定量磷酸化蛋白質(zhì)翻譯修飾組學(xué):蛋白質(zhì)發(fā)生磷酸化是重要的翻譯后修飾,,它與信號傳導(dǎo)、細(xì)胞周期,、生長發(fā)育機(jī)理等諸多生物學(xué)問題有密切關(guān)系,。研究蛋白質(zhì)磷酸化對闡明蛋白質(zhì)功能具有重要意義。將磷酸化肽段TiO2富集技術(shù)和iTRAQ/TMT/Lable free技術(shù)相結(jié)合,,實(shí)現(xiàn)對磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)的定量研究,。技術(shù)原理:在磷酸化肽段富集前先進(jìn)行 iTRAQ/TMT 標(biāo)記,然后通過 TiO2 富集方法獲得高純度的磷酸化肽段,,之后結(jié)合高分辨率質(zhì)譜完成對樣品的定量分析,。研究蛋白質(zhì)磷酸化對闡明蛋白質(zhì)功能具有重要意義。濟(jì)南棕櫚?;揎椀鞍踪|(zhì)組學(xué)技術(shù)服務(wù)
蛋白質(zhì)翻譯后修飾組學(xué)產(chǎn)品:常規(guī)的蛋白質(zhì)組學(xué)研究往往只關(guān)注不同生理,、病理?xiàng)l件下蛋白質(zhì)表達(dá)水平的變化。然而,,越來越多的研究發(fā)現(xiàn),,許多重要的生命活動、疾病發(fā)生不僅與蛋白質(zhì)的豐度相關(guān),,更重要的是被各類蛋白質(zhì)翻譯后修飾所調(diào)控,。因此深入研究蛋白質(zhì)翻譯后修飾對揭示生命活動的機(jī)理、篩選疾病的臨床標(biāo)志物,、鑒定藥物靶點(diǎn)等方面都具有重要意義,。由于翻譯后修飾的蛋白質(zhì)在生物樣本中含量低、動態(tài)范圍廣,,質(zhì)譜分析前需要對修飾進(jìn)行富集以提高其豐度,。杭州泛素化修飾蛋白質(zhì)組學(xué)目前,發(fā)現(xiàn)的比較常見的修飾類型是糖基化,、泛素化和磷酸化,。
翻譯后修飾蛋白組分析:蛋白質(zhì)翻譯后修飾是影響蛋白質(zhì)功能并調(diào)節(jié)整個(gè)細(xì)胞過程的重要方式,幾乎在每個(gè)細(xì)胞過程中都是不可或缺的,。分析和鑒定翻譯后修飾蛋白質(zhì)對揭示蛋白質(zhì)的功能和深入了解各種生理現(xiàn)象具有重要意義,。大多數(shù)翻譯后修飾蛋白以低化學(xué)計(jì)量和豐度存在,這限制了在分析全細(xì)胞裂解液時(shí)對其的檢測,。蛋白質(zhì)是各種細(xì)胞功能比較重要的執(zhí)行者,,其功能正常與否決定著生命活動能否有序、高效的進(jìn)行,,而其中翻譯后修飾起著至關(guān)重要的作用,。翻譯后修飾改變了蛋白質(zhì)中不同氨基酸殘基上的生物化學(xué)官能團(tuán),進(jìn)而改變其化學(xué)性質(zhì)或結(jié)構(gòu),,使得蛋白質(zhì)具有更為復(fù)雜的結(jié)構(gòu)和更為完善的功能,,實(shí)現(xiàn)更為精細(xì)的調(diào)節(jié)。蛋白質(zhì)的翻譯后修飾過程極其復(fù)雜,,已知的翻譯后修飾種類有20多種,。但其中較為常見的主要是磷酸化、泛素化,、SUMO化,、酰(含乙酰)化、甲基化以及糖基化,。
蛋白翻譯后修飾位點(diǎn)鑒定:蛋白質(zhì)翻譯后修飾(Post-Translational Modifications, PTMs)幾乎參與了細(xì)胞所有正常生命活動的過程,,并發(fā)揮十分重要的調(diào)控作用,。蛋白質(zhì)修飾位點(diǎn)能夠影響蛋白的多種屬性,包括蛋白質(zhì)折疊,、活性以及之后的功能,,對于蛋白質(zhì)修飾位點(diǎn)的發(fā)現(xiàn)及研究對闡明蛋白質(zhì)的功能具有重要作用。技術(shù)特點(diǎn):時(shí)間快,,周期短,;識別位點(diǎn)準(zhǔn)確,采用高分辨率質(zhì)譜技術(shù)可以準(zhǔn)確定位到發(fā)生修飾的氨基酸位點(diǎn),。適用范圍:已知蛋白序列,;明確翻譯后修飾的類型。蛋白質(zhì)的翻譯后修飾調(diào)控著底物的酶活性,、功能以及三級結(jié)構(gòu)的變化,。
乙酰化修飾蛋白組學(xué)應(yīng)用方向:1,、乙?;揎椗c細(xì)胞基因表達(dá)調(diào)控、表觀調(diào)控,、細(xì)胞凋亡,、細(xì)胞代謝、信號轉(zhuǎn)導(dǎo),、蛋白質(zhì)穩(wěn)定性等生理過程研究,。2、乙?;鸬拇x疾病,、代謝紊亂發(fā)生等疾病機(jī)理研究。乙?;飳W(xué)意義:1,、調(diào)節(jié)DNA-蛋白、蛋白-蛋白相互作用,;2,、與其他PTMs發(fā)生crosstalk;3,、調(diào)節(jié)酶活性,;4、調(diào)控蛋白亞細(xì)胞定位,。生物領(lǐng)域各個(gè)研究方面,,如:1、農(nóng)林領(lǐng)域:抗逆脅迫機(jī)制,,生長發(fā)育機(jī)制,,育種保護(hù)研究等,;2、 畜牧業(yè):肉類及乳品質(zhì)研究,,致病機(jī)理研究等,。通過蛋白質(zhì)翻譯后修飾也進(jìn)一步增加了細(xì)胞通路機(jī)制和生命活動的多樣性和復(fù)雜性。廣東蛋白質(zhì)甲基化修飾組學(xué)技術(shù)服務(wù)
蛋白質(zhì)翻譯后修飾幾乎參與了細(xì)胞所有正常生命活動的過程,。濟(jì)南棕櫚?;揎椀鞍踪|(zhì)組學(xué)技術(shù)服務(wù)
泛素化修飾蛋白質(zhì)組學(xué)介紹: 蛋白質(zhì)泛素化修飾(Ubiquitylation)是一種常見的蛋白質(zhì)翻譯后修飾,,是指一個(gè)或多個(gè)泛素分子(Ubiquitin,,由76個(gè)氨基酸組成的多肽)在一系列特殊的酶作用下,將細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)分類,,從中選出靶蛋白分子,,并對靶蛋白進(jìn)行特異性修飾的過程。泛素化修飾是一種重要的翻譯后修飾,,泛素-蛋白酶體系統(tǒng)介導(dǎo)了真核生物80%~85%的蛋白質(zhì)降解,。除參與蛋白質(zhì)降解之外,泛素化修飾還參與了細(xì)胞周期,、增殖,、細(xì)胞凋亡、分化,、轉(zhuǎn)錄調(diào)控,、基因表達(dá)、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié),、信號傳遞,、損傷修復(fù)、炎癥免疫等幾乎一切生命活動的調(diào)控,。濟(jì)南棕櫚?;揎椀鞍踪|(zhì)組學(xué)技術(shù)服務(wù)