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無(wú)血清培養(yǎng)基中通常需要添加一些額外的組分,才能幫助細(xì)胞貼壁生長(zhǎng),,包括以下幾大類物質(zhì):1)促貼壁物質(zhì):一般為細(xì)胞外基質(zhì),,如纖連蛋白、層粘連蛋白等,。它們還是重要的分裂素以及維持正常細(xì)胞功能的分化因子,,對(duì)許多細(xì)胞的繁殖和分化,,起著重要作用。纖連蛋白主要促進(jìn)來(lái)自中胚層細(xì)胞的貼壁與分化,,這些細(xì)胞包括成纖維細(xì)胞,、肉瘤細(xì)胞、粒細(xì)胞,、腎上皮細(xì)胞,、腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞、CHO細(xì)胞,、成肌細(xì)胞等,。2)促生長(zhǎng)因子:針對(duì)不同細(xì)胞添加不同的生長(zhǎng)因子。也是刺激細(xì)胞生長(zhǎng),、維持細(xì)胞功能的重要物質(zhì),,有些是許多細(xì)胞必不可少的,如胰島素,。3)酶抑制劑:培養(yǎng)貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞,,需要用胰酶消化傳代,在無(wú)血清培養(yǎng)基中需含酶抑制劑,,以終止酶的消化作用,,達(dá)到保護(hù)細(xì)胞的目的。常用的是大豆胰酶抑制劑,。4)結(jié)合蛋白和轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白:常見如轉(zhuǎn)鐵蛋白和牛血清白蛋白,。牛血清白蛋白的添加量比較大,可增加培養(yǎng)基的粘度,,保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷,。許多旋轉(zhuǎn)式培養(yǎng)的無(wú)血清培養(yǎng)基都含有牛血清白蛋白。5)微量元素:硒是常見的,。MCDB是為特定細(xì)胞設(shè)計(jì)的低蛋白和無(wú)血清培養(yǎng)的培養(yǎng)基,。河北樣本細(xì)胞培養(yǎng)基供應(yīng)商
干細(xì)胞研究同樣與 DMEM 培養(yǎng)基緊密相連。DMEM 培養(yǎng)基能夠?yàn)楦杉?xì)胞群體的維持和擴(kuò)增提供適宜環(huán)境,。以胚胎干細(xì)胞為例,,高糖型 DMEM 培養(yǎng)基憑借充足的能量供應(yīng),助力胚胎干細(xì)胞保持良好的生長(zhǎng)狀態(tài),,維持其多能性,。在誘導(dǎo)干細(xì)胞分化為特定細(xì)胞類型時(shí),科研人員可根據(jù)需求對(duì) DMEM 培養(yǎng)基進(jìn)行優(yōu)化,,添加特定的生長(zhǎng)因子等成分,,引導(dǎo)干細(xì)胞向目標(biāo)細(xì)胞分化。比如,,在神經(jīng)干細(xì)胞向神經(jīng)元細(xì)胞分化的研究中,,通過(guò)調(diào)整 DMEM 培養(yǎng)基成分,,促進(jìn)神經(jīng)干細(xì)胞的分化進(jìn)程,為神經(jīng)再生醫(yī)學(xué)研究奠定基礎(chǔ),。江蘇正規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)基檢測(cè)Eagle培養(yǎng)基由Harry Eagle在Eagle基本培養(yǎng)基(BEM)的基礎(chǔ)上發(fā)展而來(lái)的,。
Dulbecco’s改良培養(yǎng)基–DMEM(Dulbecco’sModifiedEagleMedium)是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的,與MEM培養(yǎng)基相比,,氨基酸的含量增加了2倍,,維生素的含量增加了4倍,同時(shí)還增加了非必須氨基酸,、微量鐵離子以及酸鈉,。DMEM培養(yǎng)基*初設(shè)計(jì)葡萄糖含量為1000mg/L(低糖型),后來(lái)又發(fā)展出葡萄糖含量為4500mg/L(高糖型),,現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞的培養(yǎng),。針對(duì)較廣的細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用,,我們提供多種組分的DMEM改良培養(yǎng)基,。青霉素-鏈霉素混合液通常也被稱為“雙抗”,是體外培養(yǎng)中為預(yù)防微生物污染*常用的,,其中,,青霉素能夠干擾細(xì)菌細(xì)胞壁的合成,對(duì)革蘭陽(yáng)性菌特別有效,;而鏈霉素能夠與細(xì)菌核糖體30S亞單位結(jié)合,,抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成,對(duì)革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽(yáng)性菌均有效,,但對(duì)革蘭氏陰性菌特別有效,。青霉素和鏈霉素聯(lián)合使用可以預(yù)防絕大部分的細(xì)菌污染。本產(chǎn)品含有多類細(xì)胞培養(yǎng)所需的氨基酸,、維生素,、無(wú)機(jī)鹽等多種成分,但不含蛋白質(zhì),、脂類或任何生長(zhǎng)因子,,故此產(chǎn)品需搭配血清或無(wú)血清添加物使用。注意事項(xiàng)本產(chǎn)品經(jīng)過(guò)濾除菌,,使用時(shí)應(yīng)注意無(wú)菌操作,,避免污染;為保持本產(chǎn)品的比較好使用效果,,請(qǐng)勿進(jìn)行凍融處理,;本產(chǎn)品用于科研或進(jìn)一步研究使用,不用于診斷,。
