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貴州蛋白質(zhì)磷酸化修飾組學研究

來源: 發(fā)布時間:2022-03-08

什么是蛋白質(zhì)的翻譯后修飾,?蛋白質(zhì)的翻譯后修飾()是指蛋白質(zhì)在翻譯后的化學修飾,。對于大部分的蛋白質(zhì)來說,,這是蛋白質(zhì)生物合成的較后步驟,。PTM是細胞信號傳導中的重要組成部分,。通過向修飾基團添加一個或多個氨基酸殘基或通過蛋白質(zhì)水解切割該基團來改變蛋白質(zhì)的性質(zhì),,是蛋白質(zhì)生物學功能表達的重要步驟,。生物蛋白質(zhì)的翻譯后修飾極大地增加了蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的類型和功能,。這個過程調(diào)節(jié)細胞周期和蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)錄,,并影響表觀遺傳學,。蛋白質(zhì)有哪些翻譯后修飾?貴州蛋白質(zhì)磷酸化修飾組學研究

蛋白質(zhì)糖基化修飾組學技術:糖基化是在酶的控制下,蛋白質(zhì)或脂質(zhì)附加上糖類的過程,發(fā)生于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體等部位。在糖基轉(zhuǎn)移酶作用下將糖轉(zhuǎn)移至蛋白質(zhì),和蛋白質(zhì)上的氨基酸殘基共價結(jié)合,。蛋白質(zhì)經(jīng)過糖基化作用,形成糖蛋白,。糖基化是對蛋白的重要的修飾作用,有調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)功能作用。凝素親和法是目前糖蛋白質(zhì)組學中應用普遍的分離富集方法,。凝集素(lectin)是一類糖結(jié)合蛋白質(zhì),,能專一識別某一特殊結(jié)構(gòu)的單糖或聚糖中特定的糖基序列而與之結(jié)合,它們與糖鏈可逆非共價結(jié)合,,糖蛋白或糖肽被凝集素捕獲之后,,通常用特定的單糖通過競爭結(jié)合凝集素將糖蛋白或糖肽洗脫下來。蛋白質(zhì)經(jīng)過酶解后利用凝集素(lectin)富集N-糖基化肽段,,然后用N-糖酰胺酶(PNGase)在H218O中切除連接在天冬酰胺殘基(Asn)上的糖鏈,。南京蛋白質(zhì)泛素化修飾組學有哪些質(zhì)譜可以分辨蛋白質(zhì)修飾前和修飾后分子量上的變化。

蛋白翻譯后修飾:蛋白質(zhì)氨基酸序列的特定位置可以與化學基團或者小分子量的蛋白共價結(jié)合從而發(fā)生蛋白質(zhì)翻譯后修飾(post-translational modifications,,PTMs),。翻譯后修飾是蛋白質(zhì)生物合成的一個步驟,翻譯后多肽鏈在成為成熟的蛋白質(zhì)產(chǎn)品之前要經(jīng)過修飾,,PTMs的類型包括磷酸化,、乙酰化,、糖基化,、泛素化和二硫鍵等等,它導致蛋白質(zhì)組復雜性的大幅增加,。對于任何給定的蛋白質(zhì),,各種各樣的PTMs提供了一種通過改變蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能來促進細胞快速變化的方法。PTMs在信號轉(zhuǎn)導,、蛋白質(zhì)穩(wěn)定性和周轉(zhuǎn)率,、蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)識別和相互作用以及空間定位中起著至關重要的作用。

蛋白質(zhì)泛素化修飾組學技術:泛素化修飾是一種重要的翻譯后修飾,。泛素-蛋白酶體系統(tǒng)介導了真核生物體內(nèi)80%~85%的蛋白質(zhì)降解,。此外,泛素化修飾還可以直接影響蛋白質(zhì)的活性和定位,,調(diào)控包括細胞周期,、細胞凋亡、轉(zhuǎn)錄調(diào)控,、DNA 損傷修復以及免疫應答等在內(nèi)的多種細胞活動,。樣品要求:1、SDS-PAGE條帶:5個以上可見考染條帶,。2、溶液(目標蛋白質(zhì)):目標蛋白總量>50μg,目標蛋白濃度>80%,。3,、溶液(大規(guī)模混合蛋白質(zhì)):蛋白總量>1mg,,蛋白濃度>1μg/μl,。目前對乙酰化修飾的功能研究主要集中在對細胞轉(zhuǎn)錄調(diào)控,,以及對代謝通路的調(diào)控這兩個方面,。

翻譯后修飾蛋白組:翻譯后修飾蛋白組分析是指在組學水平上對存在翻譯后修飾的蛋白質(zhì)進行分析。翻譯后修飾蛋白組是指細胞或組織等整體水平上的翻譯后修飾蛋白,。蛋白質(zhì)的翻譯后修飾(Post Translational Modifications, PTMs)是蛋白質(zhì)在翻譯中或翻譯后經(jīng)歷的一個共價加工過程,。蛋白翻譯后修飾通過在一個或多個氨基酸殘基上加修飾基團或通過蛋白質(zhì)水解去基團而改變蛋白質(zhì)的性質(zhì),調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)的功能,。經(jīng)過翻譯后修飾的蛋白質(zhì)稱為翻譯后修飾蛋白,。目前,已知的蛋白質(zhì)翻譯后修飾主要包括糖基化,、磷酸化,、乙酰化,、泛素化,、二硫鍵配對、甲基化和亞硝基化等等,。常見的蛋白質(zhì)翻譯后修飾包括糖基化,。上海蛋白質(zhì)乙酰化修飾組學方法

泛素化修飾是一種重要的翻譯后修飾,。貴州蛋白質(zhì)磷酸化修飾組學研究

蛋白質(zhì)磷酸化修飾定義,?在哺乳動物細胞生命周期中,大約有1/3的蛋白質(zhì)發(fā)生過磷酸化修飾,,在脊椎動物基因中,,約有5%的基因編碼的蛋白質(zhì)是參與磷酸化和去磷酸化過程的蛋白激酶和磷酸酶。它可以通過激發(fā),、調(diào)節(jié)諸多信號通路進而參與調(diào)控生物體的生長,、發(fā)育、逆境應激,、疾病發(fā)生等多種生命過程,,一直是生物學研究的重點與熱點。蛋白磷酸化是指在激酶催化作用下把ATP或者GTP的磷酸基團(P04)轉(zhuǎn)移到不同種類的氨基酸上(主要包括絲氨酸S,、蘇氨酸T,、酪氨酸Y),,從而使蛋白質(zhì)發(fā)生翻譯后修飾的過程。貴州蛋白質(zhì)磷酸化修飾組學研究

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