SIRION Biotech成立于2005年,,旨在領(lǐng)導(dǎo)下一代病毒載體技術(shù),用于基因和細胞zhi liao以及疫苗開發(fā)。現(xiàn)在,SIRION提供了一個基于慢病毒,、腺病毒和類腺病毒的quan mian的病毒載體技術(shù)平臺,,加速了基因zhi liao研究和藥物開發(fā),。SIRION正成為這一增長領(lǐng)域的優(yōu)先合作伙伴,。從早期臨床階段I/II到晚期臨床階段III的臨床試驗中使用了LentBoost并證明了在改善zhi liao載體的轉(zhuǎn)導(dǎo)方面的臨床成功,。德國 Sirion Biotech 公司研發(fā)了 LentiBOOST 慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑,,專為提高病毒基因轉(zhuǎn)導(dǎo)難轉(zhuǎn)的哺乳動物和嚙齒動物細胞的效率。LentiBOOST...
慢病毒載體的研究發(fā)展得很快,,研究的也非常深入,,在美國已經(jīng)開展了臨床研究,效果非常理想,,因此具有廣闊的應(yīng)用前景,。慢病毒也被guangfan地應(yīng)用于表達RNAi的研究中。由于有些類型細胞轉(zhuǎn)染試劑瞬時轉(zhuǎn)染效果差,,轉(zhuǎn)移到細胞內(nèi)的siRNA半衰期短,,體外合成siRNA對基因表達的抑制作用通常是短暫的,因而使其應(yīng)用受到較大的限制。SIRIONBiotech為研究機構(gòu)和醫(yī)院開發(fā)了一種定制的許可模式,,并為臨床試驗提供良好的GMP材料供應(yīng)條件,。LentiBOOST目前在美國和歐洲的多個臨床試驗中使用。LentiBOOST(Pharmagrade)jin用于藥物級的臨床前研究和工藝開發(fā),,以及評估研究,。LentiB...
SIRION Biotech成立于2005年,旨在領(lǐng)導(dǎo)下一代病毒載體技術(shù),,用于基因和細胞zhi liao以及疫苗開發(fā)?,F(xiàn)在,SIRION提供了一個基于慢病毒,、腺病毒和類腺病毒的quan mian的病毒載體技術(shù)平臺,,加速了基因zhi liao研究和藥物開發(fā)。SIRION正成為這一增長領(lǐng)域的優(yōu)先合作伙伴,。從早期臨床階段I/II到晚期臨床階段III的臨床試驗中使用了LentBoost并證明了在改善zhi liao載體的轉(zhuǎn)導(dǎo)方面的臨床成功,。德國 Sirion Biotech 公司研發(fā)了 LentiBOOST 慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑,專為提高病毒基因轉(zhuǎn)導(dǎo)難轉(zhuǎn)的哺乳動物和嚙齒動物細胞的效率,。LentiBOOST...
研究發(fā)現(xiàn) LentiBOOST 和硫酸魚精蛋白的組合使用可以產(chǎn)生比polybrene更高的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,,且對細胞活力或干細胞特性沒有劑量依賴性的不良影響。這種轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑的組合dai biao了一種有價值的臨床兼容性polybrene替代方案,,具有顯著提高基因zhi liao應(yīng)用中 MSCs 慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的潛力,。細胞狀態(tài)對于慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率也具有很大的影響,良好的生長狀態(tài)是達到高gan ran效率的保證,,一般選擇細胞形態(tài)較好,、輪廓清晰、處于對數(shù)生長期的細胞進行g(shù)an ran可提高gan ran效率,。更多關(guān)于Sirion Biotech LentiBOOST相關(guān)產(chǎn)品問題,,歡迎咨詢上海曼博生物!什么試劑...
