熒光素標記抗體的方法：方法及步驟：①抗體的準備：取適量已知球蛋白濃度之溶液,，置入三角燒瓶中，加入生理鹽水及碳酸鹽緩沖液,，使然后蛋白濃度為20mg/ml,，緩沖液容量為總量的1/10，混勻,，將三角燒瓶置冰槽中,，電磁攪拌（速度適當以不起泡沫為宜）5～10min。②熒光素的準備：根據(jù)欲標記的蛋白質總量,，按每毫克蛋白加0.01mg熒光素,，用分析天平準確稱所取所需的異硫氰酸熒光素粉末。③結合（或稱標記）：邊攪拌邊將稱取的熒光色素漸漸加入球蛋白溶液中,，避免將熒光素粘于三角燒瓶壁或攪拌玻棒上（大約5～10min內加完）,，加畢后，繼續(xù)攪拌12～18h,。結合期間應保持蛋白溶液于4℃左右,，故須及時添冰去水；亦可將結合裝置安放在4℃冰箱或冰庫中,。熒光抗體技術可用于檢測和定位各種抗原,，也可以用于檢測和定位抗體。多重免疫組化

細胞免疫熒光實驗注意事項：非特異性染色：是否滅活內源性過氧化物酶,；孵育過程中干片,；抗原熱修復過度。染色過深：一抗?jié)舛冗^高,；染色試濃度過高或孵育時間過長,；染色劑濃度過高或孵育時間過長,。通常實驗室先固定細胞再進行通透，但若檢測抗原是水不溶性蛋白,，可先通透再固定,，這樣可以通過通透去除一些水溶性蛋白，進而可降低免疫熒光背景和非特異性信號,；建議設陰性對照組,，消除由于抗體非特異性結合而產生的背景染色；選擇醛類固定液時,，保持其新鮮度,，較好現(xiàn)配現(xiàn)用，使用不新鮮的醛類固定液自發(fā)熒光背景會升高,。多重免疫組化熒光抗體技術可以用于檢測和定位細胞或組織中的特定抗原物質,。

免疫熒光固定（防止離體組織自溶抗原擴散），固定液包括：有機溶劑（甲醇,、乙醇等）,；交聯(lián)劑（4%PFA、10%中性福爾馬林）,，固定液的選擇取決于被研究抗原的性質及所用抗體的特性,，不過，目前甲醛用的還是較多的,，但針對磷酸化的抗體,，不適合用甲醛，會導致磷酸蛋白從膜表面轉移到胞漿中,，故應選擇冰冷的無水甲醇或無水乙醇,，同時應注意甲醛會揮發(fā)，在4-8°C不宜儲存太久,。固定時間：取決于組合塊的大小和類型,，對于大多數(shù)組織，18-24h較為理想,，細胞固定時間較短,，一般2%的甲醛室溫固定20min即可。以細胞樣品為例：用4%的多聚甲醛固定爬片15min,，PBS浸洗玻片3次,，每次3min。

免疫熒光應用范圍：其應用范圍極其普遍,，可以測定內分泌,、蛋白質、多肽,、核酸,、神經遞質、受體,、細胞因子,、細胞表面抗原、肉瘤標志物,、血藥濃度等各種生物活性物質,。根據(jù)診斷類別，又可分為傳染性疾病,、內分泌,、藥物檢測、免疫學,、血型鑒定等,。許多物質都可產生熒光現(xiàn)象，但并非都可用作熒光色素,。只有那些能產生明顯的熒光并能作為染料使用的有機化合物才能稱為免疫熒光色素或熒光染料,。異硫氰酸熒光素為黃色或橙黃色結晶粉末，易溶于水或酒精等溶劑,。分子量為389.4,，較大吸收光波長為490495nm，較大發(fā)射光波長520530nm,，呈現(xiàn)明亮的黃綠色熒光,。免疫熒光技術可以用于研究病毒傳播和免疫應答。

通過不同顏色熒光標記不同的靶標,，可以直觀的觀察同一樣品細胞內不同結構和蛋白,。熒光標記靶標的方法主要包括熒光染料、免疫標記,、熒光融合蛋白等——這幾種方法均可選擇性標記細胞內的結構和蛋白,，讓您在成像時更輕松地進行觀察。細胞生物學采用的很多熒光工具基本上都是熒光基團,。這些熒光基團經過不同的方法修飾或結合到不同的分子上,，從而具備了某些的功能與特定的細胞器或蛋白結合。通過化學修飾,，單個熒光基團可以產生許多變體形式,，且每種變體都有不同的特異性。免疫熒光技術可以用于研究神經系統(tǒng)的功能和疾病,。多重免疫組化

免疫熒光技術可以用于研究環(huán)境污染和毒物作用,。多重免疫組化

細胞免疫熒光步驟對大家來說一定是很陌生的，他是一種抗原抗體反應，好像對我們來說他顯得很遙遠的樣子,，因為我們并不了解他能做什么,，通過這種技術可以讓我們對抗原或抗體的性質、定位一次來分析出更多的數(shù)據(jù),。細胞免疫熒光,，這對很多人來說都是一次聽說這個東西，也不知道他對我們會有什么好處與壞處,，科學研究就是這樣子的,，普通老百姓是不會明白其中的道理的，但是這些研究也是確實的在我們的生活中取得了成果,，能夠讓大家過的更加舒適,。多重免疫組化

上海睿寶和生物科技有限公司辦公設施齊全，辦公環(huán)境優(yōu)越,，為員工打造良好的辦公環(huán)境,。在睿寶和生物近多年發(fā)展歷史，公司旗下現(xiàn)有品牌睿寶和等,。我公司擁有強大的技術實力,，多年來一直專注于從事生物技術領域內的技術開發(fā) 、 技術服務 ,， 醫(yī)療器械的研發(fā) ,、 銷售及技術服務、技術咨詢,， 翻譯服務,， 會 議會展服務， 實驗室試劑及實驗室試劑盒和耗材的研發(fā),、 生產,、 銷售。的發(fā)展和創(chuàng)新,，打造高指標產品和服務,。自公司成立以來，一直秉承“以質量求生存,，以信譽求發(fā)展”的經營理念,，始終堅持以客戶的需求和滿意為重點，為客戶提供良好的病理檢測服務,，免疫組化檢測服務,，分子檢測服務，全景掃描服務,，從而使公司不斷發(fā)展壯大,。