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在近紅外二區(qū)的應(yīng)用潛力動(dòng)態(tài)成像:通過(guò)擴(kuò)展π共軛和增強(qiáng)分子內(nèi)電荷轉(zhuǎn)移效應(yīng),,開(kāi)發(fā)了一系列新的基于氧雜蒽的近紅外二區(qū)染料,,如VIXs,。其中,,VIX-4具有在1210nm的熒光發(fā)射和高亮度,可用于動(dòng)態(tài)成像小鼠的血液循環(huán),,具有高時(shí)空分辨率,,能夠區(qū)分動(dòng)脈和靜脈,,并測(cè)量血流體積22,。***成像研究:設(shè)計(jì)構(gòu)建了若干基于氧雜蒽骨架的近紅外二區(qū)熒光團(tuán)(命名為VIX),,開(kāi)展了其在***成像中的應(yīng)用研究。例如,,探針VIX-S在水和固體形式都能發(fā)出近紅外二區(qū)熒光(約1057nm),,且展現(xiàn)了較好的抗淬滅效果、化學(xué)穩(wěn)定性和光穩(wěn)定性,,成為推薦的生物成像探針,。基于探針VIX-S的小鼠***成像研究表明,,該探針具有特異性地在脾臟中積累的特點(diǎn),,能夠?qū)?**小鼠的脾臟進(jìn)行成像,為動(dòng)物***的脾臟研究提供新的工具25。綜上所述,,新型近紅外氧雜蒽熒光染料在細(xì)胞熒光成像中具有避免生物組織自發(fā)熒光干擾,、良好的細(xì)胞靶向熒光標(biāo)記效果,、用于特定細(xì)胞和疾病的檢測(cè)與成像,、支持超分辨率成像以及在近紅外二區(qū)的應(yīng)用潛力等廣闊的應(yīng)用前景。將近紅外熒光染料用于細(xì)胞成像,,觀察其在細(xì)胞內(nèi)的穩(wěn)定性,。中國(guó)臺(tái)灣熒光染料脂質(zhì)
特異性結(jié)合:生物標(biāo)志物靶向熒光探針是克服早期**檢測(cè)困難的關(guān)鍵。例如,,設(shè)計(jì)合成的雙光子熒光探針(NP-C6-CXB)用于檢測(cè)環(huán)氧合酶-2(COX-2)生物標(biāo)志物,。該熒光探針以萘酰亞胺為熒光基團(tuán),塞來(lái)昔布為靶向基團(tuán),,在COX-2存在時(shí),,在溶液和*細(xì)胞中發(fā)出明亮的熒光,并且表現(xiàn)出很好的選擇性,。其熒光強(qiáng)度與*細(xì)胞中COX-2酶的含量成正比,,為COX-2酶表達(dá)的**識(shí)別和切除提供了可視化工具29?;谌麃?lái)昔布和苯并吩噁嗪的近紅外發(fā)射(700nm)熒光探針(NB-C6-CCB),,用于檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)高爾基體中COX-2酶。在COX-2高表達(dá)的腫瘤細(xì)胞或組織中,,該探針發(fā)射出近紅外熒光29,。納米載體的作用:聚合物納米載體(膠囊、膠束和二氧化硅納米顆粒)可作為熒光探針的載體,,將熒光染料的“智能”特征整合到合成材料中,。結(jié)合在pH值或光照射發(fā)生變化時(shí)會(huì)裂解的生物反應(yīng)性成分,是成功設(shè)計(jì)此類載體的基礎(chǔ),,這種載體具有在目標(biāo)部位特異性加載和釋放***劑的能力8,。例如,從柿子果實(shí)中制備的高熒光氮摻雜碳點(diǎn)(PCDs),,通過(guò)1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺耦合反應(yīng),,將***藥物阿霉素和吉西他濱固定在PCDs表面,形成PCDs@Dox和PCDs@Gem納米雜化物,,用于生物成像和caspase誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡應(yīng)用30,。外泌體熒光染料luc合成了一系列含不同胺基取代的磷氧化物橋連羅丹明(P-rhodamines)染料。
