RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基是改進(jìn)型的McCoy‘s5A培養(yǎng)基,,使用碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng),與大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基不同的是其典型的PH8的配方,。RPMI-1640培養(yǎng)基常初是為淋巴細(xì)胞培養(yǎng)專門設(shè)計(jì)的,,現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于各種正常細(xì)胞和ai細(xì)胞的培養(yǎng),包括HeLa細(xì)胞,、Jurkat細(xì)胞,、MCF-7細(xì)胞、PC12細(xì)胞,、PBMC細(xì)胞,、星形膠質(zhì)細(xì)胞和ai細(xì)胞,是使用常為廣的培養(yǎng)基之一,。
RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基L-谷氨酰胺(Glutamine)是細(xì)胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)元素,,但其在溶液中不穩(wěn)定,會(huì)自發(fā)降解,,不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基,,可以根據(jù)研究需要任意調(diào)整L-谷氨酰胺的用量,在使用時(shí)添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細(xì)胞的生長,。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺,。Alanyl-glutamine,Ala-Glu),,又名丙氨酰谷氨酰胺,、丙谷二肽,是一種高級細(xì)胞培養(yǎng)添加劑,,可直接替代細(xì)胞培養(yǎng)基中的L-谷氨酰胺,。L-谷氨酰胺(Glutamine)是細(xì)胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)素,但其在溶液中不穩(wěn)定,,會(huì)自發(fā)降解生成氨和焦谷氨酸,,其中氨對細(xì)胞有害,;而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的穩(wěn)定,不會(huì)自發(fā)的降解,。 Ham’s F-12與DMEM等體積混合后,,得到的DMEM/F12培養(yǎng)基營養(yǎng)更為豐富,使用更為廣,。湖北實(shí)驗(yàn)細(xì)胞培養(yǎng)基源頭廠家
L-谷氨酰胺(Glutamine)是細(xì)胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)素,,但其在溶液中不穩(wěn)定,會(huì)自發(fā)降解生成氨和焦谷氨酸,,其中氨對細(xì)胞有害,;而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的穩(wěn)定,不會(huì)自發(fā)的降解,。細(xì)胞利用其機(jī)制是:在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),,細(xì)胞會(huì)逐漸向培養(yǎng)液中釋放一種肽酶,將L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺,,而后細(xì)胞會(huì)將這兩種水解產(chǎn)物吸收利用,。細(xì)胞利用L-丙氨酰-L-谷氨酰的過程與流加培養(yǎng)策略相似,連續(xù)的將低濃度水平的L-谷氨酰胺加入到培養(yǎng)液中,,從而提高了L-谷氨酰胺的利用率,,且不會(huì)生成多余的氨,更利于細(xì)胞的生長,。L-丙氨酰-L-谷氨??梢源娴饶柕腖-谷氨酰胺,適用于所有的細(xì)胞,,幾乎無需適應(yīng),,并且可以延長細(xì)胞的培養(yǎng)時(shí)間,減少傳代次數(shù),,即節(jié)省了時(shí)間也節(jié)約了金錢,。與添加L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細(xì)胞相比,活性降低得更慢,。延滯期略微延長的原因是肽酶的釋放和二肽的消化需要一定的時(shí)間。NEAA(非必須氨基酸),,是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加L-丙氨酸,、L-谷氨酸、L-天(門)冬酰胺,、L-天(門)冬氨酸,、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA,,能降低細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)細(xì)胞自身生產(chǎn)非必須氨基酸的副作用,,有效促進(jìn)細(xì)胞增殖代謝,。葡萄糖可以根據(jù)研究需要。海南實(shí)驗(yàn)細(xì)胞培養(yǎng)基生產(chǎn)產(chǎn)家DMEM 培養(yǎng)基擁有多種配方,,低葡萄糖濃度(1g/L)的配方,,溫柔呵護(hù)對高糖敏感的細(xì)胞。
Ham’sF-12K培養(yǎng)基是Ham’sF-12營養(yǎng)混合物的Kaighn’s改進(jìn)型,,在Ham’sF-12的基礎(chǔ)上提高了氨基酸和**酸的濃度,,降低了葡萄糖的用量,并修改了鹽的成分和含量(Konigsbergs),。Ham’sF-12K培養(yǎng)基**初設(shè)計(jì)用于培養(yǎng)原代人肝細(xì)胞以及分化的大鼠和雞的細(xì)胞,。針對***的細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用,我們提供多種組分的Ham’sF-12K改良培養(yǎng)基,。酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑,,用以持續(xù)監(jiān)測培養(yǎng)液的酸堿度,在低PH值時(shí)酚紅使培養(yǎng)液呈黃色,,而較高的PH值時(shí)使培養(yǎng)液呈紫色,,PH值~,**適合細(xì)胞培養(yǎng),。但酚紅也有一些缺點(diǎn),,研究表明酚紅可以模擬固醇類***(特別是雌***)的作用,因此在用到雌***敏感的細(xì)胞時(shí)(如乳腺組織),,比較好使用不含酚紅的培養(yǎng)基,。酚紅會(huì)干擾流式細(xì)胞分析時(shí)候的檢測。此外,,一些無血清培養(yǎng)基的配方中若存在酚紅會(huì)干擾鈉-鉀平衡,。青霉素-鏈霉素混合液通常也被稱為“雙抗”,是體外培養(yǎng)中為預(yù)防微生物污染**常用的***,,其中,,青霉素能夠干擾細(xì)菌細(xì)胞壁的合成,對革蘭陽性菌特別有效,;而鏈霉素能夠與細(xì)菌核糖體30S亞單位結(jié)合,,抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成,對革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌均有效,,但對革蘭氏陰性菌特別有效,。青霉素和鏈霉素聯(lián)合使用可以預(yù)防絕大部分的細(xì)菌污染。
