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江蘇蛋白質(zhì)泛素化修飾組學(xué)質(zhì)譜鑒定

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2022-03-31

蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用是蛋白質(zhì)發(fā)揮功能的主要機(jī)制之一,在DNA損傷修復(fù),自噬和代謝等過(guò)程中都扮演著非常重要的角色,蛋白相互作用異常便會(huì)導(dǎo)致疾病的發(fā)生.在蛋白質(zhì)的賴氨酸,絲氨酸和蘇氨酸等氨基酸殘基上,可發(fā)生甲基化,乙?;?磷酸化和泛素化等200多種翻譯后修飾,這些修飾通常能改變蛋白質(zhì)的電性,疏水性和空間結(jié)構(gòu)等屬性,為與之結(jié)合的蛋白提供結(jié)合的錨定或產(chǎn)生位阻效應(yīng),像一把開關(guān)在時(shí)空上精確調(diào)控蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用的發(fā)生以及動(dòng)態(tài)變化.結(jié)構(gòu)研究表明,蛋白質(zhì)之間的相互作用通常由臨近的幾個(gè)氨基酸殘基直接結(jié)合,替換該區(qū)域的氨基酸殘基,通常能破壞結(jié)合,使其失去部分功能或酶活性,可以針對(duì)性地開發(fā)和設(shè)計(jì)抑制劑,用于疾病的診療,。乙酰化修飾是原核和真核生物所共有的一種翻譯后修飾類型,。江蘇蛋白質(zhì)泛素化修飾組學(xué)質(zhì)譜鑒定

蛋白質(zhì)磷酸化修飾組學(xué)技術(shù):蛋白質(zhì)的磷酸化修飾是生物體內(nèi)重要的共價(jià)修飾方式之一,。磷酸化修飾本身所具有的簡(jiǎn)單、靈活,、可逆的特性,,以及磷酸基團(tuán)的供體ATP的易得性,使得磷酸化修飾被真核細(xì)胞所選擇接受成為一種普遍的調(diào)控手段,。蛋白質(zhì)的磷酸化和去磷酸化這一可逆過(guò)程,,幾乎調(diào)節(jié)著包括細(xì)胞的增殖、發(fā)育,、分化,、細(xì)胞骨架調(diào)控、細(xì)胞凋亡,、神經(jīng)活動(dòng),、肌肉收縮、新陳代謝發(fā)生等生命活動(dòng)的過(guò)程,,并且可逆的蛋白質(zhì)磷酸化是目前所知道的主要的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)方式,。目前已經(jīng)知道有許多人類疾病是由于異常的磷酸化修飾所引起,而有些磷酸化修飾卻是某種疾病所導(dǎo)致的后果。四川泛素化修飾蛋白質(zhì)組學(xué)主要技術(shù)質(zhì)譜是蛋白質(zhì)翻譯后修飾檢測(cè)的常用技術(shù)之一,。

蛋白質(zhì)乙?;揎椂x:蛋白質(zhì)在細(xì)胞中經(jīng)過(guò)翻譯后,到被運(yùn)輸?shù)较鄳?yīng)的細(xì)胞器并且發(fā)生特定的生物學(xué)作用前會(huì)經(jīng)過(guò)很重要的一步加工,,那就是蛋白質(zhì)翻譯后修飾加工,。蛋白質(zhì)翻譯后修飾的作用主要是改變蛋白質(zhì)的活性、定位或功能,。通過(guò)蛋白質(zhì)翻譯后修飾也進(jìn)一步增加了細(xì)胞通路機(jī)制和生命活動(dòng)的多樣性和復(fù)雜性,。常見的蛋白質(zhì)翻譯后修飾包括磷酸化,乙?;?,糖基化,泛素化等,。蛋白質(zhì)乙?;揎棧櫭剂x指的就是在蛋白質(zhì)原有基礎(chǔ)上面嫁接上乙?;鶊F(tuán),。在細(xì)胞中,乙?;揎椀姆磻?yīng)由乙?;D(zhuǎn)移酶所催化,將乙酰輔酶A的乙?;D(zhuǎn)移并添加在蛋白質(zhì)賴氨酸殘基上,。在早期的研究中,,乙?;揎椧恢北徽J(rèn)為是真核細(xì)胞所特有的一種翻譯后修飾,直到后來(lái)研究發(fā)現(xiàn)原核細(xì)胞中年也存在著蛋白質(zhì)乙?;揎?。所以,乙?;揎検窃撕驼婧松锼灿械囊环N翻譯后修飾類型,。

