翻譯后修飾蛋白組分析:蛋白質(zhì)翻譯后修飾是影響蛋白質(zhì)功能并調(diào)節(jié)整個細(xì)胞過程的重要方式,,幾乎在每個細(xì)胞過程中都是不可或缺的,。分析和鑒定翻譯后修飾蛋白質(zhì)對揭示蛋白質(zhì)的功能和深入了解各種生理現(xiàn)象具有重要意義。大多數(shù)翻譯后修飾蛋白以低化學(xué)計量和豐度存在,,這限制了在分析全細(xì)胞裂解液時對其的檢測,。蛋白質(zhì)是各種細(xì)胞功能比較重要的執(zhí)行者,其功能正常與否決定著生命活動能否有序,、高效的進(jìn)行,,而其中翻譯后修飾起著至關(guān)重要的作用。翻譯后修飾改變了蛋白質(zhì)中不同氨基酸殘基上的生物化學(xué)官能團(tuán),,進(jìn)而改變其化學(xué)性質(zhì)或結(jié)構(gòu),,使得蛋白質(zhì)具有更為復(fù)雜的結(jié)構(gòu)和更為完善的功能,實(shí)現(xiàn)更為精細(xì)的調(diào)節(jié),。蛋白質(zhì)的翻譯后修飾過程極其復(fù)雜,,已知的翻譯后修飾種類有20多種。但其中較為常見的主要是磷酸化,、泛素化,、SUMO化、酰(含乙酰)化,、甲基化以及糖基化,。蛋白翻譯后修飾方式的鑒定過程中,蛋白會首先被酶切成肽段,,然后進(jìn)入質(zhì)譜進(jìn)行分析。北京蛋白質(zhì)亞硝基化修飾組學(xué)分析價格
甲基化修飾蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)應(yīng)用領(lǐng)域:基礎(chǔ)醫(yī)學(xué),、臨床診斷:生物標(biāo)志物,,疾病機(jī)理機(jī)制,疾病分型,,個性化治理等,;生物醫(yī)藥:藥物作用機(jī)理,藥效評價,,藥物開發(fā)等,;農(nóng)林領(lǐng)域:抗逆脅迫機(jī)制,,生長發(fā)育機(jī)制,育種保護(hù)研究等,;畜牧業(yè):肉類及乳品質(zhì)研究,,致病機(jī)理研究等;微生物領(lǐng)域:致病機(jī)理,,耐藥機(jī)制,,病原體-宿主相互作用研究等;海洋水產(chǎn):漁業(yè)資源,,海水養(yǎng)殖,,漁業(yè)環(huán)境與水產(chǎn)品安全等。技術(shù)優(yōu)勢:采用抗體,,特異性高,;鑒定通量高, 一次可檢測高可達(dá)上千個甲基化修飾位點(diǎn),。貴陽磷酸化修飾蛋白質(zhì)組學(xué)鑒定蛋白質(zhì)的翻譯后修飾過程極其復(fù)雜,。
泛素化修飾蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)原理:盡管質(zhì)譜儀器的分析能力近年來有了長足的發(fā)展,但是由于蛋白翻譯后修飾化學(xué)計量值低,、復(fù)雜性大,,直接將蛋白組(如全細(xì)胞裂解產(chǎn)物,組織勻漿產(chǎn)物或全血清蛋白)的酶解肽段送入質(zhì)譜鑒定和定量PTM是非常困難的,。因此,,很多翻譯后修飾的富集方法會被采用,來提高樣品中PTM肽段的豐度和相對比例,,從而提高了質(zhì)譜對翻譯后修飾位點(diǎn)的鑒定效率,。研究發(fā)現(xiàn)在泛素化修飾的蛋白在tyrpsin的作用下都會產(chǎn)生diGly位點(diǎn)?;谶@一特異性,,利用針對蛋白質(zhì)翻譯后修飾(PTM)基序(motif)抗體,在肽段水平上免疫親和富集帶有泛素化修飾的肽段,,利用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)進(jìn)行定量分析,,能夠快速、準(zhǔn)確,、高通量地分析多種疾病相關(guān)信號通路關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)蛋白修飾的變化,,滿足創(chuàng)新性研究、生物標(biāo)志物鑒定,、藥物靶點(diǎn)篩選和評價的需求,。
