實(shí)時(shí)熒光定量pcr儀,，由熒光定量系統(tǒng)和計(jì)算機(jī)組成,，用來監(jiān)測循環(huán)過程的熒光,。與實(shí)時(shí)設(shè)備相連的計(jì)算機(jī)收集熒光數(shù)據(jù),。數(shù)據(jù)通過開發(fā)的實(shí)時(shí)分析軟件以圖表的形式顯示,。原始數(shù)據(jù)被繪制成熒光強(qiáng)度相對于循環(huán)數(shù)的圖表。原始數(shù)據(jù)收集后可以開始分析,。實(shí)時(shí)設(shè)備的軟件能使收集到的數(shù)據(jù)進(jìn)行正常化處理來彌補(bǔ)背景熒光的差異,。正?；罂梢栽O(shè)定域值水平，這就是分析熒光數(shù)據(jù)的水平,。實(shí)時(shí)熒光定量pcr儀組成熒光定量系統(tǒng)和計(jì)算機(jī)作用,，監(jiān)測循環(huán)過程的熒光，數(shù)據(jù)形式顯示,，通過開發(fā)的實(shí)時(shí)分析,，軟件以圖表的表現(xiàn)。實(shí)時(shí)熒光定量pcr儀優(yōu)勢：樣品到達(dá)域值水平所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)稱為Ct值（限制點(diǎn)的循環(huán)數(shù)）,。域值應(yīng)設(shè)定在使指數(shù)期的擴(kuò)增效率為大,，這樣可以獲得準(zhǔn)確，可重復(fù)性的數(shù)據(jù),。如果同時(shí)擴(kuò)增的還有標(biāo)有相應(yīng)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品,，線性回歸分析將產(chǎn)生一條標(biāo)準(zhǔn)曲線，可以用來計(jì)算未知樣品的濃度,。實(shí)時(shí)熒光定量pcr儀技術(shù)原理：所謂real-timeQ-PCR技術(shù),，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基因，利用熒光信號累積實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法,。在real-time技術(shù)的發(fā)展過程中,，兩個(gè)重要的發(fā)現(xiàn)起著關(guān)鍵的作用：（1）在90年代早期，TaqDNA多聚酶的5′核酸外切酶活性的發(fā)現(xiàn),。 PCR擴(kuò)增儀又稱為PCR基因擴(kuò)增儀,、PCR核酸擴(kuò)增儀、聚合酶鏈反應(yīng)核酸擴(kuò)增儀,。上海力康高?？蒲蠵CR儀價(jià)格便宜

    PCR儀的基本原理類似于DNA的天然復(fù)制過程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物,。PCR由變性--退火--延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成：1,、模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時(shí)間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離,，使之成為單鏈,，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備,；2,、模板DNA與引物的退火（復(fù)性）：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至55℃左右,，引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對結(jié)合,；3、引物的延伸：DNA模板--引物結(jié)合物在TaqDNA聚合酶的作用下,，以dNTP為反應(yīng)原料,，靶序列為模板，按堿基配對與半保留復(fù)制原理,，合成一條新的與模板DNA鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈重復(fù)循環(huán)變性--退火--延伸三過程,，就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈"，而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板,。每完成一個(gè)循環(huán)需2～4分鐘,，2～3小時(shí)就能將待擴(kuò)目的基因擴(kuò)增放大幾百萬倍（Plateau）。到達(dá)平臺(tái)期所需循環(huán)次數(shù)取決于樣品中模板的拷貝,。在此同時(shí)認(rèn)識(shí)到蛋白質(zhì)是接受RNA的遺傳信息而合成的,。50年代Zamecnik等在形態(tài)學(xué)和分離的亞細(xì)胞組分實(shí)驗(yàn)中已發(fā)現(xiàn)微粒體（microsome）是細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)合成的部位。 上海高?？蒲蠵CR儀銷售廠家PCR儀是為了解決在體外特異性地?cái)U(kuò)增某個(gè)基因的問題,，從而滿足對核酸的體外研究和應(yīng)用。