動(dòng)物成像技術(shù)不僅在醫(yī)學(xué)研究中具有重要應(yīng)用,,還可以拓展到其他領(lǐng)域,。例如,在動(dòng)物生產(chǎn)中,紅外熱成像(IRT)技術(shù)作為一種方便,、高效,、非接觸式的溫度測(cè)量技術(shù),已經(jīng)廣泛應(yīng)用于監(jiān)測(cè)動(dòng)物表面和**解剖區(qū)域的溫度,、診斷早期疾病和炎癥,、監(jiān)測(cè)動(dòng)物應(yīng)激水平、識(shí)別發(fā)情和排卵以及診斷懷孕和動(dòng)物福利等方面11,。未來(lái),,隨著技術(shù)的不斷發(fā)展,IRT技術(shù)可能會(huì)在動(dòng)物生產(chǎn)中發(fā)揮更大的作用,。在大動(dòng)物皮層神經(jīng)元在體成像研究中,,新興技術(shù)如磁共振成像(MRI)、電生理方法和光學(xué)成像的應(yīng)用,,提高了神經(jīng)元成像的分辨率和深度,,還能夠?qū)崟r(shí)跟蹤神經(jīng)元活動(dòng)17。這為理解大腦功能和神經(jīng)系統(tǒng)疾病提供了新的途徑,,也為動(dòng)物成像技術(shù)在神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用拓展了新的方向,。綜上所述,動(dòng)物成像技術(shù)在未來(lái)具有多方面的潛在發(fā)展方向,,包括提高空間分辨率和靈敏度,、多模態(tài)融合成像、實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)成像,、標(biāo)準(zhǔn)化和質(zhì)量控制以及拓展應(yīng)用領(lǐng)域等,。這些發(fā)展方向?qū)閯?dòng)物研究和醫(yī)學(xué)研究提供更強(qiáng)大的工具,推動(dòng)生命科學(xué)的發(fā)展,。
分散熒光染料:分散熒光桃紅BG染料色漿離心50min后的比吸光度仍達(dá)到78.1%,,離心穩(wěn)定性較好。在55℃條件下放置5d后分散熒光染料色漿的粒徑有所增加,,其中分散熒光桃紅BG染料色漿粒徑的增加率*為7.5%,,染料色漿熱穩(wěn)定性能較好;加熱處理過(guò)后分散熒光染料色漿的熒光強(qiáng)度有所降低11,。這表明分散熒光染料的穩(wěn)定性在一定時(shí)間和溫度范圍內(nèi)能夠保持較好,,但隨著時(shí)間的延長(zhǎng)和條件的變化,其穩(wěn)定性會(huì)逐漸下降,。在動(dòng)物成像中,,這可能會(huì)限制成像的時(shí)間窗口,影響對(duì)動(dòng)物體內(nèi)動(dòng)態(tài)過(guò)程的長(zhǎng)期觀察,。近紅外熒光染料:近紅外熒光染料的穩(wěn)定性差異會(huì)直接影響成像的持久性,。光穩(wěn)定性高的近紅外熒光染料能夠在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)保持較強(qiáng)的熒光信號(hào),,為動(dòng)物成像提供更持久的觀察窗口。例如,,Hc-BIZ的光穩(wěn)定性遠(yuǎn)高于Hc-BTZ,,這意味著在動(dòng)物成像中,使用Hc-BIZ可能會(huì)獲得更持久的成像效果,,有利于對(duì)動(dòng)物體內(nèi)的長(zhǎng)期監(jiān)測(cè)和研究12,。動(dòng)物成像技術(shù)不僅在醫(yī)學(xué)研究中具有重要應(yīng)用,還可以拓展到其他領(lǐng)域,。