聚凝胺(polybrene)是一種陽離子聚合物,1971年研究證明它可提高逆轉(zhuǎn)錄病毒的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,。polybrene的確切作用機制尚不清楚,多認為它是通過中和細胞表面與病毒粒子之間的負靜電斥力,使病毒粒子容易吸附在細胞表面,從而促進病毒轉(zhuǎn)導(dǎo),。慢病毒載體可以將外源基因有效地整合到宿主染色體上,從而達到持久性表達目的序列的效果,。在gan ran能力方面可有效地gan ran神經(jīng)元細胞,、肝細胞、心肌細胞,、腫瘤細胞,、內(nèi)皮細胞、干細胞等多種類型的細胞,,從而達到良好的的基因zhi liao效果,。對于一些較難轉(zhuǎn)染的細胞,如原代細胞、干細胞,、不分化的細胞等,,使用慢病毒載體,能da da提高目的基因的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,,且...
LentiBOOST是德國Sirion Biotech開發(fā)的一種高效,、無細胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑,用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo),。它是一種非離子型,、非受體依賴性的表面活性劑,通過降低細胞膜粘稠度,、提高脂質(zhì)交換和跨膜轉(zhuǎn)運,,促進慢病毒與細胞膜的融合,提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,。SIRION Biotech 為研究機構(gòu)和醫(yī)院開發(fā)了一種定制的許可模式,,并為臨床試驗提供良好的 GMP 材料供應(yīng)條件。LentiBOOST 目前在美國和歐洲的多個臨床試驗中使用,。LentiBOOST(Pharma grade)jin用于藥物級的臨床前研究和工藝開發(fā),以及評估研究,。LentiBOOST(GMP grade)用于臨床階段方...
在病毒附著到宿主細胞后,,病毒RNA滲透進宿主細胞,并以此為模板,,利用逆轉(zhuǎn)錄酶合成病毒cDNA,在逆轉(zhuǎn)錄和合成雙鏈DNA的過程中,,RNA的兩端都進行了復(fù)制,產(chǎn)生了長末端重復(fù)序列(LTRs),在雙鏈的病毒DNA中,,每條鏈含有U3-R-U5序列,,然后雙鏈DNA被運送到細胞核內(nèi)。新合成的逆轉(zhuǎn)錄病毒DNA整合到宿主DNA中,,稱為原病毒,。原病毒在細胞周期過程中復(fù)制,然后傳遞給子細胞,。不像其他逆轉(zhuǎn)錄病毒科成員,,慢病毒可以有效地ganran不分裂的細胞,這使它們更有吸引力用于基因zhiliao,。Zuihou,,子代病毒基因組從整合的DNA轉(zhuǎn)錄到細胞質(zhì)中。病毒粒子從質(zhì)膜出芽獲得其脂質(zhì)包膜,。在出芽過程中,,病毒蛋白被...
慢病毒載體的研究發(fā)展得很快,研究的也非常深入,在美國已經(jīng)開展了臨床研究,,效果非常理想,,因此具有廣闊的應(yīng)用前景。慢病毒也被guangfan地應(yīng)用于表達RNAi的研究中,。由于有些類型細胞轉(zhuǎn)染試劑瞬時轉(zhuǎn)染效果差,,轉(zhuǎn)移到細胞內(nèi)的siRNA半衰期短,體外合成siRNA對基因表達的抑制作用通常是短暫的,,因而使其應(yīng)用受到較大的限制,。SIRIONBiotech為研究機構(gòu)和醫(yī)院開發(fā)了一種定制的許可模式,并為臨床試驗提供良好的GMP材料供應(yīng)條件,。LentiBOOST目前在美國和歐洲的多個臨床試驗中使用,。LentiBOOST(Pharmagrade)jin用于藥物級的臨床前研究和工藝開發(fā),以及評估研究,。LentiB...
慢病毒載體是指以人類免疫缺陷病毒-1 (HIV-1) 來源的一種病毒載體,,慢病毒載體包含了包裝、轉(zhuǎn)染,、穩(wěn)定整合所需要的遺傳信息,,是慢病毒載體系統(tǒng)的主要組成部分。攜帶有外源基因的慢病毒載體在慢病毒包裝質(zhì)粒,、細胞系的輔助下,,經(jīng)過病毒包裝成為有g(shù)an ran力的病毒顆粒,通過gan ran細胞或huo ti組織,,實現(xiàn)外源基因在細胞或huo ti組織中表達,。慢病毒載體可以將外源基因有效地整合到宿主染色體上,從而達到持久性表達目的序列的效果,。在gan ran能力方面可有效地gan ran神經(jīng)元細胞,、肝細胞、心肌細胞,、腫瘤細胞,、內(nèi)皮細胞、干細胞等多種類型的細胞,,從而達到良好的的基因zhi liao效果,。更...