    實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)設(shè)施設(shè)計(jì)：包括實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)裝修,、實(shí)驗(yàn)室凈化工程,、實(shí)驗(yàn)室供排水工程,、實(shí)驗(yàn)室電路系統(tǒng)。1）實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)裝修需要潔凈天花,、地板,、隔斷，合理設(shè)置緩存間及配置凈化門,、觀察窗,、傳遞窗等。2）實(shí)驗(yàn)室凈化工程實(shí)驗(yàn)室應(yīng)配備單獨(dú)送排風(fēng)設(shè)施,，試劑配置區(qū),、核酸提取區(qū)和擴(kuò)增分析區(qū)應(yīng)配備凈化系統(tǒng)。3）實(shí)驗(yàn)室供排水工程包括非手動(dòng)水龍頭,、不銹鋼或PP水池和緊急淋浴器及供排水管線管路,。4）實(shí)驗(yàn)室電路系統(tǒng):根據(jù)儀器的功率配置合適的功率，特別注意高壓滅菌鍋的功率,，注意實(shí)驗(yàn)室用電安全,。5）配備適用的應(yīng)急器材，如應(yīng)急照明設(shè)備,、消防器材,、意外事故處理器材等。實(shí)驗(yàn)室儀器及設(shè)備：1）更衣室儀器及設(shè)備：更衣柜或掛衣架,、鞋柜以及消毒器和烘干器,。2）配液室儀器及設(shè)備：佰倫超凈工作臺(tái)、冰箱,、小型離心機(jī),、旋渦振蕩器、微量移液器等,。3）樣品處理室儀器及設(shè)備：離心機(jī)、組織研磨機(jī),、Ⅱ級生物安全柜,、恒溫水浴鍋、冰柜等,、可移動(dòng)紫外消毒器,。4）核酸提取室儀器及設(shè)備：核酸提取儀、Ⅱ級生物安全柜,、恒溫水浴鍋,、小型離心機(jī)、微量移液器,、可移動(dòng)紫外消毒器等,。5）擴(kuò)增分析區(qū)儀器及設(shè)備：熒光定量PCR儀,、電腦、打印機(jī),、不間斷電源,、可移動(dòng)紫外消毒器等。

    PCR基因擴(kuò)增法在遺傳性疾病產(chǎn)前診斷中的應(yīng)用,，遺傳病是由于遺傳物變化而引起的機(jī)體某一功能或缺陷或異常所致的疾病,，其根本變化在于遺傳物質(zhì)。苯西酮尿癥（PKU）是一種常染色體隱性遺傳病,，患者因苯丙酸羥化酶轉(zhuǎn)化為酷氨酸,，使苯氨酸及其代謝物在體內(nèi)大量蓄積，出現(xiàn)腦組損傷及不可逆性智力發(fā)育障礙,。PKU患者出生時(shí)正常,，新生兒一經(jīng)確診為PKU停止母乳喂養(yǎng)采用低苯丙氨酸欽食療法8—10年，可使患者智力水平發(fā)展維持正常,。由于低苯丙氨酸欽食非常昂貴,，一般家庭難以承受，因此,，施行產(chǎn)前診斷,，防止患兒出生是比較好的選擇。PAH只在肝細(xì)胞中表達(dá),，不能用血細(xì)胞,，成纖維細(xì)胞、羊水,、絨毛細(xì)胞進(jìn)行酶活性分析,，只能進(jìn)行基因診斷。PKU的基因變化并非全部PAH基因的缺失,，而是以點(diǎn)突變?yōu)橹饕憩F(xiàn)形式,，而且其突變位點(diǎn)很多。必須使用PCR擴(kuò)增結(jié)合,，ASO,，SSCP或使用擴(kuò)增片段長度多態(tài)性分析（AmpFLA）進(jìn)行檢測，這些技術(shù)都較復(fù)雜,，檢驗(yàn)人員須經(jīng)專業(yè)培訓(xùn),。 熒光定量PCR是近年發(fā)展起來的實(shí)時(shí)定量檢測特定核酸技術(shù),是核酸探針,熒光共振能量傳遞和PCR技術(shù)的有機(jī)結(jié)合.