標(biāo)記神經(jīng)元:在動(dòng)物體內(nèi),,特定的熒光染料可以穩(wěn)定且持久地標(biāo)記皮質(zhì)脊髓神經(jīng)元,用于病理生理學(xué)研究和切片膜片鉗研究,。如將Fluoro-Red和Fluoro-Green注入麻醉新生大鼠的頸脊髓,固定的腦切片顯示出離散的內(nèi)部皮質(zhì)層中細(xì)長(zhǎng)或金字塔形細(xì)胞輪廓中的***熒光,,與V層錐體細(xì)胞一致,,并且標(biāo)記的神經(jīng)元使用切片膜片鉗方法顯示出自發(fā)突觸活動(dòng)4。用于細(xì)菌成像:有機(jī)熒光染料可用于大腸桿菌的超分辨率成像實(shí)驗(yàn),。通過(guò)分光光度計(jì)測(cè)定大腸桿菌的生長(zhǎng)曲線,,以及將大腸桿菌與有機(jī)熒光染料尼羅紅共孵育,在超分辨率顯微鏡下實(shí)現(xiàn)了大腸桿菌細(xì)胞壁的熒光標(biāo)記,。這一實(shí)驗(yàn)既結(jié)合了生物化學(xué)和分析化學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn)及儀器的原理和操作,,也有利于學(xué)生深入了解新型的細(xì)菌熒光標(biāo)記技術(shù)6。近紅外熒光壽命成像:近紅外(NIR)染料在小動(dòng)物成像和漫射光學(xué)斷層掃描中用作熒光標(biāo)記,。通過(guò)三種方式將現(xiàn)有的共聚焦和多光子激光掃描顯微鏡(LSM)與時(shí)間相關(guān)單光子計(jì)數(shù)(TCSPC)熒光壽命成像(FLIM)系統(tǒng)相適應(yīng),,用于近紅外FLIM。測(cè)試的許多近紅外染料在生物組織中顯示出明顯的壽命變化,,取決于它們所結(jié)合的組織結(jié)構(gòu),,因此近紅外FLIM可以提供有關(guān)組織組成和局部生化參數(shù)的補(bǔ)充信息7。不同類型熒光染料的穩(wěn)定性直接關(guān)系到成像質(zhì)量,。黑龍江光敏劑熒光染料
些噁嗪衍生物熒光染料在動(dòng)物的臂叢神經(jīng)和坐骨神經(jīng)中顯示出高特異性神經(jīng)靶向信號(hào),。中國(guó)臺(tái)灣熒光染料脂質(zhì)
熒光染料具有獨(dú)特的光學(xué)特性,能夠在特定波長(zhǎng)的激發(fā)光下發(fā)出特定波長(zhǎng)的熒光,。根據(jù)其化學(xué)結(jié)構(gòu)和性質(zhì),,可分為以下幾類:有機(jī)熒光染料:萘酰亞胺、苯并吩嗯嗪和苯并吩噻嗪類染料:這類染料具有優(yōu)異的光化學(xué),、物理特性和高的熒光量子產(chǎn)率,,在生物領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用,包括生物成像和光動(dòng)力***29,。羅丹明染料:具有良好的光學(xué)物理性質(zhì),,自誕生以來(lái)就被廣泛應(yīng)用于生物技術(shù)中作為熒光標(biāo)記物或用于生物分子的檢測(cè),。其分子設(shè)計(jì)中具有疾病***功能(如**和細(xì)菌***)的羅丹明衍生物近年來(lái)引起了越來(lái)越多的研究關(guān)注33。氟硼熒光染料(BODIPYdyes):是傳統(tǒng)的有機(jī)小分子染料,,具有易于改性的結(jié)構(gòu)和可調(diào)節(jié)的光物理性質(zhì),。經(jīng)過(guò)合理設(shè)計(jì)的BODIPY能通過(guò)多種方式制備成可用于**光學(xué)成像和光學(xué)***的納米粒子37。碳點(diǎn)納米組裝體:生態(tài)友好且高熒光的碳點(diǎn)納米組裝體因其多樣化的生物應(yīng)用而備受關(guān)注,,尤其在對(duì)抗環(huán)境和人類健康問(wèn)題方面,。例如,從柿子果實(shí)中制備的高熒光氮摻雜碳點(diǎn)(PCDs),,通過(guò)一步水熱反應(yīng)無(wú)需任何溶劑制備而成,,具有良好的水溶性和生物相容性,可用于生物成像和***活性篩選30,。中國(guó)臺(tái)灣熒光染料脂質(zhì)