高效液相色譜法介紹基本原理高效液相色譜(HighPerformanceLiquidChromatography,,HPLC),,是在經(jīng)典液相色譜法的基礎上,,于20世紀60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來的。與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻,。因為較小的填充顆粒具有高柱效,,但會引起高阻力,,需用高壓輸送流動相,,故又稱高壓液相色譜,。使用高效液相色譜時,液體待檢測物被注入色譜柱,,通過壓力在固定相中移動,,由于被測物種不同物質(zhì)與固定相的相互作用不同,,不同的物質(zhì)順序離開色譜柱,,通過檢測器得到不同的峰信號,通過分析比對這些信號來判斷待測物所含有的物質(zhì),。高效液相色譜作為一種重要的分析方法,,***地應用于化學和生化分析中。高效液相色譜從原理上與經(jīng)典的液相色譜沒有本質(zhì)的差別,,它的特點是采用了高壓輸液泵,、高靈敏度檢測器和高效微粒固定相,適于分析高沸點不易揮發(fā),、分子量大,、不同極性的有機化合物。上海禹重實業(yè)有限公司是一家專業(yè)提供液相色譜系統(tǒng)的公司,,期待您的光臨,!松江區(qū)化學分離液相色譜系統(tǒng)咨詢報價
高效液相色譜分離原理空間排阻(StericExclusionChromatography)空間排阻色譜法以凝膠(gel)為固定相。它類似于分子篩的作用,,但凝膠的孔徑比分子篩要大得多,,一般為數(shù)納米到數(shù)百納米。溶質(zhì)在兩相之間不是靠其相互作用力的不同來進行分離,,而是按分子大小進行分離,。分離只與凝膠的孔徑分布和溶質(zhì)的流動力學體積或分子大小有關。試樣進入色譜柱后,,隨流動相在凝膠外部間隙以及孔穴旁流過,。在試樣中一些太大的分子不能進入膠孔而受到排阻,因此就直接通過柱子,,首先在色譜圖上出現(xiàn),,一些很小的分子可以進入所有膠孔并滲透到顆粒中,這些組分在柱上的保留值比較大,在色譜圖上***出現(xiàn),。原裝液相色譜系統(tǒng)廠家直銷液相色譜系統(tǒng),,就選上海禹重實業(yè)有限公司,用戶的信賴之選,,有需要可以聯(lián)系我司哦,!
液相色譜類型液相色譜按其分離機理,可分為四種類型--吸附色譜法,、分配色譜法,、離子交換色譜、凝膠色譜法分配色譜法這種色譜的流動相和固定相都是液體,,樣品分子在兩個液相之間很快達到平衡分配,,利用各組分在兩相中分配系數(shù)的差異進行分離,類似于萃取過程,。一般常用的固定液有β,β-氧二丙腈(ODPN),、聚乙二醇(PEG400~4000)、三甲撐乙二醇(TMG)和角鯊烷(SQ),。采用與氣相色譜(GC)同樣的方法,,將固定液涂漬在多孔的載體表面,但在使用中固定液易流失,。目前,,應用較多的是鍵合固定相。在這種固體相中,,固定液不是涂在載體表面,,而是通過化學反應在純硅膠顆粒表面鍵合上某種有機基團。例如,,利用氯代十八烷基硅烷與硅膠表面的羥基(-OH)之間的反應就可以形成一烷基化表面,。這種固定液的優(yōu)點是不易被流動相剝蝕。在分配色譜法中,,流動相可為純?nèi)軇?,也可以采用混合溶劑進行梯度淋洗,其極性應與固定液差別大一些,,以避免兩者之間相溶,。通常可分為正相分配和反相分配,。
反梯度應用VanquishDuo系統(tǒng)提高定量分析水平,,獲取更多未知化合物信息反梯度的VanquishDuo系統(tǒng)可通過電霧式檢測技術(CAD)為所有檢測分析物提供一致的響應。等度分離可產(chǎn)生一致的CAD響應,,但某些分離需要采用梯度洗脫導致相應不一致,。VanquishDuo系統(tǒng)通過使用第二個泵對檢測器輸送反向梯度,,可實現(xiàn):?采用CAD檢測器在梯度洗脫條件下獲得一致的響應?在無標準品的情況下,可靠地定量已知和未知化合物?通過自動反梯度計算功能考查所有系統(tǒng)體積,,簡化了方法設置無論化合物何時在梯度中進行洗脫,,進入檢測器的洗脫液通過反梯度補償功能,始終保持相同的溶劑組成,。即使缺乏特定化合物的單個標準品,,也能夠可靠地為您提供一致的定量響應信息。上海禹重實業(yè)有限公司致力于提供液相色譜系統(tǒng),,有想法可以來我司咨詢,。
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高效液相色譜分離原理離子(IonChromatography)用離子交換樹脂為固定相,,電解質(zhì)溶液為流動相,。以電導檢測器為通用檢測器,為消除流動相中強電解質(zhì)背景離子對電導檢測器的干擾,,設置了柱,。試樣組分在分離柱和柱上的反應原理與離子交換色譜法相同。以陰離子交換樹脂(R-OH)作固定相,,分離陰離子(如Br-)為例,。當待測陰離子Br-隨流動相(NaOH)進入色譜柱時,發(fā)生如下交換反應(洗脫反應為交換反應的逆過程):柱上發(fā)生的反應:R-HNaOH-===R-NaH2OR-HNaBr-===R-NaHBr-可見,,通過柱將洗脫液轉變成了電導值很小的水,,消除了本底電導的影響;試樣陰離子Br-則被轉化成了相應的酸HBr-,可用電導法靈敏的檢測,。離子色譜法是溶液中陰離子分析的比較好方法,。也可用于陽離子分析。松江區(qū)化學分離液相色譜系統(tǒng)咨詢報價
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