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(1)hepes緩沖液可按所需的濃度直接加入到配制的培養(yǎng)液中,再過濾除菌.每1000ml培養(yǎng)液中加入2.38克HEPES,待溶后用lNNaOH調(diào)pH至7.2,濾過除菌后使用.此時HEPES的使用濃度為10mmol/L.(2)亦可配成100x貯存液(lmol/L),,使用前取99ml培養(yǎng)液加入lml貯存液,,**終應(yīng)用濃度仍為10mmol/L。lmol/L(100x)hepes緩沖液配制方法:取23.8gHEPES溶于90ml雙蒸水中,用lNNaOH調(diào)pH至7.5一8.0,然后用水定容至100ml,過濾除菌,分裝小瓶(2ml/瓶),4℃或-20℃保存.作者:知乎用戶0mmkBe國內(nèi)艾偉拓注射用HEPES已登記,!四川大批量HEPES如何購買
(5)緩沖溶液在穩(wěn)定性方面各顯利弊:①Tris-HCl緩沖溶液pH值受外界影響較大,,一般現(xiàn)用現(xiàn)配。同時需要注意Tris是一級脂肪胺,,分子結(jié)構(gòu)中的氨基易與醛類化合物發(fā)生縮合反應(yīng),,是一些生化實驗的抑制劑。②硼酸鹽緩沖液有一定毒性,,不宜用做注射液或者口服液的緩沖液,。③雖然磷酸鹽緩沖溶液穩(wěn)定性很好,但磷酸根具有一定的絡(luò)合能力會抑制一些與金屬離子有關(guān)的生化反應(yīng),。④HEPES緩沖溶液是較理想的生物緩沖劑,,但其有多種生物學(xué)效應(yīng),如:縮短血液凝固時間,、減緩平滑肌收縮頻率以及阻斷細胞膜上的陰離子通道等,,在一定程度上會影響患者身體狀態(tài),使用時應(yīng)需注意,。福建藥用HEPES如何購買GMP條件下生產(chǎn)艾偉拓注射級HEPES,!
緩沖溶液是許多生化反應(yīng)、生產(chǎn),、實驗過程中的重要溶液,,對穩(wěn)定溶液的酸堿度有重要的影響。本文以**常見的幾種緩沖體系——磷酸鹽緩沖溶液,、硼酸鹽緩沖溶液,、三羥甲基氨基甲烷(簡稱Tris)-HCl緩沖溶液、羥乙基哌嗪乙磺酸(供注射用)(簡稱HEPES)緩沖溶液為例,,介紹緩沖溶液的組成,、緩沖原理及其在生物化學(xué)方面的應(yīng)用。HEPES緩沖溶液具有對細胞無毒性,、不易穿過生物膜,、不參與細胞內(nèi)生化過程等特點,,所以在生化實驗中具有***的應(yīng)用,如可用于開放式細胞生長,、細胞的長期觀察,、RNA或DNA提取試劑盒中。其次,,相關(guān)研究表明以HEPES溶液做緩沖液有利于多肽在金納米粒子表面的偶聯(lián)反應(yīng),。另外,HEPES緩沖溶液對鎂生物降解影響的相關(guān)實驗表明,,HEPES能提高鎂的生物降解性以及抑制鎂不溶鹽層的形成,。
Tris-HCl緩沖液缺點:1、溫度效應(yīng)大,,如4℃時pH=8.4,37℃時pH=7.42,、pH值受溶液濃度影響較大,,稀釋十倍,pH值的變化大于0.1,;3,、對某些pH電極發(fā)生一定的干擾作用,所以要使用與Tris溶液具有兼容性的電極,。4,、易吸收空氣中的CO2,所以配制的緩沖液要蓋嚴(yán)密封,。HEPES緩沖液HEPES是一種非離子兩性緩沖液,,其在pH7.2~7.4范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力,常用在生化診斷試劑盒,、DNA/RNA提取試劑盒及PCR診斷試劑盒里,。HEPES緩沖液優(yōu)點:pKa值介于6.0和8.0之間;在水中具有高溶解度,;具有膜不透性,,不易穿透生物膜;對生化反應(yīng)影響有限,,可耐化學(xué)和酶解作用,,且不與金屬離子生成復(fù)合物或沉淀;有極低的可見光和紫外光吸收,;離子濃度,、溶液組成和溫度對解離的影響小;HEPES緩沖液缺點:如果將HEPES水溶液暴露于環(huán)境光下三小時,會產(chǎn)生細胞毒性的H2O2,;HEPES水溶液必須遠離光線以免影響實驗結(jié)果,;而配置成溶劑后,,要在4℃下保存,建議在短期內(nèi)使用效果更佳,;HEPES粉末放置的時候一般放于干燥的室內(nèi),,不能直接長時間照射陽光。國內(nèi)艾偉拓注射用HEPES的cas號是什么,?
生物緩沖劑在生物化學(xué)研究中有著重要的意義,,在免疫印跡、生物芯片及生物雜交等實驗及體外診斷,、生物醫(yī)藥等行業(yè)中的應(yīng)用非常***,。注射級氨丁三醇緩沖液優(yōu)點如下:1.Tris堿的堿性較強,所以可以只用這一種緩沖體系配制pH范圍由酸性到堿性的大范圍pH值的緩沖液,,應(yīng)用范圍廣,;2.Tris緩沖液對生物化學(xué)過程干擾很小,不與鈣,、鎂離子及重金屬離子發(fā)生沉淀,;3.Tris在水中溶解度高,對很多酶的反應(yīng)是惰性的,;4.Tris緩沖能力高,,在pH7.5-9.0之間有較強的緩沖能力;5.Tris緩沖劑應(yīng)用***,,在生物化學(xué),、分子生物學(xué)、體外診斷,、化妝品,、涂料等領(lǐng)域發(fā)揮重要作用。AVT長期穩(wěn)定供應(yīng)注射級海藻糖,、蔗糖,、TRIS/TRIS-HCl、HEPES等生物保護劑與緩沖鹽,。河北登記號HEPES醫(yī)院采購
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在細胞培養(yǎng)過程中,經(jīng)常少不了HEPES緩沖液,。那么,,HEPES緩沖液的配制和使用方法怎樣呢?HEPES緩沖液是一種弱勢,在開放式的培養(yǎng)條件中,,若加入HEPES,,可防止培養(yǎng)基內(nèi)pH氧化升高,從而將PH維持在7.0左右,。HEPES分子量為238.31,,化學(xué)名:4-羥乙基哌嗪乙磺酸,,分子式:C8H18N2O4S。HEPES常用于生物緩沖劑,,pH值緩沖范圍:6.8-8.2,,用在生化診斷試劑盒、DNA/RNA提取試劑盒及PCR診斷試劑盒里,。對細胞無毒性作用,。它是一種氫離子緩沖劑,能較長時間控制恒定的pH范圍,。使用終濃度為10-50mmol/L,。關(guān)于HEPES緩沖溶液的配制,不同的文獻資料有不同的說法,。根據(jù)用途,,一種是單純的HEPES+NaOH,另一種是HEPES+鹽,。四川大批量HEPES如何購買
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