蛋白質(zhì)乙酰化修飾組學(xué):乙?;揎検侵冈诿富蚍敲缸饔孟?,將乙酰CoA的乙酰基基團(tuán)轉(zhuǎn)移至蛋白質(zhì)氨基酸的殘基上,。蛋白質(zhì)乙?;彩且环N可逆的酶促反應(yīng)過(guò)程。乙?;D(zhuǎn)移酶可以將乙?;鶊F(tuán)(CH3C=O)從乙酰輔酶A轉(zhuǎn)移至蛋白質(zhì)。同理,去乙?;竸t可以逆轉(zhuǎn)這種反應(yīng),。蛋白質(zhì)上的賴氨酸乙酰化是細(xì)胞內(nèi)一種重要的PTMs過(guò)程,。不僅發(fā)生在細(xì)胞核內(nèi)組蛋白,、轉(zhuǎn)錄因子等上,在細(xì)胞質(zhì)和線粒體中也存在著諸多蛋白的乙?;揎?。在植物研究領(lǐng)域內(nèi),乙?;揎椫饕獏⑴c植物光合作用,、生長(zhǎng)發(fā)育、脅迫響應(yīng)等過(guò)程,。在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,,乙?;揎椏烧{(diào)節(jié)人體內(nèi)某種代謝酶,控制糖尿病,,這一發(fā)現(xiàn)為糖尿病干預(yù)與療理帶來(lái)新的希望,。蛋白質(zhì)的磷酸化修飾是生物體內(nèi)比較重要的共價(jià)修飾方式之一。浙江蛋白質(zhì)泛素化修飾組學(xué)鑒定
泛素化修飾蛋白質(zhì)組產(chǎn)品介紹:泛素化修飾(Ubiquitylation)是一種常見(jiàn)的蛋白質(zhì)翻譯后修飾,,是指一個(gè)或多個(gè)泛素分子(Ubiquitin,,由76個(gè)氨基酸組成的多肽)在一系列特殊的酶作用下,將細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)分類,,從中選出靶蛋白分子,,并對(duì)靶蛋白進(jìn)行特異性修飾的過(guò)程。 泛素化修飾是一種重要的翻譯后修飾,,泛素-蛋白酶體系統(tǒng)介導(dǎo)了真核生物80%~85%的蛋白質(zhì)降解,。除參與蛋白質(zhì)降解之外,泛素化修飾還參與了細(xì)胞周期,、增殖,、細(xì)胞凋亡、分化,、轉(zhuǎn)錄調(diào)控,、基因表達(dá)、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié),、信號(hào)傳遞,、損傷修復(fù)、炎癥免疫等幾乎一切生命活動(dòng)的調(diào)控,。泛素化,、心血管等疾病的發(fā)病密切相關(guān)。因此,,作為近年來(lái)生物化學(xué)研究的一個(gè)重大成果,,它已然成為研究、開(kāi)發(fā)新藥物的新靶點(diǎn),。廣東泛素化修飾蛋白質(zhì)組學(xué)質(zhì)譜鑒定在技術(shù)上,,研究翻譯后修飾蛋白的主要挑戰(zhàn)是開(kāi)發(fā)特異性的檢測(cè)和純化方法。
翻譯后修飾蛋白組分析:蛋白質(zhì)翻譯后修飾是影響蛋白質(zhì)功能并調(diào)節(jié)整個(gè)細(xì)胞過(guò)程的重要方式,,幾乎在每個(gè)細(xì)胞過(guò)程中都是不可或缺的,。分析和鑒定翻譯后修飾蛋白質(zhì)對(duì)揭示蛋白質(zhì)的功能和深入了解各種生理現(xiàn)象具有重要意義。大多數(shù)翻譯后修飾蛋白以低化學(xué)計(jì)量和豐度存在,,這限制了在分析全細(xì)胞裂解液時(shí)對(duì)其的檢測(cè),。蛋白質(zhì)是各種細(xì)胞功能比較重要的執(zhí)行者,其功能正常與否決定著生命活動(dòng)能否有序,、高效的進(jìn)行,,而其中翻譯后修飾起著至關(guān)重要的作用,。翻譯后修飾改變了蛋白質(zhì)中不同氨基酸殘基上的生物化學(xué)官能團(tuán),進(jìn)而改變其化學(xué)性質(zhì)或結(jié)構(gòu),,使得蛋白質(zhì)具有更為復(fù)雜的結(jié)構(gòu)和更為完善的功能,,實(shí)現(xiàn)更為精細(xì)的調(diào)節(jié)。蛋白質(zhì)的翻譯后修飾過(guò)程極其復(fù)雜,,已知的翻譯后修飾種類有20多種,。但其中較為常見(jiàn)的主要是磷酸化、泛素化,、SUMO化,、酰(含乙酰)化、甲基化以及糖基化,。