翻譯后修飾蛋白組:翻譯后修飾蛋白組分析是指在組學(xué)水平上對(duì)存在翻譯后修飾的蛋白質(zhì)進(jìn)行分析。翻譯后修飾蛋白組是指細(xì)胞或組織等整體水平上的翻譯后修飾蛋白,。蛋白質(zhì)的翻譯后修飾(Post Translational Modifications, PTMs)是蛋白質(zhì)在翻譯中或翻譯后經(jīng)歷的一個(gè)共價(jià)加工過(guò)程,。蛋白翻譯后修飾通過(guò)在一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基上加修飾基團(tuán)或通過(guò)蛋白質(zhì)水解去基團(tuán)而改變蛋白質(zhì)的性質(zhì),調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)的功能,。經(jīng)過(guò)翻譯后修飾的蛋白質(zhì)稱為翻譯后修飾蛋白,。目前,已知的蛋白質(zhì)翻譯后修飾主要包括糖基化,、磷酸化,、乙?;⒎核鼗?、二硫鍵配對(duì),、甲基化和亞硝基化等等。蛋白質(zhì)翻譯后修飾有什么生物學(xué)意義,?

翻譯后修飾蛋白的檢測(cè)方法:翻譯后修飾蛋白的檢測(cè)技術(shù)包括有免疫沉淀,、western blot、質(zhì)譜技術(shù),、體外生化分析等,。其中,免疫沉淀是大多數(shù)翻譯后修飾檢測(cè)中的關(guān)鍵步驟,,它利用蛋白特異性抗體或某種翻譯后修飾的特異性抗體來(lái)富集目標(biāo)蛋白,,之后再用western blot或質(zhì)譜技術(shù)分析目標(biāo)蛋白。Western blot和質(zhì)譜技術(shù)均可用于蛋白質(zhì)翻譯后修飾的下游檢測(cè),,其中Western blot相對(duì)簡(jiǎn)單但依賴于特異性抗體且無(wú)法識(shí)別單個(gè)蛋白質(zhì)變化,,質(zhì)譜則可以檢測(cè)包括未知PTM在內(nèi)的幾乎所有的PTMs但成本更高需要專業(yè)知識(shí)來(lái)分析產(chǎn)生的大量數(shù)據(jù)。研究人員可以根據(jù)成本,、有無(wú)可用抗體,,以及有沒有目標(biāo)等選擇合適的方法進(jìn)行檢測(cè)。蛋白質(zhì)磷酸化修飾組學(xué)具有可靠性,。廣東琥珀?;揎椀鞍踪|(zhì)組學(xué)主要方式

自中而下的蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)可用于組蛋白修飾的分析。江蘇蛋白質(zhì)泛素化修飾組學(xué)質(zhì)譜鑒定

乙?;揎椀鞍踪|(zhì)組學(xué)分析:乙?;揎椀鞍踪|(zhì)組學(xué)分析是指從蛋白質(zhì)組學(xué)的水平分析蛋白質(zhì)乙酰化修飾,,包括乙?;鞍踪|(zhì)的鑒定和定量。提供基于質(zhì)譜的乙?;鞍捉M研究服務(wù),。蛋白質(zhì)乙酰化包括組蛋白乙?;头墙M蛋白乙?;=M蛋白乙?;饕琴嚢彼嵋阴,;言诨蜣D(zhuǎn)錄調(diào)控作用方面被普遍的研究。非組蛋白乙?;瘶?gòu)成了哺乳動(dòng)物細(xì)胞中乙?;鞍椎闹饕糠郑瑓⑴c了所有主要生物過(guò)程,,包括蛋白質(zhì)的定位,、轉(zhuǎn)移、功能和降解,,遺傳物質(zhì)的轉(zhuǎn)錄和復(fù)制等,。除了重要的生物學(xué)功能以外,乙?;鞍踪|(zhì)及其調(diào)控酶還與衰老和多種疾?。ㄈ缟窠?jīng)變形紊亂、心血管疾病等)緊密相關(guān),。因此,,對(duì)乙酰化修飾蛋白質(zhì)組進(jìn)行研究有助于進(jìn)一步探索細(xì)胞的生命活動(dòng)與了解相關(guān)疾病的發(fā)病機(jī)制,。江蘇蛋白質(zhì)泛素化修飾組學(xué)質(zhì)譜鑒定

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