蛋白質(zhì)泛素化修飾組學(xué)技術(shù)：泛素化修飾是一種重要的翻譯后修飾,。泛素-蛋白酶體系統(tǒng)介導(dǎo)了真核生物體內(nèi)80%~85%的蛋白質(zhì)降解。此外,，泛素化修飾還可以直接影響蛋白質(zhì)的活性和定位,，調(diào)控包括細胞周期、細胞凋亡,、轉(zhuǎn)錄調(diào)控,、DNA 損傷修復(fù)以及免疫應(yīng)答等在內(nèi)的多種細胞活動。樣品要求：1,、SDS-PAGE條帶：5個以上可見考染條帶,。2,、溶液（目標(biāo)蛋白質(zhì)）：目標(biāo)蛋白總量>50μg,，目標(biāo)蛋白濃度>80%。3,、溶液（大規(guī)?；旌系鞍踪|(zhì)）：蛋白總量>1mg，蛋白濃度>1μg/μl,。常見的蛋白質(zhì)翻譯后修飾包括糖基化,。武漢蛋白質(zhì)丙酰化修飾組學(xué)領(lǐng)域
翻譯后修飾蛋白組分析：蛋白質(zhì)翻譯后修飾是影響蛋白質(zhì)功能并調(diào)節(jié)整個細胞過程的重要方式,，幾乎在每個細胞過程中都是不可或缺的,。分析和鑒定翻譯后修飾蛋白質(zhì)對揭示蛋白質(zhì)的功能和深入了解各種生理現(xiàn)象具有重要意義。大多數(shù)翻譯后修飾蛋白以低化學(xué)計量和豐度存在,，這限制了在分析全細胞裂解液時對其的檢測,。因此，要在蛋白質(zhì)組學(xué)的范圍內(nèi)表征翻譯后修飾蛋白,，純化方法是必要的,，以分離修飾蛋白和肽段，然后再進行后續(xù)分析,。后續(xù)分析一般采用質(zhì)譜技術(shù)進行,，可以對翻譯后修飾蛋白組進行定性和定量研究。哈爾濱琥珀?；揎椀鞍踪|(zhì)組學(xué)方法乙?；揎棇毎藘?nèi)轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的刺激有著非常重要的作用。
蛋白質(zhì)翻譯后修飾組學(xué)：蛋白質(zhì)翻譯后修飾(Post-translational modification, PTM)是指對翻譯后的蛋白質(zhì)進行共價加工的過程,。它通過在一個或多個氨基酸殘基加上修飾基團,，可以改變蛋白質(zhì)的物理、化學(xué)性質(zhì),，進而影響蛋白質(zhì)的空間構(gòu)象和活性狀態(tài),、亞細胞定位,、折疊及其穩(wěn)定性以及蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用。蛋白質(zhì)翻譯后修飾的豐度變化在生命活動研究中具有重大意義,，異常的翻譯后修飾會導(dǎo)致多種疾病的發(fā)生,。質(zhì)譜可以分辨蛋白質(zhì)修飾前和修飾后分子量上的變化，因此只要知道靶蛋白翻譯后修飾前后分子量的變化,就能對翻譯后修飾方式進行鑒定和定量,。
蛋白質(zhì)翻譯后修飾組學(xué)：翻譯后修飾自下而上分析策略：自下而上蛋白質(zhì)組學(xué)是一種基于肽段分析的技術(shù),。對于不同類型的翻譯后修飾，具體的分析策略存在差異,。蛋白質(zhì)的糖基化具有異質(zhì)性,。不同的糖鏈可以連接到同一位點上，不同位點可以連接到同一蛋白質(zhì)上的不同糖鏈上,。糖基化的異質(zhì)性嚴重阻礙了糖蛋白的分離和分析,。不同糖類型的相同蛋白質(zhì)，在電泳上會出現(xiàn)分散的條帶,，導(dǎo)致信號分散,。此外，對低豐度蛋白質(zhì)的識別性差導(dǎo)致糖蛋白在色譜圖中分離不佳,，質(zhì)譜中有一簇分子量不準(zhǔn)確的分辨不清的峰,。目前，蛋白糖基化研究的主要策略是利用現(xiàn)有的技術(shù)體系對糖基化蛋白的糖基化肽段進行分離和富集,，消除糖基化的異質(zhì)性及其對質(zhì)譜的影響,，標(biāo)記糖基化位點。蛋白質(zhì)翻譯后修飾是指對翻譯后的蛋白質(zhì)進行共價加工的過程,。
蛋白質(zhì)乙?；揎椊M學(xué)定量分析：1. SILAC細胞標(biāo)記，組織/細胞破碎,，提取,、提純目的蛋白質(zhì)（基于SILAC的乙酰化修飾組學(xué)定量）,。2. 使用胰蛋白酶將目的蛋白酶解成多肽片段,。3. 對多肽片段進行iTRAQ標(biāo)記（基于iTRAQ的乙酰化修飾組學(xué)定量）,。4. 使用高效特異性乙?；贵w對乙酰化修飾肽段進行免疫富集,。5. 使用LC-MS/MS對富集的乙?；亩芜M行序列分析。6. 數(shù)據(jù)分析，比對不同樣本中蛋白乙?；揎椝讲町?，并對產(chǎn)生變化的生物學(xué)意義進行解釋。蛋白質(zhì)翻譯后修飾組學(xué)磷酸化修飾具有可逆的特性,。濟南蛋白質(zhì)丙?；揎椊M學(xué)一般流程
蛋白質(zhì)翻譯后修飾可以改變蛋白質(zhì)的物理、化學(xué)性質(zhì),。武漢蛋白質(zhì)丙?；揎椊M學(xué)領(lǐng)域
蛋白質(zhì)翻譯后修飾分析策略：早期蛋白質(zhì)組研究的大部分工作集中在細胞生長的不同時期，或疾病或有絲分裂原刺激后的蛋白質(zhì)表達水平的變化,。然而,，許多生命過程不只受蛋白質(zhì)的相對豐度控制，還受時空分布可逆的翻譯后修飾控制,。因此,，揭示翻譯后修飾的規(guī)律是了解蛋白質(zhì)復(fù)雜性和多樣的生物學(xué)功能的前提。蛋白質(zhì)的翻譯后修飾是一個復(fù)雜的過程,。目前,，發(fā)現(xiàn)的比較常見的修飾類型是糖基化,、泛素化和磷酸化,。樣品中翻譯后修飾蛋白質(zhì)含量低、動態(tài)范圍廣給相關(guān)研究帶來了很大的挑戰(zhàn),?；诜g后修飾蛋白的異質(zhì)性和相對豐度低的特點，主要利用凝膠,、生物質(zhì)譜和生物信息學(xué)工具對其進行研究,。用于PTM分析的質(zhì)譜方法類似于用于“常規(guī)”蛋白質(zhì)鑒定的方法，包括自下而上,、自中而下和自上而下的蛋白質(zhì)組學(xué)分析,。武漢蛋白質(zhì)丙酰化修飾組學(xué)領(lǐng)域
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