可在血清含量低時(shí)用,,適用于克隆化培養(yǎng),。F12適用于CHO細(xì)胞,也是無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基中常用的基礎(chǔ)細(xì)胞培養(yǎng)基,。DMEM/F12細(xì)胞培養(yǎng)基將DMEM和F12按照1:1比例混合,,混合后營(yíng)養(yǎng)成份豐富,血清使用量也減少,。常作為開發(fā)無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)的基礎(chǔ)細(xì)胞培養(yǎng)基,。與天然培養(yǎng)基相比,有些天然的未知成分尚無(wú)法用已知的化學(xué)成分所替代,,因此,,細(xì)胞培養(yǎng)中使用合成培養(yǎng)基時(shí)必須加入一定量的天然培養(yǎng)基成分,以克服合成培養(yǎng)基的不足,。普遍的做法是添加5~10%的血清,,這樣才能維持細(xì)胞活力,促進(jìn)細(xì)胞增殖,。針對(duì)不同的動(dòng)物細(xì)胞,,現(xiàn)已開發(fā)了多種商業(yè)化、個(gè)性化的低血清細(xì)胞培養(yǎng)基配方,,營(yíng)養(yǎng)成份更加豐富,,血清使用量可降低至1~3%,由此可減少了血清等動(dòng)物來(lái)源成份對(duì)生物制品安全性的影響,。無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基(serumfreemedium,,SFM)經(jīng)歷了天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基后,,無(wú)血清培養(yǎng)基和無(wú)血清培養(yǎng)成為當(dāng)今細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域的一大趨勢(shì),。采用無(wú)血清培養(yǎng)可降低生產(chǎn)成本,簡(jiǎn)化分離純化步驟,,避免病毒污染造成的危害,。無(wú)血清培養(yǎng)基,一般是在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上,,加入成份完全明確的或部分明確的血清替代成份,,達(dá)到既能滿足動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的要求,又能有效克服使用血清所帶來(lái)問(wèn)題的目的,。McCoy’s 5A常用于多種類型的原代細(xì)胞的培養(yǎng),,如骨髓、皮膚,、牙齦,、腎、脾、肺,、大鼠胚胎,、網(wǎng)膜等。
RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基RPMI-1640是Moore等人于1967年在美國(guó)紐約州法羅市的羅斯韋爾公園紀(jì)念研究所(RoswellParkMemorialInstitute,RPMI)開發(fā)出來(lái)的,,RPMI是該研究所開發(fā)的一類細(xì)胞培養(yǎng)基,,1640是培養(yǎng)基代號(hào)。
我們提供多種組分的RPMI1640改良培養(yǎng)基,。RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基L-谷氨酰胺(Glutamine)是細(xì)胞培養(yǎng)中所必需的一種營(yíng)養(yǎng)元素,,但其在溶液中不穩(wěn)定,會(huì)自發(fā)降解,,不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基,,可以根據(jù)研究需要任意調(diào)整L-谷氨酰胺的用量,在使用時(shí)添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細(xì)胞的生長(zhǎng),。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺,。Alanyl-glutamine,Ala-Glu),,又名丙氨酰谷氨酰胺,、丙谷二肽,是一種高級(jí)細(xì)胞培養(yǎng)添加劑,,可直接替代細(xì)胞培養(yǎng)基中的L-谷氨酰胺,。