力康生物醫(yī)療集研發(fā)、制造,、銷售,、服務(wù)為一體，專注于為您提供完善可靠的數(shù)字化醫(yī)療及實(shí)驗(yàn)室解決方案,?？偛吭O(shè)于香港,，員工千余人，產(chǎn)品遍布全球百多個(gè)地區(qū),。集團(tuán)擁有多家專業(yè)設(shè)備研發(fā)生產(chǎn)工廠,，青浦工業(yè)園區(qū)是集團(tuán)研發(fā)制造基地，力新儀器（上海）有限公司是集團(tuán)下屬銷售運(yùn)營中心,。投身醫(yī)療領(lǐng)域三十年,，力康已是中國頗具規(guī)模的醫(yī)療器械制造商和供應(yīng)商。多領(lǐng)域數(shù)字化解決方案,、多樣化智能操作系統(tǒng),、準(zhǔn)確的檢測結(jié)果、貼心的用戶體驗(yàn),，使 “力康 Heal Force” 品牌享譽(yù)國內(nèi)外,。PCR實(shí)驗(yàn)室分為四個(gè)單獨(dú)工作區(qū)域:試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū),標(biāo)本制備區(qū),擴(kuò)增反應(yīng)混合物配置和擴(kuò)增區(qū),擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū).上海高校科研PCR儀銷售廠家

PCR擴(kuò)增儀通常由熱蓋部件,、熱循環(huán)部件,、傳動(dòng)部件、控制部件和電源部件等部分組成,。上海力康高?？蒲蠵CR儀價(jià)格便宜

原位PCR儀：用于從細(xì)胞內(nèi)靶DNA的定位分析的細(xì)胞內(nèi)基因擴(kuò)增儀稱作原位PCR儀。如病源基因在細(xì)胞的位置或目的基因在細(xì)胞內(nèi)的作用位置等,。是保持細(xì)胞或組織的完整性,，使PCR反應(yīng)體系滲透到組織和細(xì)胞中，在細(xì)胞的靶DNA所在位置上進(jìn)行基因擴(kuò)增,。不但可以檢測到靶DNA,，又能標(biāo)出靶序列在細(xì)胞內(nèi)的位置，對于在分子和細(xì)胞水平上研究疾病的發(fā)病機(jī)理和臨床過程及病理的轉(zhuǎn)變有重大的實(shí)用價(jià)值,。主要應(yīng)用于臨床,、科研。原位PCR儀,主要應(yīng)用于：檢測外源性基因片段,，提高檢出率,，集中在病毒的檢查上，如HIV,、HPV、HBV,、CMV等,；觀察病原體在體內(nèi)分布規(guī)律；內(nèi)源性基因片段,，如人體的單基因病,、重組基因,、易位的染色體、Ig的mRN段,、基因片段等,；檢測導(dǎo)入基因；遺傳病基因檢測如β－地中海貧血,。實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀：在普通PCR儀的基礎(chǔ)上增加一個(gè)熒光信號采集系統(tǒng)和計(jì)算機(jī)分析處理系統(tǒng)的PCR儀稱作熒光定量PCR儀,。其PCR擴(kuò)增原理和普通PCR儀擴(kuò)增原理相同，只是PCR擴(kuò)增時(shí)加入的引物是利用同位素,、熒光素等進(jìn)行標(biāo)記,，使用引物和熒光探針同時(shí)與模板特異性結(jié)合擴(kuò)增。擴(kuò)增的結(jié)果通過熒光信號采集系統(tǒng)實(shí)時(shí)采集信號連接輸送到計(jì)算機(jī)分析處理系統(tǒng)得出量化的實(shí)時(shí)結(jié)果輸出,。把這種PCR儀叫做實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀,。上海力康高校科研PCR儀價(jià)格便宜

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