蛋白質(zhì)翻譯后修飾:蛋白質(zhì)翻譯后修飾 (Protein translational modifications,PTMs) 通過(guò)功能基團(tuán)或蛋白質(zhì)的共價(jià)添加,、調(diào)節(jié)亞基的蛋白水解切割或整個(gè)蛋白質(zhì)的降解來(lái)增加蛋白質(zhì)組的功能多樣性,。這些修飾包括磷酸化、糖基化,、泛素化,、亞硝基化、甲基化,、乙?;⒅|(zhì)化和蛋白水解,,幾乎影響正常細(xì)胞生物學(xué)和發(fā)病機(jī)制的所有方面,。因此,識(shí)別和理解 PTM 在細(xì)胞生物學(xué)和疾病療理和預(yù)防的研究中至關(guān)重要,。蛋白質(zhì)翻譯后修飾 (PTMs) 進(jìn)一步促進(jìn)了從基因組水平到蛋白質(zhì)組復(fù)雜性的增加,。PTMs 是一種化學(xué)修飾,在功能蛋白質(zhì)組中發(fā)揮關(guān)鍵作用,,因?yàn)樗鼈冋{(diào)節(jié)活性,、定位以及與其他細(xì)胞分子(如蛋白質(zhì)、核酸,、脂質(zhì)和輔助因子)的相互作用,。磷酸化修飾蛋白質(zhì)組的研究主要集中于真核生物中普遍存在的絲氨酸、蘇氨酸和酪氨酸的磷酸化,。
甲基化修飾蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)原理:目前用于甲基化蛋白質(zhì)組分析的甲基化肽段富集抗體分為精氨酸甲基化(Me-R)抗體和賴氨酸甲基化(Me-K)抗體兩大類,。根據(jù)氨基酸殘基上所含甲基化修飾基團(tuán)數(shù)量的不同,精氨酸甲基化(Me-R)抗體又包括:?jiǎn)渭谆彼幔∕MA)抗體,、非對(duì)稱二甲基化精氨酸(ADMA)抗體和對(duì)稱二甲基化精氨酸(SDMA)抗體,;賴氨酸甲基化(Me-K)抗體又包括:賴氨酸單甲基化(K-Me)抗體,、賴氨酸二甲基化(K-2Me)抗體和賴氨酸三甲基化(K-3Me)抗體。其中,,Me-R的各類抗體需要單獨(dú)使用,,而Me-K抗體可以混合使用。研究蛋白質(zhì)磷酸化對(duì)闡明蛋白質(zhì)功能具有重要意義,。蛋白質(zhì)甲基化修飾組學(xué)類型
蛋白質(zhì)翻譯后修飾(PTMs)是指蛋白質(zhì)在翻譯中或翻譯后的化學(xué)修飾過(guò)程,。浙江蛋白質(zhì)泛素化修飾組學(xué)鑒定
琥珀酰化修飾蛋白質(zhì)組技術(shù)特點(diǎn):采用主流抗體親和富集方法,,特異性高,,富集效率好;通過(guò)高分辨率,、高掃描速度的質(zhì)譜,,對(duì)富集的琥珀酰化肽段進(jìn)行大規(guī)模鑒定,;結(jié)合常用的定量技術(shù)可對(duì)不同樣品間的琥珀?;讲町愡M(jìn)行定量比較。適用范圍:藥物作用靶點(diǎn)研究,;疾病標(biāo)志物篩選,;植物脅迫/抗逆研究;作用機(jī)制研究,;要求物種具有蛋白質(zhì)參考數(shù)據(jù)庫(kù),、EST序列(轉(zhuǎn)錄組)或基因組注釋信息。應(yīng)用方向:線粒體代謝,、生物合成與代謝,、中心代謝途徑、炎癥與疾病,。浙江蛋白質(zhì)泛素化修飾組學(xué)鑒定