蛋白質(zhì)翻譯后修飾介紹:蛋白質(zhì)翻譯后修飾(PTMs)是指蛋白質(zhì)在翻譯中或翻譯后的化學(xué)修飾過程。蛋白質(zhì)翻譯后修飾(PTMs)通過給蛋白質(zhì)添加磷酸酯,,乙酸酯,,酰胺基或甲基等官能團(tuán)增加蛋白質(zhì)組的功能多樣性,,并影響正常細(xì)胞生物學(xué)和發(fā)病機(jī)理的幾乎所有方面。蛋白質(zhì)翻譯后修飾在許多細(xì)胞過程中起著關(guān)鍵作用,,如細(xì)胞分化,、蛋白質(zhì)降解、信號傳導(dǎo)和調(diào)節(jié)過程,、基因表達(dá)調(diào)節(jié)以及蛋白質(zhì)相互作用,。蛋白質(zhì)翻譯后修飾PTMs通常包括磷酸化,糖基化,,泛素化,,亞硝基化,甲基化,,乙?;|(zhì)化和蛋白水解,。因此,,PTM的特征(包括修飾類別和修飾位點(diǎn))在細(xì)胞生物學(xué)以及疾病診斷和預(yù)防研究中至關(guān)重要。蛋白質(zhì)的翻譯后修飾調(diào)控著底物的酶活性,、功能以及三級結(jié)構(gòu)的變化,。
泛素化修飾蛋白組學(xué)研究:泛素化修飾蛋白組學(xué)是一種重要的翻譯后修飾。泛素-蛋白酶體系統(tǒng)介導(dǎo)了真核生物體內(nèi)80%~85%的蛋白質(zhì)降解,。此外,,泛素化修飾還可以直接影響蛋白質(zhì)的活性和定位,調(diào)控包括細(xì)胞周期,、細(xì)胞凋亡,、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、DNA 損傷修復(fù)以及免疫應(yīng)答等在內(nèi)的多種細(xì)胞活動,。由于翻譯后修飾的蛋白質(zhì)在生物樣本中含量低,、動態(tài)范圍廣,質(zhì)譜分析前需要對修飾進(jìn)行富集以提高其豐度,,然后利用傳統(tǒng)的定量蛋白組分析手段對富集得到的泛素化肽段樣品進(jìn)行定量分析,。泛素化修飾蛋白組學(xué)是一種重要的翻譯后修飾。南京泛素化修飾蛋白質(zhì)組學(xué)價格
蛋白質(zhì)翻譯后修飾組學(xué)的特征,,雖然具有挑戰(zhàn)性,,但提供了對病因?qū)W過程下的細(xì)胞功能的無價的洞察。北京蛋白質(zhì)亞硝基化修飾組學(xué)分析價格
蛋白質(zhì)翻譯后修飾組學(xué):翻譯后修飾(Post-translational modification, PTM)是指對翻譯后的蛋白質(zhì)進(jìn)行共價加工的過程,。它通過在一個或多個氨基酸殘基加上修飾基團(tuán),,可以改變蛋白質(zhì)的物理,、化學(xué)性質(zhì),,進(jìn)而影響蛋白質(zhì)的空間構(gòu)象和活性狀態(tài),、亞細(xì)胞定位、折疊及其穩(wěn)定性以及蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用,。蛋白質(zhì)翻譯后修飾的豐度變化在生命活動研究中具有重大意義,,異常的翻譯后修飾會導(dǎo)致多種疾病的發(fā)生。質(zhì)譜可以分辨蛋白質(zhì)修飾前和修飾后分子量上的變化,,因此只要知道靶蛋白翻譯后修飾前后分子量的變化,就能對翻譯后修飾方式進(jìn)行鑒定和定量,。北京蛋白質(zhì)亞硝基化修飾組學(xué)分析價格