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上海iclean細胞培養(yǎng)基批發(fā)廠

來源: 發(fā)布時間:2025-06-10

    Dulbecco’s改良培養(yǎng)基–DMEM(Dulbecco’sModifiedEagleMedium)是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的,,與MEM培養(yǎng)基相比,氨基酸的含量增加了2倍,,維生素的含量增加了4倍,,同時還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及**酸鈉,。DMEM培養(yǎng)基**初設計葡萄糖含量為1000mg/L(低糖型),,后來又發(fā)展出葡萄糖含量為4500mg/L(高糖型),現(xiàn)已廣泛應用于各種細胞的培養(yǎng),。針對***的細胞培養(yǎng)應用,,我們提供多種組分的DMEM改良培養(yǎng)基。高糖型培養(yǎng)基普遍應用于生長快,、粘附性低的細胞,、雜交瘤的骨髓瘤細胞、克隆細胞,、DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細胞,、各種原代病毒宿主細胞、單一細胞的培養(yǎng)以及疫苗的生產(chǎn),,例如利用CHO細胞表達EPO和生產(chǎn)乙肝疫苗,。低糖培養(yǎng)基更適合代謝作用較慢、依賴性貼壁細胞的培養(yǎng),。不含葡萄糖的培養(yǎng)基可以根據(jù)研究需要,,隨意調(diào)節(jié)葡萄糖的濃度,方便快捷,。L-谷氨酰胺(Glutamine)是細胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)元素,,但其在溶液中不穩(wěn)定,會自發(fā)降解,,不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基,,可以根據(jù)研究需要任意調(diào)整L-谷氨酰胺的用量,在使用時添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細胞的生長,。 Ham’s F-12營養(yǎng)混合物(Ham’s F-12 Nutrient Mixture)初用于CHO細胞的無血清培養(yǎng),。上海iclean細胞培養(yǎng)基批發(fā)廠

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    培養(yǎng)液的滲透壓是一個非常重要的因素,細胞通常可耐受260mOsm/kg~320mOsm/kg。標準培養(yǎng)液的滲透壓在此范圍內(nèi)波動,。特別注意:向培養(yǎng)液中加入其它物質(zhì)有可能會明顯改變培養(yǎng)液的滲透壓,特別是溶于強酸或強堿中的物質(zhì),。向培養(yǎng)液中添加HEPES時需按以下方法調(diào)節(jié)鈉離子濃度,。緩沖系統(tǒng)大多數(shù)細胞所需pH在-。但是,,細胞培養(yǎng)適pH值隨培養(yǎng)的細胞種類不同而不同,。成纖維細胞喜歡較高pH(-),而傳代轉(zhuǎn)化細胞系則需要偏酸pH(-)。由于多數(shù)培養(yǎng)液靠碳酸氫鈉(NaHCO3)與CO2體系進行緩沖,,因此,,氣相中的CO2濃度應與培養(yǎng)液中碳酸氫鈉濃度相平衡。如果氣相或培養(yǎng)箱空氣中CO2濃度設定在5%,,培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量為,;如果CO2濃度維持在10%,培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量為,。細胞培養(yǎng)瓶蓋不應擰得太緊,,以保證氣體交換。HEPES是一種非離子緩沖液,,在pH-范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力,,但是非常昂貴,在高濃度時對一些細胞可能有毒,。HEPES緩沖液可與低水平的碳酸鈉()共用,,以抵消因額外加入HEPES引起的滲透壓增加。在這種培養(yǎng)條件下,,細胞培養(yǎng)瓶的蓋子應擰緊,,以防止培養(yǎng)液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中。大多數(shù)培養(yǎng)液中含有酚紅作為pH指示劑,,酸性培養(yǎng)液呈橙黃色,,堿性培養(yǎng)液呈深紅色。云南細胞培養(yǎng)基批發(fā)Ham’s F-10適合用于人二倍體細胞的培養(yǎng),,低血清條件下細胞的克隆化培養(yǎng),,及動物的原代細胞培養(yǎng)。

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RPMI-1640細胞培養(yǎng)基RPMI-1640是Moore等人開發(fā)出來的,,RPMI是該研究所開發(fā)的一類細胞培養(yǎng)基,,1640是培養(yǎng)基代號。

RPMI-1640是改進型的McCoy‘s5A培養(yǎng)基,,使用碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng),,與大多數(shù)哺乳動物細胞培養(yǎng)基不同的是其典型的PH8的配方。

RPMI-1640培養(yǎng)基常初是為淋巴細胞培養(yǎng)專門設計的,現(xiàn)在已廣泛應用于各種正常細胞和ai細胞的培養(yǎng),,包括HeLa細胞,、Jurkat細胞、MCF-7細胞,、PC12細胞,、PBMC細胞、星形膠質(zhì)細胞和ai細胞,,是使用常為廣的培養(yǎng)基之一,。

RPMIRPMI1640培養(yǎng)基相比其他培養(yǎng)基之所以具有獨特的效果,是因為其中含有還原劑谷胱甘肽和高濃度的維生素,。RPMI1640培養(yǎng)基含有生物素,、維生素B12以及PABA,這些成分是Eagle’sMEM和DMEM所不具備的,。針對廣的細胞培養(yǎng)應用,,我們提供多種組分的RPMI1640改良培養(yǎng)基。


