免疫沉淀（immunoprecipitation）是指利用抗體可與抗原特異性結(jié)合的特性,，將抗原（常為靶蛋白）從混合體系沉淀下來，初步分離靶蛋白的一種方法,。免疫共沉淀（coimmunoprecipitation）是一種在體外探測兩個(gè)蛋白分子間是否存在特異性相互作用的一種方法,。其原理非常簡單，如果兩個(gè)蛋白在體外體系能夠發(fā)生特異性相互作用的話,，那么當(dāng)用一種蛋白的抗體進(jìn)行免疫沉淀時(shí),，另一個(gè)蛋白也會被同時(shí)沉淀下來。與酵母雙雜交技術(shù)不同,，免疫共沉淀技術(shù)所利用的是抗原和抗體間的免疫反應(yīng)，是一種基于體外非細(xì)胞的環(huán)境中研究蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)的相互作用的方法,。
免疫沉淀技術(shù)是什么,？上海anti DYKDDDDK免疫沉淀實(shí)驗(yàn)視頻
染色質(zhì)免疫共沉淀（Chromatinimmunoprecipitation，ChIP）技術(shù)是目前公認(rèn)的研究此相互作用的選擇,，是真核生物基因表達(dá)機(jī)制研究中不可或缺的技術(shù)之一,。
它的基本原理是在活細(xì)胞狀態(tài)下，固定蛋白質(zhì)-DNA（染色質(zhì)）復(fù)合物,，并將其切斷為一定長度范圍內(nèi)的染色質(zhì)小片段,，然后通過免疫學(xué)方法（抗體親和）沉淀此復(fù)合體，特異性地富集目的蛋白結(jié)合的 DNA,，通過對目的片段的純化與后期檢測,，從而獲得蛋白質(zhì)與 DNA 相互作用的信息。
這項(xiàng)技術(shù)通過蛋白質(zhì)與DNA互作來分析目標(biāo)基因活性以及已知蛋白質(zhì)的靶基因,，被廣泛應(yīng)用于體內(nèi)轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子與靶基因啟動子上特異核苷酸序列結(jié)合方面的研究,。該技術(shù)常與DNA芯片和分子克隆技術(shù)相結(jié)合。
溫州蛋白免疫沉淀磁珠的選擇免疫沉淀技術(shù)RIP的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),。
免疫沉淀RIP實(shí)驗(yàn)中磁珠還是瓊脂糖珠的選擇取決于客戶實(shí)驗(yàn)情況,。
瓊脂糖珠海綿狀的結(jié)構(gòu) (直徑 50-150 μm) 可以結(jié)合抗體 (繼而結(jié)合靶蛋白) ，它能夠直接高效,、快速結(jié)合抗體,，而不需借助特殊的專業(yè)設(shè)備,。瓊脂糖珠呈多孔結(jié)構(gòu)，這使得它們擁有更大的表面積可與蛋白質(zhì)相互接觸,，具有更高的結(jié)合載量,。
與瓊脂糖珠不同，磁珠是固體,，抗體的結(jié)合限于磁珠的表面,。磁珠 (直徑 1-4 μm) 明顯小于瓊脂糖珠 ，盡管磁珠沒有多孔中心增加結(jié)合能力,，但每體積的磁珠數(shù)量比瓊脂糖珠多,，使磁珠擁有足夠的抗體結(jié)合表面積滿足高容量的抗體結(jié)合。
簡而言之,，瓊脂糖珠的結(jié)合能力較強(qiáng),，而磁珠在得率，可重復(fù)性以及自動化方面有明顯的優(yōu)勢,。
免疫沉淀技術(shù)（Immunoprecipitation, IP）的實(shí)驗(yàn)步驟通常包括以下幾個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)：
1. 細(xì)胞裂解：首先需要收集細(xì)胞并裂解它們,，以釋放細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)。這通常通過添加含有蛋白酶抑制劑的裂解緩沖液來完成,，以防止蛋白質(zhì)降解,。
2. 裂解物上清：裂解后的細(xì)胞混合物通常需要通過離心來去除未破碎的細(xì)胞碎片和未裂解的細(xì)胞，從而獲得上清,。
3. 抗體的添加：將特定于目標(biāo)蛋白的抗體加入到裂解物中,。這些抗體將特異性地結(jié)合到目標(biāo)蛋白上。
4. 免疫復(fù)合物的形成：抗體與目標(biāo)蛋白結(jié)合形成免疫復(fù)合物,。
5. 免疫復(fù)合物的捕獲：使用Protein A/G結(jié)合的磁珠來捕獲免疫復(fù)合物,。
6. 洗滌：捕獲免疫復(fù)合物后，需要用裂解/洗滌緩沖液多次洗滌,，以去除未結(jié)合的蛋白質(zhì)和其他污染物,。
