高效液相色譜分離原理空間排阻(StericExclusionChromatography)空間排阻色譜法以凝膠(gel)為固定相,。它類似于分子篩的作用,,但凝膠的孔徑比分子篩要大得多,,一般為數(shù)納米到數(shù)百納米,。溶質(zhì)在兩相之間不是靠其相互作用力的不同來進行分離,而是按分子大小進行分離,。分離只與凝膠的孔徑分布和溶質(zhì)的流動力學體積或分子大小有關(guān),。試樣進入色譜柱后,隨流動相在凝膠外部間隙以及孔穴旁流過,。在試樣中一些太大的分子不能進入膠孔而受到排阻,,因此就直接通過柱子,首先在色譜圖上出現(xiàn),,一些很小的分子可以進入所有膠孔并滲透到顆粒中,,這些組分在柱上的保留值比較大,在色譜圖上***出現(xiàn),。上海禹重實業(yè)有限公司為您提供液相色譜系統(tǒng),,歡迎您的來電哦!安徽賽默飛Vanquish液相色譜系統(tǒng)
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高效液相色譜的歷史1903年俄國植物化學家茨維特(Tswett)提出“色譜法”(Chromatography)和“色譜圖”(Chromatogram)的概念,。茨維特使用色譜法chromatography來描述他的彩色試驗,。1930年以后,,相繼出現(xiàn)了紙色譜、離子交換色譜和薄層色譜等液相色譜技術(shù),。1952年,,英國學者Martin和Synge基于他們在分配色譜方面的研究工作,提出了關(guān)于氣-液分配色譜的比較完整的理論和方法,,把色譜技術(shù)向前推進了一大步,這是氣相色譜在此后的十多年間發(fā)展十分迅速的原因,。1958年,,基于Moore和Stein的工作,離子交換色譜的儀器化導致了氨基酸分析儀的出現(xiàn),,這是近代液相色譜的一個重要嘗試,,但分離效率尚不理想。1960年中后期,,氣相色譜理論和實踐發(fā)展,,以及機械、光學,、電子等技術(shù)上的進步,,液相色譜又開始活躍。到60年代末期把高壓泵和化學鍵合固定相用于液相色譜就出現(xiàn)了HPLC,。1970年中期以后,,微處理機技術(shù)用于液相色譜,進一步提高了儀器的自動化水平和分析精度,。1990年以后,,生物工程和生命科學在國際和國內(nèi)的迅速發(fā)展,為高效液相色譜技術(shù)提出了更多,、更新的分離,、純化、制備的課題,,如人類基因組計劃,,蛋白質(zhì)組學有HPLC作預分離等。
高效液相色譜分離原理液—固流動相為液體,,固定相為吸附劑(如硅膠,、氧化鋁等)。這是根據(jù)物質(zhì)吸附作用的不同來進行分離的,。其作用機制是:當試樣進入色譜柱時,,溶質(zhì)分子(X)和溶劑分子(S)對吸附劑表面活性中心發(fā)生競爭吸附(未進樣時,所有的吸附劑活性中心吸附的是S),,可表示如下:XmnSa======XanSm式中:Xm--流動相中的溶質(zhì)分子,;Sa--固定相中的溶劑分子,;Xa--固定相中的溶質(zhì)分子;Sm--流動相中的溶劑分子,。當吸附競爭反應達平衡時:K=[Xa][Sm]/[Xm][Sa]式中:K為吸附平衡常數(shù),。[討論:K越大,保留值越大,。]液相色譜系統(tǒng),,就選上海禹重實業(yè)有限公司,讓您滿意,,有想法可以來我司咨詢,!
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