Sirion Biotech GmbH 公司于2007年在德國馬丁雷德成立,此后一直致力于改變病毒載體供應(yīng)的模式,。Sirion載體被用于基因功能研究,、臨床前靶點驗證、基因zhi liao和疫苗開發(fā),。Sirion Technologies獲得了歐洲和美國幾項主要臨床試驗(Phase I/II/III)的許可,,是歐洲主要的病毒載體技術(shù)商業(yè)供應(yīng)商,,在短時間內(nèi)可提供quan mian的定制病毒載體組合,并提供個性化項目管理服務(wù),。LentiBOOST使再植HSCs的VCN增加2倍,,且對細胞分化和植入無影響。LentiBOOST在對人T細胞無細胞毒作用的情況下可增強慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)產(chǎn)生更多的Zhong Liu抗...
LentiBOOST可廣泛應(yīng)用于多種臨床相關(guān)細胞類型,,包括CD34+造血干細胞(HSCs),,間充質(zhì)干細胞(MSCs),神經(jīng)干細胞,,原代T細胞,,NK細胞和成纖維細胞等,對于難轉(zhuǎn)導(dǎo)的小鼠T細胞亦有效,。已成為改進體外基因zhi liao和CAR-T細胞zhi liao的臨床轉(zhuǎn)導(dǎo)方案的理想選擇,。LentiBOOST是德國SirionBiotech開發(fā)的一種高效、無細胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑,,用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo),。它是一種非離子型、非受體依賴性的表面活性劑,,通過降低細胞膜粘稠度,、提高脂質(zhì)交換和跨膜轉(zhuǎn)運,促進慢病毒與細胞膜的融合,,提高慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,。目前LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑在美...
LentiBOOST可廣泛應(yīng)用于多種臨床相關(guān)細胞類型,包括CD34+造血干細胞(HSCs),,間充質(zhì)干細胞(MSCs),神經(jīng)干細胞,,原代T細胞,,NK細胞和成纖維細胞等,對于難轉(zhuǎn)導(dǎo)的小鼠T細胞亦有效,。已成為改進體外基因zhi liao和CAR-T細胞zhi liao的臨床轉(zhuǎn)導(dǎo)方案的理想選擇,。LentiBOOST是德國SirionBiotech開發(fā)的一種高效、無細胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑,,用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo),。它是一種非離子型、非受體依賴性的表面活性劑,,通過降低細胞膜粘稠度,、提高脂質(zhì)交換和跨膜轉(zhuǎn)運,促進慢病毒與細胞膜的融合,,提高慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,。目前LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑在美...
LentiBOOST是德國Sirion Biotech開發(fā)的一種高效,、無細胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑,用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo),。它是一種非離子型,、非受體依賴性的表面活性劑,通過降低細胞膜粘稠度,、提高脂質(zhì)交換和跨膜轉(zhuǎn)運,,促進慢病毒與細胞膜的融合,提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,。SIRION Biotech 為研究機構(gòu)和醫(yī)院開發(fā)了一種定制的許可模式,,并為臨床試驗提供良好的 GMP 材料供應(yīng)條件。LentiBOOST 目前在美國和歐洲的多個臨床試驗中使用,。LentiBOOST(Pharma grade)jin用于藥物級的臨床前研究和工藝開發(fā),,以及評估研究。LentiBOOST(GMP grade)用于臨床階段方...
