高效液相色譜法介紹基本原理高效液相色譜(HighPerformanceLiquidChromatography,,HPLC),是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上,,于20世紀(jì)60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來的,。與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻。因為較小的填充顆粒具有高柱效,,但會引起高阻力,,需用高壓輸送流動相,故又稱高壓液相色譜,。使用高效液相色譜時,,液體待檢測物被注入色譜柱,通過壓力在固定相中移動,,由于被測物種不同物質(zhì)與固定相的相互作用不同,,不同的物質(zhì)順序離開色譜柱,通過檢測器得到不同的峰信號,,***通過分析比對這些信號來判斷待測物所含有的物質(zhì),。高效液相色譜作為一種重要的分析方法,***地應(yīng)用于化學(xué)和生化分析中,。高效液相色譜從原理上與經(jīng)典的液相色譜沒有本質(zhì)的差別,,它的特點是采用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測器和高效微粒固定相,,適于分析高沸點不易揮發(fā),、分子量大、不同極性的有機化合物,。液相色譜系統(tǒng),,就選上海禹重實業(yè)有限公司,用戶的信賴之選,,歡迎新老客戶來電,!廣東Vanquish液相色譜系統(tǒng)多少錢
高效液相色譜分離原理離子對(IonPairChromatography)離子對色譜法是將一種(或多種)與溶質(zhì)分子電荷相反的離子(稱為對離子或反離子)加到流動相或固定相中,使其與溶質(zhì)離子結(jié)合形成疏水型離子對化合物,,從而控制溶質(zhì)離子的保留行為,。其原理可用下式表示:X水相Y-水相===XY-有機相式中:X水相--流動相中待分離的有機離子(也可是陽離子);Y-水相--流動相中帶相反電荷的離子對(如氫氧化四丁基銨,、氫氧化十六烷基三甲銨等),;XY---形成的離子對化合物。當(dāng)達(dá)平衡時:KXY=[XY-]有機相/[X]水相[Y-]水相根據(jù)定義,,分配系數(shù)為:DX=[XY-]有機相/[X]水相=KXY[Y-]水相[討論:DX與保留值的關(guān)系]離子對色譜法(特別是反相)解決了以往難以分離的混合物的分離問題,,諸如酸、堿和離子,、非離子混合物,,特別是一些生化試樣如核酸,、核苷、生物堿以及藥物等分離,。山東液相色譜系統(tǒng)供應(yīng)商上海禹重實業(yè)有限公司為您提供液相色譜系統(tǒng),,有想法可以來我司咨詢!
液相色譜類型液相色譜按其分離機理,,可分為四種類型--吸附色譜法,、分配色譜法、離子交換色譜,、凝膠色譜法凝膠色譜法目前,,凝膠色譜法既適用于水溶液的體系,又適用于有機溶劑的體系,。當(dāng)所用的洗脫劑為水溶液時,,稱為凝膠過濾色譜,凝膠過濾色譜在生物界的應(yīng)用比較多,;采用有機溶劑為洗脫劑時,,稱為凝膠滲透色譜,凝膠滲透色譜在高分子領(lǐng)域應(yīng)用比較多,。四種不同類型的液相色譜,,可以依據(jù)樣品性質(zhì)的不同,,選擇不同的方法,,靈活應(yīng)用。
高效液相色譜綜述HPLC的出現(xiàn)不過三十多年的時間,,但這種分離分析技術(shù)的發(fā)展十分迅猛,,應(yīng)用十分***。其儀器結(jié)構(gòu)和流程多種多樣,。典型的高效液相色譜儀結(jié)構(gòu)和流程可用下列方框圖表示(SeeFig.3-4),。高效液相色譜儀一般都具備貯液器、高壓泵,、梯度洗提裝置(用雙泵),、進樣器、色譜柱,、檢測器,、恒溫器、記錄儀等主要部件,。高效液相色譜更適宜于分離,、分析高沸點、熱穩(wěn)定性差,、有生理活性及相對分子量比較大的物質(zhì),,因而廣泛應(yīng)用于核酸,、肽類、內(nèi)酯,、稠環(huán)芳烴,、高聚物、藥物,、人體代謝產(chǎn)物,、表面活性劑,抗氧化劑,、殺蟲劑,、除銹劑的分析等物質(zhì)的分析。上海禹重實業(yè)有限公司為您提供液相色譜系統(tǒng),,期待您的光臨,!
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高效液相色譜相關(guān)術(shù)語色譜圖(chromatogram)——樣品流經(jīng)色譜柱和檢測器,,所得到的信號-時間曲線,又稱色譜流出曲線(elutionprofile),?;€(baseline)——經(jīng)流動相沖洗,柱與流動相達(dá)到平衡后,,檢測器測出一段時間的流出曲線,。一般應(yīng)平行于時間軸。噪音(noise)——基線信號的波動,。通常因電源接觸不良或瞬時過載,、檢測器不穩(wěn)定、流動相含有氣泡或色譜柱被污染所致,。漂移(drift)——基線隨時間的緩緩變化,。主要由于操作條件如電壓、溫度,、流動相及流量的不穩(wěn)定所引起,,柱內(nèi)的污染物或固定相不斷被洗脫下來也會產(chǎn)生漂移,。廣東Vanquish液相色譜系統(tǒng)多少錢