    動物細胞培養(yǎng)(animalcellculture)就是從動物機體中取出相關(guān)的組織,,將它分散成單個細胞(使用胰蛋白酶或膠原蛋白酶)然后,,放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細胞生長和增殖,。細胞培養(yǎng)基的種類有哪些,?按照細胞培養(yǎng)基的發(fā)展歷史,細胞培養(yǎng)基大致可分為平衡鹽溶液,、天然細胞培養(yǎng)基,、合成細胞培養(yǎng)基、無血清細胞培養(yǎng)基,、限定化學成分細胞培養(yǎng)基等幾大種類,。DMEM(Dulbecco’smodifiedMinimalEssentialMedium)是由Dulbecco在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上改良獲得的,各成分份量加倍,,分低糖(1000mg/L),、高糖(4500mg/L)兩種類型。細胞生長快,。附著稍差的腫瘤細胞,、克隆培養(yǎng)用高糖效果較好,常用于雜交瘤的骨髓瘤細胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細胞培養(yǎng),。2.神經(jīng)元基礎(chǔ)培養(yǎng)基可為神經(jīng)元生長提供基礎(chǔ)營養(yǎng)物質(zhì),。IPL-41昆蟲培養(yǎng)基(IPL-41InsectMedium)旨在用于大規(guī)模擴增草地貪夜蛾(Spodopterafrugiperda)細胞系,也常用于通過桿狀病毒表達系統(tǒng)(BEVS)進行蛋白表達,。IPL-41培養(yǎng)基是對原始IPL配方的改良,,由美國農(nóng)業(yè)部昆蟲病理實驗室Weiss等人開發(fā),,用于大規(guī)模擴增草地貪夜蛾衍生細胞系。Weiss向基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入了胎牛血清和TPB培養(yǎng)基(TryptosePhosphateBroth),,成功地實現(xiàn)了IPL-21AE,。Eagle培養(yǎng)基是一種基本、適用范圍廣的培養(yǎng)基,,是動物細胞培養(yǎng)中常用的培養(yǎng)基之一,。

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    L-谷氨酰胺(Glutamine)是細胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)素,但其在溶液中不穩(wěn)定,,會自發(fā)降解生成氨和焦谷氨酸,其中氨對細胞有害,;而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的穩(wěn)定,,不會自發(fā)的降解。細胞利用其機制是:在細胞培養(yǎng)時,,細胞會逐漸向培養(yǎng)液中釋放一種肽酶,,將L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺,而后細胞會將這兩種水解產(chǎn)物吸收利用,。細胞利用L-丙氨酰-L-谷氨酰的過程與流加培養(yǎng)策略相似,,連續(xù)的將低濃度水平的L-谷氨酰胺加入到培養(yǎng)液中,從而提高了L-谷氨酰胺的利用率,,且不會生成多余的氨,,更利于細胞的生長。L-丙氨酰-L-谷氨??梢源娴饶柕腖-谷氨酰胺,,適用于所有的細胞,幾乎無需適應,,并且可以延長細胞的培養(yǎng)時間,,減少傳代次數(shù),即節(jié)省了時間也節(jié)約了金錢,。與添加L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細胞相比,,活性降低得更慢。延滯期略微延長的原因是肽酶的釋放和二肽的消化需要一定的時間,。NEAA(非必須氨基酸),,是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸,、L-天(門)冬酰胺,、L-天(門)冬氨酸、L-脯氨酸,、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA,,能降低細胞培養(yǎng)時細胞自身生產(chǎn)非必須氨基酸的副作用,有效促進細胞增殖代謝。葡萄糖可以根據(jù)研究需要,。McCoy’s 5A培養(yǎng)基是Thomas McCoy等人在1959年設計的培養(yǎng)基,,初專門用于Novikoff Hepatoma細胞的培養(yǎng)。重慶iclean細胞培養(yǎng)基廠家

Leibovitz’sL-15培養(yǎng)基適用于猴腎細胞和HEP-2的培養(yǎng),、原代細胞分離,、多種病毒的培養(yǎng)以及神經(jīng)元的培養(yǎng)等。上海iclean細胞培養(yǎng)基批發(fā)廠

    III)細胞系的大規(guī)模連續(xù)培養(yǎng),。該培養(yǎng)基主要用于培養(yǎng)和維護鱗翅類衍生細胞系和擴增這些細胞系的病毒,。IPL-41培養(yǎng)基基礎(chǔ)也以用于無血清夜蛾細胞的桿狀病毒重組蛋白表達。(balancedsaltsolution,,BSS)BSS主要是由無機鹽,、葡萄糖組成,它的作用是維持細胞滲透壓平衡,,保持pH穩(wěn)定及提供簡單的營養(yǎng),。其主要用于細胞的漂洗、配制其他試劑等,。目前用于細胞培養(yǎng)的血清主要是牛血清,,培養(yǎng)某些特殊細胞也用人血清、馬血清等,。牛血清對絕大多數(shù)哺乳動物細胞都是適合的,,但并不排除在培養(yǎng)某種細胞時使用其他動物血清更合適。血清中含有各種血漿蛋白,、多肽,、脂肪、碳水化合物,、生長因子,、無機物等,這些物質(zhì)對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的,。合成培養(yǎng)基是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分,,用化學物質(zhì)模擬合成、人工設計,、配制的培養(yǎng)基,。上海iclean細胞培養(yǎng)基批發(fā)廠

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