在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)踐中,,選擇合適的 DMEM 培養(yǎng)基至關(guān)重要,。對于生長較快、粘附性低的細(xì)胞,,如某些腫瘤細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞,,高糖型 DMEM 培養(yǎng)基是理想之選,,其高濃度葡萄糖能充分滿足這類細(xì)胞對能量的高需求,促進(jìn)細(xì)胞快速生長,。而對于一些原代細(xì)胞,,因其對培養(yǎng)環(huán)境更為敏感,可能需要低糖型 DMEM 培養(yǎng)基,,并根據(jù)細(xì)胞來源和特性添加特定的生長因子,、營養(yǎng)補(bǔ)充劑等,定制專屬培養(yǎng)方案,,為原代細(xì)胞提供**適宜的生長條件,,提高原代細(xì)胞培養(yǎng)的成功率。McCoy’s 5A培養(yǎng)基還用于組織活檢培養(yǎng),、細(xì)胞建系,,以及一些淋巴細(xì)胞和較難培養(yǎng)的細(xì)胞的培養(yǎng)。
細(xì)胞培養(yǎng)基的種類按照細(xì)胞培養(yǎng)基的發(fā)展歷史,,細(xì)胞培養(yǎng)基大致可分為平衡鹽溶液,、天然細(xì)胞培養(yǎng)基、合成細(xì)胞培養(yǎng)基,、無血清細(xì)胞培養(yǎng)基,、限定化學(xué)成分細(xì)胞培養(yǎng)基等幾大種類。(balancedsaltsolution,,BSS)BSS主要是由無機(jī)鹽,、葡萄糖組成,它的作用是維持細(xì)胞滲透壓平衡,,保持pH穩(wěn)定及提供簡單的營養(yǎng),。其主要用于細(xì)胞的漂洗、配制其他試劑等,。幾種常用的BSS配方如下(表1-1),。D-Hank's與Hank's的一個(gè)主要區(qū)別是前者不含有Ca2+和Mg2+,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液,。因?yàn)镃a2+,、Mg2+是細(xì)胞膜的重要組成成份,參與細(xì)胞粘附等功能,,使用不含Ca2+,、Mg2+的BSS可避免細(xì)胞結(jié)團(tuán)。此外,,Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎(chǔ)溶液,前者緩沖能力較弱,,適合于密閉培養(yǎng),;后者緩沖能力較強(qiáng),,適合于5%CO2的培養(yǎng)條件。表1-1幾種常用的BSS配方,。Leibovitz’s L-15培養(yǎng)基的緩沖系統(tǒng)由磷酸鹽和游離堿基氨基酸組成,,代替了傳統(tǒng)的碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng)。福建樣本細(xì)胞培養(yǎng)基生產(chǎn)產(chǎn)家
MEM α培養(yǎng)基是一種改良的MEM培養(yǎng)基,,與MEM培養(yǎng)基相比MEM α培養(yǎng)基營養(yǎng)更為豐富,。湖北實(shí)驗(yàn)細(xì)胞培養(yǎng)基源頭廠家
Leibovitz’sL-15培養(yǎng)基的緩沖系統(tǒng)由磷酸鹽和游離堿基氨基酸組成,代替了傳統(tǒng)的碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng),,同時(shí),,用半乳糖和**酸鈉代替葡萄糖可以防止酸性代謝副產(chǎn)物的形成,有助于維持培養(yǎng)液PH的穩(wěn)定,,適合用于非CO2平衡環(huán)境的細(xì)胞培養(yǎng),。Leibovitz’sL-15培養(yǎng)基適用于猴腎細(xì)胞和HEP-2的培養(yǎng)、原代(如胚胎和成人組織)細(xì)胞分離,、多種病毒的培養(yǎng)以及神經(jīng)元的培養(yǎng)等,。L-谷氨酰胺(Glutamine)是細(xì)胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)元素,但其在溶液中不穩(wěn)定,,會(huì)自發(fā)降解,,不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基,可以根據(jù)研究需要任意調(diào)整L-谷氨酰胺的用量,,在使用時(shí)添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細(xì)胞的生長,。 湖北實(shí)驗(yàn)細(xì)胞培養(yǎng)基源頭廠家
深圳市華晨陽科技有限公司在同行業(yè)領(lǐng)域中,一直處在一個(gè)不斷銳意進(jìn)取,,不斷制造創(chuàng)新的市場高度,,多年以來致力于發(fā)展富有創(chuàng)新價(jià)值理念的產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn),在廣東省等地區(qū)的醫(yī)藥健康中始終保持良好的商業(yè)口碑,,成績讓我們喜悅,,但不會(huì)讓我們止步,殘酷的市場磨煉了我們堅(jiān)強(qiáng)不屈的意志,,和諧溫馨的工作環(huán)境,,富有營養(yǎng)的公司土壤滋養(yǎng)著我們不斷開拓創(chuàng)新,,勇于進(jìn)取的無限潛力,,深圳市華晨陽科技供應(yīng)攜手大家一起走向共同輝煌的未來,回首過去,,我們不會(huì)因?yàn)槿〉昧艘稽c(diǎn)點(diǎn)成績而沾沾自喜,,相反的是面對競爭越來越激烈的市場氛圍,我們更要明確自己的不足,,做好迎接新挑戰(zhàn)的準(zhǔn)備,,要不畏困難,,激流勇進(jìn),以一個(gè)更嶄新的精神面貌迎接大家,,共同走向輝煌回來,!