目前的基因&細胞zhi liao主要采用病毒和非病毒兩種載體形式,。根據(jù)統(tǒng)計,,病毒載體約占進行臨床實驗的項目 65%;而慢病毒因無嚴重的臨床事故出現(xiàn)成為目前相對安全的病毒載體選擇之一,。慢病毒載體具有能gan ran非分裂期細胞,、容納外源性目的基因片段大、穩(wěn)定性強,、免疫原性小等特點,。大量研究表明,相對其他病毒載體,,慢病毒gan ran效率高,,更容易gan ran一些較難gan ran的組織和細胞,其效率一般可以達到 30%-95% 以上,。病毒顆的限制性攝取粒往往會降低基因或 shRNA 表達的成功率,,并要求應(yīng)用更高的病毒滴度。然而,,增加病毒數(shù)量以促進表達可能會導(dǎo)致許多細胞類型的毒性副作用,,并帶來不...
聚凝胺(polybrene)是一種陽離子聚合物,1971年研究證明它可提高逆轉(zhuǎn)錄病毒的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。polybrene的確切作用機制尚不清楚,多認為它是通過中和細胞表面與病毒粒子之間的負靜電斥力,使病毒粒子容易吸附在細胞表面,從而促進病毒轉(zhuǎn)導(dǎo),。在增強各種細胞的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)中,,轉(zhuǎn)導(dǎo)效率隨polybrene濃度的增加而增加。但轉(zhuǎn)導(dǎo)增強的同時也會對細胞產(chǎn)生一定毒性作用,,polybrene不僅對細胞增殖有劑量依賴性抑制作用,還會不同程度的影響各類細胞的生長潛力,。更多關(guān)于慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)的相關(guān)產(chǎn)品問題,歡迎咨詢上海曼博生物,!什么可以幫助增強慢病毒轉(zhuǎn)染,?慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)毒性分析LentiBOOST可廣泛應(yīng)用于多種臨床相關(guān)細...
影響轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的另一個關(guān)鍵參數(shù)是ganran復(fù)數(shù)(MOI),MOI指的是每個細胞ganran的病毒粒子個數(shù),,病毒粒子滴度以ganran單位(IU)/mL或TU/mL表示。慢病毒的ganran能力隨細胞類型的不同而不同,,因此每種不同的細胞類型需要不同的MOI,。MOI值越大,慢病毒ganran上的可能性也越大,,ganran效率越高,,但對細胞的毒性也越大。另外細胞需要的MOI值越大,,也說明細胞越難被轉(zhuǎn)導(dǎo),。SIRIONBiotech為研究機構(gòu)和醫(yī)院開發(fā)了一種定制的許可模式,并為臨床試驗提供良好的GMP材料供應(yīng)條件,。LentiBOOST目前在美國和歐洲的多個臨床試驗中使用,。更多關(guān)于慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)的相關(guān)產(chǎn)品問題...
在病毒附著到宿主細胞后,病毒RNA滲透進宿主細胞,,并以此為模板,,利用逆轉(zhuǎn)錄酶合成病毒cDNA,在逆轉(zhuǎn)錄和合成雙鏈DNA的過程中,RNA的兩端都進行了復(fù)制,,產(chǎn)生了長末端重復(fù)序列(LTRs),在雙鏈的病毒DNA中,,每條鏈含有U3-R-U5序列,然后雙鏈DNA被運送到細胞核內(nèi),。新合成的逆轉(zhuǎn)錄病毒DNA整合到宿主DNA中,,稱為原病毒。原病毒在細胞周期過程中復(fù)制,,然后傳遞給子細胞,。不像其他逆轉(zhuǎn)錄病毒科成員,慢病毒可以有效地ganran不分裂的細胞,,這使它們更有吸引力用于基因zhiliao,。Zuihou,子代病毒基因組從整合的DNA轉(zhuǎn)錄到細胞質(zhì)中,。病毒粒子從質(zhì)膜出芽獲得其脂質(zhì)包膜,。在出芽過程中,,病毒蛋白被...
