高效液相色譜法介紹基本原理高效液相色譜(HighPerformanceLiquidChromatography,,HPLC),是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上,,于20世紀(jì)60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來的,。與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻,。因?yàn)檩^小的填充顆粒具有高柱效,,但會(huì)引起高阻力,需用高壓輸送流動(dòng)相,,故又稱高壓液相色譜,。使用高效液相色譜時(shí),液體待檢測(cè)物被注入色譜柱,,通過壓力在固定相中移動(dòng),,由于被測(cè)物種不同物質(zhì)與固定相的相互作用不同,不同的物質(zhì)順序離開色譜柱,,通過檢測(cè)器得到不同的峰信號(hào),,通過分析比對(duì)這些信號(hào)來判斷待測(cè)物所含有的物質(zhì)。高效液相色譜作為一種重要的分析方法,,***地應(yīng)用于化學(xué)和生化分析中,。高效液相色譜從原理上與經(jīng)典的液相色譜沒有本質(zhì)的差別,它的特點(diǎn)是采用了高壓輸液泵,、高靈敏度檢測(cè)器和高效微粒固定相,,適于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)、分子量大,、不同極性的有機(jī)化合物,。上海禹重實(shí)業(yè)有限公司致力于提供液相色譜系統(tǒng),歡迎新老客戶來電,!六安賽默飛世爾Vanquish液相色譜系統(tǒng)供應(yīng)商
高效液相色譜相對(duì)分子質(zhì)量對(duì)于相對(duì)分子質(zhì)量較低(一般在200以下),,揮發(fā)性比較好,加熱又不易分解的樣品,,可以選擇氣相色譜法進(jìn)行分析,。相對(duì)分子質(zhì)量在200~2000的化合物,可用液固吸附,、液-液分配和離子交換色譜法,。相對(duì)分子質(zhì)量高于2000,,則可用空間排阻色譜法。高效液相色譜溶解度水溶性樣品比較好用離子交換色譜法和液液分配色譜法,;微溶于水,,但在酸或堿存在下能很好電離的化合物,也可用離子交換色譜法,;油溶性樣品或相對(duì)非極性的混合物,,可用液-固色譜法。高效液相色譜化學(xué)結(jié)構(gòu)若樣品中包含離子型或可離子化的化合物,,或者能與離子型化合物相互作用的化合物(例如配位體及有機(jī)螯合劑),,可首先考慮用離子交換色譜,但空間排阻和液液分配色譜也都能順利地應(yīng)用于離子化合物,;異構(gòu)體的分離可用液固色譜法,;具有不同官能團(tuán)的化合物、同系物可用液液分配色譜法,;對(duì)于高分子聚合物,,可用空間排阻色譜法。臺(tái)州賽默飛Vanquish液相色譜系統(tǒng)廠家供應(yīng)上海禹重實(shí)業(yè)有限公司為您提供液相色譜系統(tǒng),,歡迎新老客戶來電,!
賽默飛高效液相色譜業(yè)務(wù)副總裁兼總經(jīng)理FraserMcLeod表示:“在整個(gè)生物制藥的流程中,從藥物研發(fā)到質(zhì)控的批次放行,,數(shù)據(jù)完整性對(duì)于決策是必不可少的,。為快速獲取可靠結(jié)果,靈敏度和通量非常關(guān)鍵,。我們開發(fā)出的這套系統(tǒng)展示出在復(fù)雜分析應(yīng)用時(shí)的辨分離和重復(fù)性,。”?VanquishFlexUHPLC系統(tǒng)采用獨(dú)特設(shè)計(jì),,即便在高通量的情況下,,仍可以保證分析物色譜峰擁有尖銳峰形,實(shí)現(xiàn)在較短時(shí)間內(nèi)分析更多樣品,。該系統(tǒng)良好的穩(wěn)定性和重復(fù)性為數(shù)據(jù)質(zhì)量提供了可靠保障,,確保能夠分析大量的樣品,以供質(zhì)控分析比較,。其重要特點(diǎn)如下:?新型四元梯度泵模塊,,設(shè)計(jì)穩(wěn)健,性能良好,,保證高通量的前提下依然可提供方法開發(fā)的靈活性,。?泵比較大耐壓1000bar,性能,,流速高達(dá)8mL/min,,應(yīng)用靈活,,可實(shí)現(xiàn)**辨分離。?新型熒光檢測(cè)器模塊靈敏度高,,與高靈敏度,、寬線性范圍的UV、DAD檢測(cè)器和針對(duì)非揮發(fā)性化合物的電霧式檢測(cè)器互為補(bǔ)充,。
雙LC的VanquishDuo系統(tǒng)的更多細(xì)節(jié)VanquishDuo系統(tǒng)可采用多種分析檢測(cè)器,,包括質(zhì)譜(MS)、二極管陣列檢測(cè)(DAD),、電霧式檢(CAD),、可變波長(zhǎng)檢測(cè)(VWD)和熒光檢測(cè)(FLD)。更高的樣品容量,,高樣品容量為標(biāo)準(zhǔn)配置(四個(gè)板,,競(jìng)品均為兩個(gè)板)。通過可以選配的ThermoScientific?Vanquish?Charger模塊可以進(jìn)一步增加樣品的容量,。準(zhǔn)確的流量控制有利于幫助提高數(shù)據(jù)置信度采用雙泵通過三元溶劑梯度配比輸送流量,,可以使所有的設(shè)備安裝在同一室內(nèi),。液相色譜系統(tǒng),,就選上海禹重實(shí)業(yè)有限公司,歡迎客戶來電,!
液相色譜理論發(fā)展簡(jiǎn)況液相色譜法開始階段是用大直徑的玻璃管柱在室溫和常壓下用液位差輸送流動(dòng)相,,稱為經(jīng)典液相色譜法,此方法柱效低,、時(shí)間長(zhǎng)(常有幾個(gè)小時(shí)),。高效液相色譜法(HighperformanceLiquidChromatography,,HPLC)是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上,,于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來的,。它與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻,,小顆粒具有高柱效,,但會(huì)引起高阻力,,需用高壓輸送流動(dòng)相,,故又稱高壓液相色譜法(HighPressureLiquidChromatography,,HPLC),。又因分析速度快而稱為高速液相色譜法(HighSpeedLiquidChromatography,,HSLP)。也稱現(xiàn)代液相色譜,。上海禹重實(shí)業(yè)有限公司為您提供液相色譜系統(tǒng),,有想法的可以來電咨詢!臺(tái)州賽默飛Vanquish液相色譜系統(tǒng)廠家供應(yīng)
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高效液相色譜相關(guān)術(shù)語色譜峰(peak)——組分流經(jīng)檢測(cè)器時(shí)響應(yīng)的連續(xù)信號(hào)產(chǎn)生的曲線,。流出曲線上的突起部分。正常色譜峰近似于對(duì)稱形正態(tài)分布曲線(高斯Gauss曲線),。不對(duì)稱色譜峰有兩種:前延峰(leadingpeak)和拖尾峰(tailingpeak),。前者少見。峰底—基線上峰的起點(diǎn)至終點(diǎn)的距離,。峰高(peakheight,,h)—峰的比較高點(diǎn)至峰底的距離。峰寬(peakwidth,,W)—峰兩側(cè)拐點(diǎn)處所作兩條切線與基線的兩個(gè)交點(diǎn)間的距離,。W=4σ半峰寬(peakwidthathalf-height,Wh/2)—峰高一半處的峰寬,。Wh/2=2.355σ六安賽默飛世爾Vanquish液相色譜系統(tǒng)供應(yīng)商
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