緩沖溶液是許多生化反應(yīng)、生產(chǎn),、實驗過程中的重要溶液，對穩(wěn)定溶液的酸堿度有重要的影響,。本文以**常見的幾種緩沖體系——磷酸鹽緩沖溶液,、硼酸鹽緩沖溶液、三羥甲基氨基甲烷（簡稱Tris）-HCl緩沖溶液,、羥乙基哌嗪乙磺酸（供注射用）（簡稱HEPES）緩沖溶液為例,，介紹緩沖溶液的組成、緩沖原理及其在生物化學(xué)方面的應(yīng)用,。HEPES緩沖溶液具有對細(xì)胞無毒性,、不易穿過生物膜、不參與細(xì)胞內(nèi)生化過程等特點,，所以在生化實驗中具有***的應(yīng)用,，如可用于開放式細(xì)胞生長、細(xì)胞的長期觀察,、RNA或DNA提取試劑盒中,。其次，相關(guān)研究表明以HEPES溶液做緩沖液有利于多肽在金納米粒子表面的偶聯(lián)反應(yīng),。另外,，HEPES緩沖溶液對鎂生物降解影響的相關(guān)實驗表明，HEPES能提高鎂的生物降解性以及抑制鎂不溶鹽層的形成,。AVT長期穩(wěn)定供應(yīng)注射級海藻糖,、蔗糖、TRIS/TRIS-HCl,、HEPES等生物保護(hù)劑與緩沖鹽,。重慶備案登記號HEPES大批量采購

Tris-HCl緩沖液缺點：1,、溫度效應(yīng)大，如4℃時pH=8.4,，37℃時pH=7.42,、pH值受溶液濃度影響較大，稀釋十倍,，pH值的變化大于0.1,；3、對某些pH電極發(fā)生一定的干擾作用,，所以要使用與Tris溶液具有兼容性的電極,。4、易吸收空氣中的CO2,，所以配制的緩沖液要蓋嚴(yán)密封,。HEPES緩沖液HEPES是一種非離子兩性緩沖液，其在pH7.2~7.4范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力,，常用在生化診斷試劑盒,、DNA/RNA提取試劑盒及PCR診斷試劑盒里。HEPES緩沖液優(yōu)點：pKa值介于6.0和8.0之間,；在水中具有高溶解度,；具有膜不透性，不易穿透生物膜,；對生化反應(yīng)影響有限,，可耐化學(xué)和酶解作用，且不與金屬離子生成復(fù)合物或沉淀,；有極低的可見光和紫外光吸收,；離子濃度、溶液組成和溫度對解離的影響小;HEPES緩沖液缺點：如果將HEPES水溶液暴露于環(huán)境光下三小時,，會產(chǎn)生細(xì)胞毒性的H2O2,；HEPES水溶液必須遠(yuǎn)離光線以免影響實驗結(jié)果；而配置成溶劑后,，要在4℃下保存,，建議在短期內(nèi)使用效果更佳；HEPES粉末放置的時候一般放于干燥的室內(nèi),，不能直接長時間照射陽光,。廣西藥用HEPES大批量采購國內(nèi)艾偉拓注射用HEPES已登記。

關(guān)于HEPES緩沖溶液的配制,，不同的文獻(xiàn)資料有不同的說法,。根據(jù)用途，一種是單純的HEPES+NaOH,，另一種是HEPES+鹽,。各種配制方法總結(jié)如下：一,、500ml1MHEPES,pH=7.0Stocksolution的配制119.15gHEPES溶解在400ml蒸餾水中，加0.5~1M的NaOH水溶液調(diào)節(jié)至少所需pH(HEPES的有效pH范圍是6.8~8.2),，然后用蒸餾水定容至500ml,，于4攝氏度保存。二,、加少量鹽的HEPESBuffer配方(500ml)HEPES6.5g,、NaCl8.0g、Na2HPO4.7H2O0.198g,、用0.5MNaOH水溶液調(diào)節(jié)pH值,，***定容。三,、2×HEPES緩沖鹽溶液的配制將1.6gNaCl,、0.074gKCl、0.027gNa2HPO4.2H2O,、0.2g葡聚糖(glucanordextran)和1gHEPES溶解在90ml的蒸餾水,，用0.5MNaOH調(diào)節(jié)至所需pH值，再用蒸餾水定容至100ml即可,。

HEPES緩沖溶液的制備方法：一.500ml1MHEPES,，pH=7.0Stocksolution的制備將19.15ghepes溶解在400ml蒸餾水中，加入0.5~1M的NaOH水溶液,，調(diào)整至至少所需的pH(HePeS的有效ph范圍為6.8~8.2)，然后用蒸餾水定容至500ml,，在4保存,。二.加入少量鹽的HEPESBuffer***(500ml)用HEPES6.5g、NaCl8.0g,、Na2HPO4.7H2O0.198g,、0.5MNaOH水溶液調(diào)節(jié)pH，*后定容,。.2HEPES緩沖鹽溶液的制備將1.6gNaCl,、0.074gKCl、0.027gNa2HPO4.2H2O,、0.2g葡聚糖(glucanordextran)和1gHEPES溶解在90ml蒸餾水中,，用0.5MNaOH調(diào)節(jié)至所需的pH值，再用蒸餾水定容至100ml即可,。艾偉拓注射用HEPES已登記,？

注射級HEPES使用方法有兩種：(1)HEPES可按所需的濃度直接加入到配制的培養(yǎng)液中，再過濾除菌,。每1000ml培養(yǎng)液中加入2.38克HEPES,，待溶后用lNNaOH調(diào)pH至7.2,，濾過除菌后使用。此時HEPES的使用濃度為10mmol/L,。(2)亦可配成100x貯存液(lmol/L),，使用前取99ml培養(yǎng)液加入lml貯存液，**終應(yīng)用濃度仍為10mmol/L,。lmol/L(100x)HEPES貯存液配制方法：取23.8gHEPES溶于90ml雙蒸水中,，用lNNaOH調(diào)pH至7.5一8.0，然后用水定容至100ml,，過濾除菌,，分裝小瓶(2ml/瓶)，4℃或-20℃保存,。需要注意的是,，HEPES緩沖液的使用終濃度為10-50mmol/L，對細(xì)胞無毒性作用,。一般情況下,，濃度為20mmol/L的HEPES即可達(dá)到緩沖能力。現(xiàn)在市售HEPES為約10g包裝的小瓶,，大家根據(jù)實際情況正確靈活配制就OK了艾偉拓穩(wěn)定供應(yīng)注射級海藻糖,、蔗糖、TRIS/TRIS-HCl,、HEPES等生物保護(hù)劑與緩沖鹽,！重慶備案登記號HEPES大批量采購

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