高效液相色譜法有“四高一廣”的特點(diǎn):①高壓:流動(dòng)相為液體,流經(jīng)色譜柱時(shí),,受到的阻力較大,,為了能迅速通過色譜柱,必須對載液加高壓,。②高速:分析速度快,、載液流速快,較經(jīng)典液體色譜法速度快得多,,通常分析一個(gè)樣品在15~30分鐘,,有些樣品甚至在5分鐘內(nèi)即可完成,一般小于1小時(shí)。③高效:分離效能高,??蛇x擇固定相和流動(dòng)相以達(dá)到比較好分離效果,比工業(yè)精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍,。④高靈敏度:紫外檢測器可達(dá)0.01ng,進(jìn)樣量在μL數(shù)量級,。⑤應(yīng)用范圍廣:百分之七十以上的有機(jī)化合物可用高效液相色譜分析,,特別是高沸點(diǎn)、大分子,、強(qiáng)極性,、熱穩(wěn)定性差化合物的分離分析,顯示出優(yōu)勢,。⑥柱子可反復(fù)使用:用一根柱子可分離不同化合物⑦樣品量少,、容易回收:樣品經(jīng)過色譜柱后不被破壞,可以收集單一組分或做制備,。上海禹重實(shí)業(yè)有限公司是一家專業(yè)提供液相色譜系統(tǒng)的公司,,歡迎您的來電哦!亳州進(jìn)口液相色譜系統(tǒng)
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高效液相色譜的歷史1903年俄國植物化學(xué)家茨維特(Tswett)提出“色譜法”(Chromatography)和“色譜圖”(Chromatogram)的概念,。茨維特使用色譜法chromatography來描述他的彩色試驗(yàn),。1930年以后,相繼出現(xiàn)了紙色譜,、離子交換色譜和薄層色譜等液相色譜技術(shù),。1952年,英國學(xué)者M(jìn)artin和Synge基于他們在分配色譜方面的研究工作,提出了關(guān)于氣-液分配色譜的比較完整的理論和方法,,把色譜技術(shù)向前推進(jìn)了一大步,,這是氣相色譜在此后的十多年間發(fā)展十分迅速的原因。1958年,,基于Moore和Stein的工作,,離子交換色譜的儀器化導(dǎo)致了氨基酸分析儀的出現(xiàn),這是近代液相色譜的一個(gè)重要嘗試,,但分離效率尚不理想,。1960年中后期,氣相色譜理論和實(shí)踐發(fā)展,,以及機(jī)械,、光學(xué)、電子等技術(shù)上的進(jìn)步,,液相色譜又開始活躍,。到60年代末期把高壓泵和化學(xué)鍵合固定相用于液相色譜就出現(xiàn)了HPLC。1970年中期以后,,微處理機(jī)技術(shù)用于液相色譜,,進(jìn)一步提高了儀器的自動(dòng)化水平和分析精度。1990年以后,,生物工程和生命科學(xué)在國際和國內(nèi)的迅速發(fā)展,,為高效液相色譜技術(shù)提出了更多、更新的分離,、純化,、制備的課題,如人類基因組計(jì)劃,,蛋白質(zhì)組學(xué)有HPLC作預(yù)分離等,。
高效液相色譜分離原理空間排阻(StericExclusionChromatography)空間排阻色譜法以凝膠(gel)為固定相。它類似于分子篩的作用,,但凝膠的孔徑比分子篩要大得多,,一般為數(shù)納米到數(shù)百納米。溶質(zhì)在兩相之間不是靠其相互作用力的不同來進(jìn)行分離,,而是按分子大小進(jìn)行分離,。分離只與凝膠的孔徑分布和溶質(zhì)的流動(dòng)力學(xué)體積或分子大小有關(guān)。試樣進(jìn)入色譜柱后,,隨流動(dòng)相在凝膠外部間隙以及孔穴旁流過,。在試樣中一些太大的分子不能進(jìn)入膠孔而受到排阻,因此就直接通過柱子,,首先在色譜圖上出現(xiàn),,一些很小的分子可以進(jìn)入所有膠孔并滲透到顆粒中,,這些組分在柱上的保留值比較大,在色譜圖上***出現(xiàn),。上海禹重實(shí)業(yè)有限公司致力于提供液相色譜系統(tǒng),,有想法可以來我司咨詢。
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