)葡萄糖的濃度,方便快捷,。高糖型培養(yǎng)基普遍應用于生長快,、粘附性低的細胞、雜交瘤的骨髓瘤細胞,、克隆細胞,、DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細胞、各種原代病毒宿主細胞,、單一細胞的培養(yǎng)以及疫苗的生產(chǎn),,例如利用CHO細胞表達EPO和生產(chǎn)乙肝疫苗。低糖培養(yǎng)基更適合代謝作用較慢,、依賴性貼壁細胞的培養(yǎng),。HEPES是一種優(yōu)良的生物緩沖劑,對細胞無毒性作用,,添加HEPES的培養(yǎng)基能夠較長時間保持恒定的PH范圍,,可以有效的防止培養(yǎng)液PH波動較大對細胞生長產(chǎn)生不利的影響,。可用于無CO2培養(yǎng)箱,。酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑,,用以持續(xù)監(jiān)測培養(yǎng)液的酸堿度,在低PH值時酚紅使培養(yǎng)液呈黃色,,而較高的PH值時使培養(yǎng)液呈紫色,,PH值~,**適合細胞培養(yǎng),。但酚紅也有一些缺點,,研究表明酚紅可以模擬固醇類***(特別是雌***)的作用,因此在用到雌***敏感的細胞時(如乳腺組織),,**好使用不含酚紅的培養(yǎng)基,。酚紅會干擾流式細胞分析時候的檢測。此外,,一些無血清培養(yǎng)基的配方中若存在酚紅會干擾鈉-鉀平衡,。MEM培養(yǎng)基含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素,,主用于貼壁細胞培養(yǎng),,修改后也可用于其他細胞培養(yǎng)。
培養(yǎng)液的滲透壓是一個非常重要的因素,細胞通??赡褪?60mOsm/kg~320mOsm/kg,。標準培養(yǎng)液的滲透壓在此范圍內(nèi)波動。特別注意:向培養(yǎng)液中加入其它物質(zhì)有可能會明顯改變培養(yǎng)液的滲透壓,,特別是溶于強酸或強堿中的物質(zhì),。向培養(yǎng)液中添加HEPES時需按以下方法調(diào)節(jié)鈉離子濃度。緩沖系統(tǒng)大多數(shù)細胞所需pH在-,。但是,,細胞培養(yǎng)適pH值隨培養(yǎng)的細胞種類不同而不同。成纖維細胞喜歡較高pH(-),而傳代轉(zhuǎn)化細胞系則需要偏酸pH(-),。由于多數(shù)培養(yǎng)液靠碳酸氫鈉(NaHCO3)與CO2體系進行緩沖,,因此,氣相中的CO2濃度應與培養(yǎng)液中碳酸氫鈉濃度相平衡,。如果氣相或培養(yǎng)箱空氣中CO2濃度設定在5%,培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量為,;如果CO2濃度維持在10%,,培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量為。細胞培養(yǎng)瓶蓋不應擰得太緊,,以保證氣體交換,。HEPES是一種非離子緩沖液,,在pH-范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力,但是非常昂貴,,在高濃度時對一些細胞可能有毒,。HEPES緩沖液可與低水平的碳酸鈉()共用,以抵消因額外加入HEPES引起的滲透壓增加,。在這種培養(yǎng)條件下,,細胞培養(yǎng)瓶的蓋子應擰緊,以防止培養(yǎng)液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中,。大多數(shù)培養(yǎng)液中含有酚紅作為pH指示劑,,酸性培養(yǎng)液呈橙黃色,堿性培養(yǎng)液呈深紅色,。大多數(shù)哺乳動物細胞培養(yǎng)基不同的是其典型的PH8的配方,。RPMI-1640培養(yǎng)基初是為淋巴細胞培養(yǎng)專門設計的。遼寧正規(guī)細胞培養(yǎng)基批發(fā)
RPMI 1640 培養(yǎng)基含有生物素,、 維生素 B12 以及 PABA,,這些成分是 Eagle’s MEM 和DMEM所不具備的。山東正規(guī)細胞培養(yǎng)基批發(fā)廠
CMRL培養(yǎng)基是由康諾特醫(yī)學研究室(ConnaughtMedicalResearchLaboratories)設計出來的,,初用于L細胞(Earle)的無血清培養(yǎng),。CMRL培養(yǎng)基添加馬血清或小牛血清后,特別適用于猴腎細胞的克隆培養(yǎng)以及其他哺乳動物細胞系的培養(yǎng),。本產(chǎn)品含有多類細胞培養(yǎng)所需的氨基酸,、維生素、無機鹽等多種成分,,但不含蛋白質(zhì),、脂類或任何生長因子,故此產(chǎn)品需搭配血清或無血清添加物使用,。注意事項本產(chǎn)品經(jīng)過濾除菌,,使用時應注意無菌操作,避免污染,;為保持本產(chǎn)品的比較好使用效果,,請勿進行凍融處理;本產(chǎn)品用于科研或進一步研究使用,,不用于診斷和,。山東正規(guī)細胞培養(yǎng)基批發(fā)廠
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