SIRION Biotech成立于2005年,,旨在領(lǐng)導(dǎo)下一代病毒載體技術(shù),用于基因和細胞zhi liao以及疫苗開發(fā)?,F(xiàn)在,,SIRION提供了一個基于慢病毒、腺病毒和類腺病毒的quan mian的病毒載體技術(shù)平臺,,加速了基因zhi liao研究和藥物開發(fā),。SIRION正成為這一增長領(lǐng)域的優(yōu)先合作伙伴,。從早期臨床階段I/II到晚期臨床階段III的臨床試驗中使用了LentBoost并證明了在改善zhi liao載體的轉(zhuǎn)導(dǎo)方面的臨床成功。德國 Sirion Biotech 公司研發(fā)了 LentiBOOST 慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑,,專為提高病毒基因轉(zhuǎn)導(dǎo)難轉(zhuǎn)的哺乳動物和嚙齒動物細胞的效率,。LentiBOOST...
聚凝胺(polybrene)是一種陽離子聚合物,1971年研究證明它可提高逆轉(zhuǎn)錄病毒的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。polybrene的確切作用機制尚不清楚,多認為它是通過中和細胞表面與病毒粒子之間的負靜電斥力,使病毒粒子容易吸附在細胞表面,從而促進病毒轉(zhuǎn)導(dǎo),。在增強各種細胞的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)中,,轉(zhuǎn)導(dǎo)效率隨polybrene濃度的增加而增加。但轉(zhuǎn)導(dǎo)增強的同時也會對細胞產(chǎn)生一定毒性作用,,polybrene不僅對細胞增殖有劑量依賴性抑制作用,還會不同程度的影響各類細胞的生長潛力,。更多關(guān)于慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)的相關(guān)產(chǎn)品問題,歡迎咨詢上海曼博生物,! 慢病毒載體是一種源于人類免疫缺陷病毒的基因載體,。快速慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)試劑盒人間充質(zhì)干...
慢病毒是一種有包膜的RNA病毒,,直徑為80-120nm,,呈二十面體對稱結(jié)構(gòu)、球形,。病毒顆粒Zui外層是包膜(包膜蛋白決定了han ran細胞的類型),,再往里依次為基質(zhì)蛋白和衣殼,Zui里面是兩條相同的正股RNA鏈和酶(逆轉(zhuǎn)錄酶,、整合酶和蛋白酶),。慢病毒han ran的xian zhu特點是han ran個體在出現(xiàn)典型的臨床癥狀之前,大多經(jīng)歷長達數(shù)年的潛伏期,,之后緩慢發(fā)病,,因此這些病原體被稱為慢病毒。慢病毒載體是指以人類免疫缺陷病毒-1 (HIV-1) 來源的一種病毒載體,,慢病毒載體包含了包裝,、轉(zhuǎn)染、穩(wěn)定整合所需要的遺傳信息,,是慢病毒載體系統(tǒng)的主要組成部分,。攜帶有外源基因的慢病毒載體在慢病毒包裝...
SIRION Biotech 為研究機構(gòu)和醫(yī)院開發(fā)了一種定制的許可模式,并為臨床試驗提供良好的 GMP 材料供應(yīng)條件,。LentiBOOST 目前在美國和歐洲的多個臨床試驗中使用,。LentiBOOST是德國Sirion Biotech開發(fā)的一種高效、無細胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑,,用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo),。它是一種非離子型、非受體依賴性的表面活性劑,,通過降低細胞膜粘稠度,、提高脂質(zhì)交換和跨膜轉(zhuǎn)運,,促進慢病毒與細胞膜的融合,提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,。在異種移植后免疫缺陷小鼠體內(nèi),,LentiBOOST使再植HSCs的VCN增加2倍,且對細胞分化和植入無影響,。LentiBOOST在對人T細胞無細胞毒作用的情況...
影響轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的另一個關(guān)鍵參數(shù)是gan ran復(fù)數(shù)(MOI),MOI指的是每個細胞gan ran的病毒粒子個數(shù),,病毒粒子滴度以gan ran單位(IU)/mL 或 TU/mL表示。慢病毒的gan ran能力隨細胞類型的不同而不同,,因此每種不同的細胞類型需要不同的MOI,。MOI值越大,慢病毒gan ran上的可能性也越大,,gan ran效率越高,,但對細胞的毒性也越大。另外細胞需要的MOI值越大,,也說明細胞越難被轉(zhuǎn)導(dǎo),。SIRION Biotech 為研究機構(gòu)和醫(yī)院開發(fā)了一種定制的許可模式,并為臨床試驗提供良好的 GMP 材料供應(yīng)條件,。LentiBOOST 目前在美國和歐洲的多個臨床試驗中使用,。Len...