7. 洗脫：免疫復(fù)合物可以通過加入SDS樣品緩沖液進(jìn)行洗脫，這將導(dǎo)致抗體和抗原變性并從珠子上釋放下來,，或者使用低pH緩沖液進(jìn)行溫和洗脫,，以保持蛋白質(zhì)的天然構(gòu)象。
8. 分析：洗脫后的樣品可以通過SDS-PAGE凝膠電泳,、Western blot等方法進(jìn)行分析,，以驗(yàn)證目標(biāo)蛋白的存在和狀態(tài)。
免疫沉淀技術(shù)ChIP的原理是什么,？
免疫共沉淀分析（Co-IP）與IP十分類似,，基本的技術(shù)都是采用目標(biāo)抗原特異性的固相化抗體；但I(xiàn)P的目標(biāo)是純化單一抗原,，而Co-IP旨在分離抗原及與抗原結(jié)合的蛋白質(zhì)或配體,。
在Co-IP實(shí)驗(yàn)中,，已知抗原稱為誘餌蛋白，與之結(jié)合的蛋白則稱為靶蛋白,。靶蛋白可能是一些復(fù)雜的伴侶蛋白,、信號分子、結(jié)構(gòu)蛋白,、輔助因子等,，蛋白間相互作用強(qiáng)度范圍可能介于高度瞬時(shí)和十分穩(wěn)定之間。
基本的Co-IP實(shí)驗(yàn)方案與IP相同,，實(shí)際上任何IP系統(tǒng)均可用于Co-IP,。但是，還有許多其他因素需要考慮,，例如,，結(jié)合和洗滌條件的優(yōu)化，優(yōu)化時(shí),，需要考慮到誘餌蛋白-靶蛋白的相互作用強(qiáng)度以及抗體-誘餌蛋白的親和力,。
免疫沉淀技術(shù)的綜述。溫州ChIP免疫沉淀磁珠哪個(gè)公司好用
免疫沉淀IP抗體的選擇,？上海anti DYKDDDDK免疫沉淀實(shí)驗(yàn)視頻
免疫沉淀純化所得抗原純度低一般有多種原因：
1. 非特異性蛋白污染
如果洗脫所得抗原純度較低,，則有幾種方法可以進(jìn)行優(yōu)化。在結(jié)合或洗滌緩沖液中加入去污劑或其他可以降低非特異性結(jié)合的組分,。使用普通微珠預(yù)純化樣本還可以降低非目標(biāo)分子的共純化,。此外，還可以使用無關(guān)蛋白 (如BSA) 封閉微珠 ,。
2. 抗體污染
使用蛋白A,、G或A/G的經(jīng)典免疫沉淀實(shí)驗(yàn)中會出現(xiàn)抗體與抗原共洗脫的情況,。如果共洗脫會影響下游分析,，則需要使用抗體通過共價(jià)連接固定至微珠的方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，如Pierce 直接 IP 或交聯(lián) IP 的形式,。
上海anti DYKDDDDK免疫沉淀實(shí)驗(yàn)視頻
在CYTOCH的理念中,，化學(xué)與生物的結(jié)合是提升產(chǎn)品性能的關(guān)鍵?；瘜W(xué)技術(shù)的進(jìn)步為生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域提供了更多的可能性,，使得相關(guān)實(shí)驗(yàn)結(jié)果更為靈敏、準(zhǔn)確,。為了在細(xì)胞研究領(lǐng)域取得技術(shù)性突破,，CYTOCH研發(fā)團(tuán)隊(duì)不斷嘗試將新型的化學(xué)技術(shù)與生物技術(shù)相融合。CYTOCH在細(xì)胞領(lǐng)域所進(jìn)行的已有技術(shù)的持續(xù)突破,、新技術(shù)的創(chuàng)新研發(fā),、化學(xué)與生物技術(shù)的不斷碰撞結(jié)合,，使得CYTOCH產(chǎn)品在臨床診斷、藥物研發(fā)和科研教育等領(lǐng)域都具有廣泛的應(yīng)用前景,。
在保證研發(fā)驅(qū)動力的前提下,，為確保產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定與可靠以及產(chǎn)品的使用性，CYTOCH對原料供應(yīng)商進(jìn)行嚴(yán)格審計(jì)和把關(guān),，選擇品質(zhì)優(yōu)良的原料進(jìn)行后續(xù)產(chǎn)品生產(chǎn),。 在生產(chǎn)過程中，CYTOCH對生產(chǎn)人員資質(zhì),、生產(chǎn)環(huán)境,、生產(chǎn)過程、生產(chǎn)物料進(jìn)行嚴(yán)格把控,。后續(xù)的產(chǎn)品質(zhì)檢,、入庫出庫均嚴(yán)格按照企業(yè)內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)由質(zhì)量和倉庫物流人員進(jìn)行層層把關(guān)，確保每一批出廠產(chǎn)品質(zhì)量都處于行業(yè)前端水平,。