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江西正規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)基

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-07-07

RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基是改進(jìn)型的McCoy‘s5A培養(yǎng)基,,使用碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng),,與大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培養(yǎng)基常初是為淋巴細(xì)胞培養(yǎng)專門設(shè)計(jì)的,,現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于各種正常細(xì)胞和ai細(xì)胞的培養(yǎng),,包括HeLa細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞,、MCF-7細(xì)胞,、PC12細(xì)胞、PBMC細(xì)胞,、星形膠質(zhì)細(xì)胞和ai細(xì)胞,,是使用常為廣的培養(yǎng)基之一。

RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基L-谷氨酰胺(Glutamine)是細(xì)胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)元素,,但其在溶液中不穩(wěn)定,,會(huì)自發(fā)降解,不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基,,可以根據(jù)研究需要任意調(diào)整L-谷氨酰胺的用量,,在使用時(shí)添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細(xì)胞的生長。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺,。Alanyl-glutamine,,Ala-Glu),又名丙氨酰谷氨酰胺,、丙谷二肽,,是一種高級(jí)細(xì)胞培養(yǎng)添加劑,可直接替代細(xì)胞培養(yǎng)基中的L-谷氨酰胺,。L-谷氨酰胺(Glutamine)是細(xì)胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)素,,但其在溶液中不穩(wěn)定,會(huì)自發(fā)降解生成氨和焦谷氨酸,,其中氨對(duì)細(xì)胞有害,;而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的穩(wěn)定,不會(huì)自發(fā)的降解,。 Fischer’s培養(yǎng)基不含蛋白質(zhì),、脂類或任何生長因子,故此產(chǎn)品需搭配血清或無血清添加物使用,。江西正規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)基

RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基RPMI-1640是Moore等人于1967年在美國紐約州法羅市的羅斯韋爾公園紀(jì)念研究所(RoswellParkMemorialInstitute,RPMI)開發(fā)出來的,,RPMI是該研究所開發(fā)的一類細(xì)胞培養(yǎng)基,1640是培養(yǎng)基代號(hào),。

我們提供多種組分的RPMI1640改良培養(yǎng)基,。RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基L-谷氨酰胺(Glutamine)是細(xì)胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)元素,但其在溶液中不穩(wěn)定,會(huì)自發(fā)降解,,不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基,,可以根據(jù)研究需要任意調(diào)整L-谷氨酰胺的用量,在使用時(shí)添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細(xì)胞的生長,。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺,。Alanyl-glutamine,Ala-Glu),,又名丙氨酰谷氨酰胺,、丙谷二肽,是一種高級(jí)細(xì)胞培養(yǎng)添加劑,,可直接替代細(xì)胞培養(yǎng)基中的L-谷氨酰胺,。L-谷氨酰胺(Glutamine)是細(xì)胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)素,但其在溶液中不穩(wěn)定,,會(huì)自發(fā)降解生成氨和焦谷氨酸,其中氨對(duì)細(xì)胞有害,;而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的穩(wěn)定,,不會(huì)自發(fā)的降解。細(xì)胞利用其機(jī)制是:在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),,細(xì)胞會(huì)逐漸向培養(yǎng)液中釋放一種肽酶,,將L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺,而后細(xì)胞會(huì)將這兩種水解產(chǎn)物吸收利用,。 吉林RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基廠家直銷Dulbecco’s 改良培養(yǎng)基–DMEM(Dulbecco’s Modified Eagle Medium)現(xiàn)已廣應(yīng)用于各種細(xì)胞的培養(yǎng),。

    無血清培養(yǎng)基中通常需要添加一些額外的組分,才能幫助細(xì)胞貼壁生長,,包括以下幾大類物質(zhì):1)促貼壁物質(zhì):一般為細(xì)胞外基質(zhì),,如纖連蛋白、層粘連蛋白等,。它們還是重要的分裂素以及維持正常細(xì)胞功能的分化因子,,對(duì)許多細(xì)胞的繁殖和分化,起著重要作用,。纖連蛋白主要促進(jìn)來自中胚層細(xì)胞的貼壁與分化,,這些細(xì)胞包括成纖維細(xì)胞、肉瘤細(xì)胞,、粒細(xì)胞,、腎上皮細(xì)胞、腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞,、CHO細(xì)胞,、成肌細(xì)胞等。2)促生長因子:針對(duì)不同細(xì)胞添加不同的生長因子。也是刺激細(xì)胞生長,、維持細(xì)胞功能的重要物質(zhì),,有些是許多細(xì)胞必不可少的,如胰島素,。3)酶抑制劑:培養(yǎng)貼壁生長的細(xì)胞,,需要用胰酶消化傳代,在無血清培養(yǎng)基中需含酶抑制劑,,以終止酶的消化作用,,達(dá)到保護(hù)細(xì)胞的目的。常用的是大豆胰酶抑制劑,。4)結(jié)合蛋白和轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白:常見如轉(zhuǎn)鐵蛋白和牛血清白蛋白,。牛血清白蛋白的添加量比較大,可增加培養(yǎng)基的粘度,,保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷,。許多旋轉(zhuǎn)式培養(yǎng)的無血清培養(yǎng)基都含有牛血清白蛋白。5)微量元素:硒是常見的,。