人間充質(zhì)干細胞 (MSCs) 的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)可誘導(dǎo)長期轉(zhuǎn)基因表達,并為多種基因zhi liao應(yīng)用帶來巨大希望,。Polybrene是實驗室研究中Zui常用的提高病毒基因轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的試劑,,但它未被批準用于人體,并且還被證明會損害MSCs細胞的增殖和分化,。因此,,優(yōu)化轉(zhuǎn)導(dǎo)方案以應(yīng)用于臨床試驗是非常有必要的。LentiBOOST 和硫酸魚精蛋白是可替代的轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑,,可以按照現(xiàn)行的GMP標準生產(chǎn),,且很容易應(yīng)用于現(xiàn)有的轉(zhuǎn)導(dǎo)方案,并且曾被用于人類 CD34+ HSCs細胞的轉(zhuǎn)導(dǎo)研究,。聚凝胺(polybrene)是一種陽離子聚合物,1971年研究證明它可提高逆轉(zhuǎn)錄病毒的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,。polybrene的確切作用機制尚...
慢病毒載體可以將外源基因有效地整合到宿主染色體上,從而達到持久性表達目的序列的效果,。在ganran能力方面可有效地ganran神經(jīng)元細胞,、肝細胞、心肌細胞,、腫瘤細胞,、內(nèi)皮細胞,、干細胞等多種類型的細胞,,從而達到良好的的基因zhiliao效果,。對于一些較難轉(zhuǎn)染的細胞,如原代細胞,、干細胞,、不分化的細胞等,使用慢病毒載體,,能dada提高目的基因的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,,且目的基因整合到宿主細胞基因組的幾率dada增加,能夠比較方便快捷地實現(xiàn)目的基因的長期,、穩(wěn)定表達,。更多關(guān)于SirionBiotechLentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑,歡迎咨詢上海曼博生物,!為了達到研究目的,在轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中加入轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑也能有效提高轉(zhuǎn)...
人間充質(zhì)干細胞 (MSCs) 的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)可誘導(dǎo)長期轉(zhuǎn)基因表達,,并為多種基因zhi liao應(yīng)用帶來巨大希望。Polybrene是實驗室研究中Zui常用的提高病毒基因轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的試劑,,但它未被批準用于人體,,并且還被證明會損害MSCs細胞的增殖和分化。因此,,優(yōu)化轉(zhuǎn)導(dǎo)方案以應(yīng)用于臨床試驗是非常有必要的,。LentiBOOST 和硫酸魚精蛋白是可替代的轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑,可以按照現(xiàn)行的GMP標準生產(chǎn),,且很容易應(yīng)用于現(xiàn)有的轉(zhuǎn)導(dǎo)方案,,并且曾被用于人類 CD34+ HSCs細胞的轉(zhuǎn)導(dǎo)研究。慢病毒載體可以將外源基因有效地整合到宿主染色體上,,從而達到持久性表達目的序列的效果,。在gan ran能力方面可有效地gan ran...
目前的基因&細胞zhi liao主要采用病毒和非病毒兩種載體形式。根據(jù)統(tǒng)計,,病毒載體約占進行臨床實驗的項目 65%,;而慢病毒因無嚴重的臨床事故出現(xiàn)成為目前相對安全的病毒載體選擇之一。慢病毒載體具有能gan ran非分裂期細胞,、容納外源性目的基因片段大,、穩(wěn)定性強、免疫原性小等特點,。大量研究表明,,相對其他病毒載體,慢病毒gan ran效率高,,更容易gan ran一些較難gan ran的組織和細胞,,其效率一般可以達到 30%-95% 以上。病毒顆的限制性攝取粒往往會降低基因或 shRNA 表達的成功率,并要求應(yīng)用更高的病毒滴度,。然而,,增加病毒數(shù)量以促進表達可能會導(dǎo)致許多細胞類型的毒性副作用,并帶來不...
