轉(zhuǎn)錄組學(xué)技術(shù):轉(zhuǎn)錄組學(xué)(transcriptomics),,是一門在整體水平上研究細(xì)胞中基因轉(zhuǎn)錄的情況及轉(zhuǎn)錄調(diào)控規(guī)律的學(xué)科。簡(jiǎn)而言之,,轉(zhuǎn)錄組學(xué)是從RNA水平研究基因表達(dá)的情況,。轉(zhuǎn)錄組即一個(gè)活細(xì)胞所能轉(zhuǎn)錄出來(lái)的所有RNA的總和,,是研究細(xì)胞表型和功能的一個(gè)重要手段,。優(yōu)勢(shì):高通量,、更精確的數(shù)字信號(hào),;在單核苷酸水平對(duì)任意物種的整體轉(zhuǎn)錄活動(dòng)進(jìn)行檢測(cè),;分析轉(zhuǎn)錄本的結(jié)構(gòu)和表達(dá)水平的同時(shí),,還能發(fā)現(xiàn)未知轉(zhuǎn)錄本和稀有轉(zhuǎn)錄本;準(zhǔn)確地識(shí)別可變剪切和融合基因,。應(yīng)用方向:植物生長(zhǎng)機(jī)制的發(fā)現(xiàn)及干預(yù),;炎癥發(fā)生機(jī)制的發(fā)現(xiàn)及干預(yù);表達(dá)差異的研究,;基因點(diǎn)突變及多態(tài)性檢測(cè),。轉(zhuǎn)錄組學(xué)可應(yīng)用于植物生長(zhǎng)機(jī)制的發(fā)現(xiàn)及干預(yù)。廣州RNA轉(zhuǎn)錄組學(xué)定性分析
轉(zhuǎn)錄組學(xué)測(cè)序類型:1.根據(jù)RNA種類:可以分為mRNA測(cè)序,,SmallRNA測(cè)序,,LncRNA測(cè)序、CircRNA測(cè)序,、全轉(zhuǎn)錄組測(cè)序等,。2.根據(jù)物種特點(diǎn):比如真核生物或者原核生物,是否有參考基因組,,測(cè)序平臺(tái)的不同,,分為真核有參和無(wú)參轉(zhuǎn)錄組測(cè)序,原核轉(zhuǎn)錄組測(cè)序,,全長(zhǎng)轉(zhuǎn)錄組測(cè)序等,。3.根據(jù)相互關(guān)系:分為互作轉(zhuǎn)錄組,比較轉(zhuǎn)錄組等等,;此外,,基因組甲基化會(huì)影響到基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控,也屬于轉(zhuǎn)錄調(diào)控測(cè)序范疇,;還有用于研究轉(zhuǎn)錄因子與DNA的交互作用或組蛋白修飾在基因組上的分布的ChIP-Seq,,研究RNA與蛋白互作關(guān)系的RIP-Seq,以及研究RNA甲基化的MeRIP-Seq等,。杭州轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析價(jià)格轉(zhuǎn)錄組學(xué)可以直接測(cè)定每個(gè)轉(zhuǎn)錄本單核苷酸分辨率的準(zhǔn)確度,。
什么叫轉(zhuǎn)錄組學(xué)?廣義轉(zhuǎn)錄組是指生命單元(通常是一種細(xì)胞)中所有按基因信息單元轉(zhuǎn)錄和加工的RNA分子(包括編碼和非編碼RNA功能單元),或者是一個(gè)特定細(xì)胞所有轉(zhuǎn)錄本的總和.它的研究對(duì)象就是這些RNA與蛋白質(zhì)分子和它們所組成的基因功能網(wǎng)絡(luò)以及它們與細(xì)胞功能的關(guān)系.而狹義轉(zhuǎn)錄組是指可直接參與翻譯蛋白質(zhì)的mRNA總和.研究生物細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄組的發(fā)生和變化規(guī)律的科學(xué)就稱為轉(zhuǎn)錄組學(xué)(tran—scriptomics),。轉(zhuǎn)錄組學(xué)即特定細(xì)胞在某一功能狀態(tài)下轉(zhuǎn)錄出來(lái)的所有RNA的總和,,包括mRNA和非編碼RNA。
轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究的方法:在早期,,由于測(cè)序價(jià)格昂貴,、基因序列數(shù)目有限,,轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究者只能進(jìn)行極少數(shù)特定基因的結(jié)構(gòu)功能分析和表達(dá)研究。近十幾年,,分子生物學(xué)技術(shù)的快速發(fā)展使高通量分析成為可能,,這為真正意義上的轉(zhuǎn)錄組學(xué)的研究奠定了基礎(chǔ)。這些高通量研究方法主要可以分為兩類:一類是基于這類方法包括表達(dá)序列標(biāo)簽技術(shù),、基因表達(dá)系列分析技術(shù),、大規(guī)模平行測(cè)序技術(shù)、RNA測(cè)序技術(shù)其中,,Microarray和EST技術(shù)是較早發(fā)展起來(lái)的先驅(qū)技術(shù),,SAGE、MPSS和RNA-sea是高通量測(cè)序條件下的轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究方法轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究有助于了解特定生命過(guò)程中相關(guān)基因的整體表達(dá)情況,,進(jìn)而從轉(zhuǎn)錄水平初步揭示該生命過(guò)程的代謝網(wǎng)絡(luò)及其調(diào)控機(jī)理,。轉(zhuǎn)錄組學(xué)能準(zhǔn)確地識(shí)別可變剪切位點(diǎn)及cSNP,UTR區(qū)域,。
轉(zhuǎn)錄組學(xué)測(cè)序比其他研究方法有哪些優(yōu)勢(shì)?轉(zhuǎn)錄組學(xué)測(cè)序具有以下優(yōu)勢(shì):(1)可以直接測(cè)定每個(gè)轉(zhuǎn)錄本片段序列,、單核苷酸分辨率的準(zhǔn)確度,同時(shí)不存在傳統(tǒng)微陣列雜交的熒光模擬信號(hào)帶來(lái)的交叉反應(yīng)和背景噪音問(wèn)題,;(2)靈敏度高,,可以檢測(cè)細(xì)胞中少至幾個(gè)拷貝的稀有轉(zhuǎn)錄本;(3)可以對(duì)任意物種進(jìn)行全基因組分析,,無(wú)需預(yù)先設(shè)計(jì)特異性探針,,因此無(wú)需了解物種基因信息,能夠直接對(duì)任何物種進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組分析,,同時(shí)能夠檢測(cè)未知基因,,發(fā)現(xiàn)新的轉(zhuǎn)錄本,并準(zhǔn)確地識(shí)別可變剪切位點(diǎn)及cSNP,,UTR區(qū)域,。(4)檢測(cè)范圍廣,高于6個(gè)數(shù)量級(jí)的動(dòng)態(tài)檢測(cè)范圍,,能夠同時(shí)鑒定和定量稀有轉(zhuǎn)錄本和正常轉(zhuǎn)錄本,。轉(zhuǎn)錄組學(xué)是從RNA水平研究基因表達(dá)的情況。江蘇IncRNA轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析方法
轉(zhuǎn)錄組學(xué)測(cè)序有什么樣的樣品要求,?廣州RNA轉(zhuǎn)錄組學(xué)定性分析
轉(zhuǎn)錄組是特定發(fā)育階段或生理?xiàng)l件下細(xì)胞內(nèi)的完整轉(zhuǎn)錄信息的匯合,,表示了基因表達(dá)的中間狀態(tài)。轉(zhuǎn)錄組測(cè)序可以對(duì)所有轉(zhuǎn)錄物進(jìn)行分類,、確定基因的轉(zhuǎn)錄結(jié)構(gòu),、量化轉(zhuǎn)錄物的表達(dá)水平。蛋白質(zhì)是生命功能的直接執(zhí)行者,,蛋白組是一種細(xì)胞乃至一種生物所表達(dá)的全部蛋白質(zhì),。整合轉(zhuǎn)錄組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)的表達(dá)數(shù)據(jù)對(duì)生物樣本進(jìn)行研究,,可以從整體上解釋生物學(xué)問(wèn)題,探究生物體生理和疾病機(jī)理等,。轉(zhuǎn)錄組學(xué)應(yīng)用于胃腸瘤發(fā)生機(jī)制研究:利用轉(zhuǎn)錄組學(xué)可檢測(cè)瘤細(xì)胞惡化過(guò)程中的RNA(編碼RNA及非編碼RNA)的變化,,有助于更好地理解胃腸瘤的發(fā)生機(jī)制。廣州RNA轉(zhuǎn)錄組學(xué)定性分析
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