    Dulbecco’s改良培養(yǎng)基–DMEM(Dulbecco’sModifiedEagleMedium)是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的,,與MEM培養(yǎng)基相比,氨基酸的含量增加了2倍,,維生素的含量增加了4倍,,同時(shí)還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及**酸鈉,。DMEM培養(yǎng)基**初設(shè)計(jì)葡萄糖含量為1000mg/L(低糖型),,后來又發(fā)展出葡萄糖含量為4500mg/L(高糖型),現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞的培養(yǎng),。高糖型培養(yǎng)基普遍應(yīng)用于生長快,、粘附性低的細(xì)胞、雜交瘤的骨髓瘤細(xì)胞,、克隆細(xì)胞,、DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞、各種原代病毒宿主細(xì)胞,、單一細(xì)胞的培養(yǎng)以及疫苗的生產(chǎn),,例如利用CHO細(xì)胞表達(dá)EPO和生產(chǎn)乙肝疫苗。低糖培養(yǎng)基更適合代謝作用較慢,、依賴性貼壁細(xì)胞的培養(yǎng),。不含葡萄糖的培養(yǎng)基可以根據(jù)研究需要,隨意調(diào)節(jié)葡萄糖的濃度,,方便快捷,。L-谷氨酰胺(Glutamine)是細(xì)胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)元素,,但其在溶液中不穩(wěn)定,會(huì)自發(fā)降解,,不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基,,可以根據(jù)研究需要任意調(diào)整L-谷氨酰胺的用量,,在使用時(shí)添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細(xì)胞的生長,。 Eagle培養(yǎng)基由Harry Eagle在Eagle基本培養(yǎng)基(BEM)的基礎(chǔ)上發(fā)展而來的。

    Alanyl-glutamine,,Ala-Glu),,又名丙氨酰谷氨酰胺、丙谷二肽,,是一種高級(jí)細(xì)胞培養(yǎng)添加劑,,可直接替代細(xì)胞培養(yǎng)基中的L-谷氨酰胺。L-谷氨酰胺(Glutamine)是細(xì)胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)素,,但其在溶液中不穩(wěn)定,,會(huì)自發(fā)降解生成氨和焦谷氨酸,其中氨對(duì)細(xì)胞有害,;而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的穩(wěn)定,,不會(huì)自發(fā)的降解。細(xì)胞利用其機(jī)制是:在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),,細(xì)胞會(huì)逐漸向培養(yǎng)液中釋放一種肽酶,將L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺,,而后細(xì)胞會(huì)將這兩種水解產(chǎn)物吸收利用,。細(xì)胞利用L-丙氨酰-L-谷氨酰的過程與流加培養(yǎng)策略相似,連續(xù)的將低濃度水平的L-谷氨酰胺加入到培養(yǎng)液中,,從而提高了L-谷氨酰胺的利用率,,且不會(huì)生成多余的氨,更利于細(xì)胞的生長,。L-丙氨酰-L-谷氨??梢源娴饶柕腖-谷氨酰胺,適用于所有的細(xì)胞,,幾乎無需適應(yīng),,并且可以延長細(xì)胞的培養(yǎng)時(shí)間,減少傳代次數(shù),,即節(jié)省了時(shí)間也節(jié)約了金錢,。與添加L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細(xì)胞相比,活性降低得更慢,。延滯期略微延長的原因是肽酶的釋放和二肽的消化需要一定的時(shí)間,。NEAA(非必須氨基酸),是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸,、L-天(門)冬酰胺,、L-天。McCoy’s5A培養(yǎng)基是改良的Basal Medium5A,,McCoy’s 5A含有還原型谷胱甘肽,、細(xì)菌蛋白胨以及高濃度的葡萄糖。江西正規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)基

RPMI-1640培養(yǎng)基初是為淋巴細(xì)胞培養(yǎng)專門設(shè)計(jì)的,,現(xiàn)在已應(yīng)用于各種正常細(xì)胞ai細(xì)胞的培養(yǎng),。江西正規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)基

    Leibovitz’sL-15培養(yǎng)基的緩沖系統(tǒng)由磷酸鹽和游離堿基氨基酸組成,代替了傳統(tǒng)的碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng),,同時(shí),,用半乳糖和**酸鈉代替葡萄糖可以防止酸性代謝副產(chǎn)物的形成,有助于維持培養(yǎng)液PH的穩(wěn)定,,適合用于非CO2平衡環(huán)境的細(xì)胞培養(yǎng),。Leibovitz’sL-15培養(yǎng)基適用于猴腎細(xì)胞和HEP-2的培養(yǎng)、原代(如胚胎和成人組織)細(xì)胞分離,、多種病毒的培養(yǎng)以及神經(jīng)元的培養(yǎng)等,。NEAA(非必須氨基酸),是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加L-丙氨酸,、L-谷氨酸,、L-天(門)冬酰胺、L-天(門)冬氨酸,、L-脯氨酸,、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA,能降低細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)細(xì)胞自身生產(chǎn)非必須氨基酸的副作用,,有效促進(jìn)細(xì)胞增殖代謝,。酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑,用以持續(xù)監(jiān)測(cè)培養(yǎng)液的酸堿度,,在低PH值時(shí)酚紅使培養(yǎng)液呈黃色,,而較高的PH值時(shí)使培養(yǎng)液呈紫色,PH值~,,適合細(xì)胞培養(yǎng),。但酚紅也有一些缺點(diǎn),研究表明酚紅可以模擬固醇類(特別是雌)的作用,,因此在用到雌敏感的細(xì)胞時(shí)(如乳腺組織),,較好使用不含酚紅的培養(yǎng)基。酚紅會(huì)干擾流式細(xì)胞分析時(shí)候的檢測(cè),。此外,,一些無血清培養(yǎng)基的配方中若存在酚紅會(huì)干擾鈉-鉀平衡,。 江西正規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)基

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