在病毒附著到宿主細胞后,,病毒RNA滲透進宿主細胞,,并以此為模板,利用逆轉(zhuǎn)錄酶合成病毒cDNA,在逆轉(zhuǎn)錄和合成雙鏈DNA的過程中,,RNA的兩端都進行了復(fù)制,,產(chǎn)生了長末端重復(fù)序列(LTRs),在雙鏈的病毒DNA中,每條鏈含有U3-R-U5序列,,然后雙鏈DNA被運送到細胞核內(nèi),。新合成的逆轉(zhuǎn)錄病毒DNA整合到宿主DNA中,稱為原病毒,。原病毒在細胞周期過程中復(fù)制,,然后傳遞給子細胞。不像其他逆轉(zhuǎn)錄病毒科成員,,慢病毒可以有效地ganran不分裂的細胞,,這使它們更有吸引力用于基因zhiliao。Zuihou,,子代病毒基因組從整合的DNA轉(zhuǎn)錄到細胞質(zhì)中,。病毒粒子從質(zhì)膜出芽獲得其脂質(zhì)包膜。在出芽過程中,,病毒蛋白被...
人間充質(zhì)干細胞(MSCs)的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)可誘導(dǎo)長期轉(zhuǎn)基因表達,,并為多種基因zhiliao應(yīng)用帶來巨大希望。Polybrene是實驗室研究中Zui常用的提高病毒基因轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的試劑,,但它未被批準用于人體,,并且還被證明會損害MSCs細胞的增殖和分化。因此,,優(yōu)化轉(zhuǎn)導(dǎo)方案以應(yīng)用于臨床試驗是非常有必要的,。LentiBOOST和硫酸魚精蛋白是可替代的轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑,可以按照現(xiàn)行的GMP標準生產(chǎn),,且很容易應(yīng)用于現(xiàn)有的轉(zhuǎn)導(dǎo)方案,,并且曾被用于人類CD34+HSCs細胞的轉(zhuǎn)導(dǎo)研究。聚凝胺(polybrene)是一種陽離子聚合物,1971年研究證明它可提高逆轉(zhuǎn)錄病毒的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,。polybrene的確切作用機制尚不清楚,多認...
對于一些較難轉(zhuǎn)染的細胞,,如原代細胞、干細胞,、不分化的細胞等,,使用慢病毒載體,,能da da提高目的基因的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,且目的基因整合到宿主細胞基因組的幾率da da增加,,能夠比較方便快捷地實現(xiàn)目的基因的長期,、穩(wěn)定表達。SIRION Biotech 的首席執(zhí)行官 Christian Thirion 博士說,,SIRION 的貢獻是優(yōu)化病毒載體基因的轉(zhuǎn)導(dǎo),從而在zhi liao患者中獲得更高的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率和長期的基因表達,。此外,,通過降低生產(chǎn)細胞產(chǎn)品所需的慢病毒載體的數(shù)量,使用諸如 LentiBOOST 之類的轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑有助于降低生產(chǎn)成本,。德國 Sirion Biotech 公司研發(fā)了 LentiBOOST 慢...
影響轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的另一個關(guān)鍵參數(shù)是gan ran復(fù)數(shù)(MOI),MOI指的是每個細胞gan ran的病毒粒子個數(shù),,病毒粒子滴度以gan ran單位(IU)/mL 或 TU/mL表示。慢病毒的gan ran能力隨細胞類型的不同而不同,,因此每種不同的細胞類型需要不同的MOI,。MOI值越大,慢病毒gan ran上的可能性也越大,,gan ran效率越高,,但對細胞的毒性也越大。另外細胞需要的MOI值越大,,也說明細胞越難被轉(zhuǎn)導(dǎo),。SIRION Biotech 為研究機構(gòu)和醫(yī)院開發(fā)了一種定制的許可模式,并為臨床試驗提供良好的 GMP 材料供應(yīng)條件,。LentiBOOST 目前在美國和歐洲的多個臨床試驗中使用,。Len...