L-谷氨酰胺(Glutamine)是細(xì)胞培養(yǎng)中所必需的一種營(yíng)養(yǎng)素,但其在溶液中不穩(wěn)定,,會(huì)自發(fā)降解生成氨和焦谷氨酸,其中氨對(duì)細(xì)胞有害,;而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的穩(wěn)定,,不會(huì)自發(fā)的降解。細(xì)胞利用其機(jī)制是:在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),,細(xì)胞會(huì)逐漸向培養(yǎng)液中釋放一種肽酶,,將L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺,而后細(xì)胞會(huì)將這兩種水解產(chǎn)物吸收利用,。 M199全稱Medium 199,,廣泛應(yīng)用于各種動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng),包括一些非哺乳類動(dòng)物細(xì)胞,。河北樣本細(xì)胞培養(yǎng)基供應(yīng)商
DMEM 培養(yǎng)基擁有多種配方,,低葡萄糖濃度(1g/L)的配方,溫柔呵護(hù)對(duì)高糖敏感的細(xì)胞,。河北樣本細(xì)胞培養(yǎng)基供應(yīng)商
L-谷氨酰胺(Glutamine)是細(xì)胞培養(yǎng)中所必需的一種營(yíng)養(yǎng)素,,但其在溶液中不穩(wěn)定,會(huì)自發(fā)降解生成氨和焦谷氨酸,其中氨對(duì)細(xì)胞有害,;而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的穩(wěn)定,,不會(huì)自發(fā)的降解。細(xì)胞利用其機(jī)制是:在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),,細(xì)胞會(huì)逐漸向培養(yǎng)液中釋放一種肽酶,,將L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺,而后細(xì)胞會(huì)將這兩種水解產(chǎn)物吸收利用,。細(xì)胞利用L-丙氨酰-L-谷氨酰的過(guò)程與流加培養(yǎng)策略相似,,連續(xù)的將低濃度水平的L-谷氨酰胺加入到培養(yǎng)液中,從而提高了L-谷氨酰胺的利用率,,且不會(huì)生成多余的氨,,更利于細(xì)胞的生長(zhǎng)。L-丙氨酰-L-谷氨??梢源娴饶柕腖-谷氨酰胺,,適用于所有的細(xì)胞,幾乎無(wú)需適應(yīng),,并且可以延長(zhǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)時(shí)間,,減少傳代次數(shù),即節(jié)省了時(shí)間也節(jié)約了金錢,。與添加L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細(xì)胞相比,,活性降低得更慢。延滯期略微延長(zhǎng)的原因是肽酶的釋放和二肽的消化需要一定的時(shí)間,。NEAA(非必須氨基酸),,是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸,、L-天(門)冬酰胺,、L-天(門)冬氨酸、L-脯氨酸,、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA,,能降低細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)細(xì)胞自身生產(chǎn)非必須氨基酸的副作用,有效促進(jìn)細(xì)胞增殖代謝,。葡萄糖可以根據(jù)研究需要,。河北樣本細(xì)胞培養(yǎng)基供應(yīng)商
深圳市華晨陽(yáng)科技有限公司匯集了大量的優(yōu)秀人才,集企業(yè)奇思,,創(chuàng)經(jīng)濟(jì)奇跡,,一群有夢(mèng)想有朝氣的團(tuán)隊(duì)不斷在前進(jìn)的道路上開創(chuàng)新天地,繪畫新藍(lán)圖,,在廣東省等地區(qū)的醫(yī)藥健康中始終保持良好的信譽(yù),,信奉著“爭(zhēng)取每一個(gè)客戶不容易,失去每一個(gè)用戶很簡(jiǎn)單”的理念,市場(chǎng)是企業(yè)的方向,,質(zhì)量是企業(yè)的生命,,在公司有效方針的領(lǐng)導(dǎo)下,全體上下,,團(tuán)結(jié)一致,,共同進(jìn)退,**協(xié)力把各方面工作做得更好,,努力開創(chuàng)工作的新局面,,公司的新高度,未來(lái)深圳市華晨陽(yáng)科技供應(yīng)和您一起奔向更美好的未來(lái),,即使現(xiàn)在有一點(diǎn)小小的成績(jī),,也不足以驕傲,過(guò)去的種種都已成為昨日我們只有總結(jié)經(jīng)驗(yàn),,才能繼續(xù)上路,,讓我們一起點(diǎn)燃新的希望,放飛新的夢(mèng)想,!