完備的實(shí)驗(yàn)室配套設(shè)施是保證實(shí)驗(yàn)工作的必要條件,,應(yīng)根據(jù)各個(gè)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的不同配備相應(yīng)的設(shè)備和儀器,,如超凈工作臺(tái)、離心機(jī),、加樣器等,。實(shí)驗(yàn)室是科學(xué)的搖籃,,是科學(xué)研究的基地,科技發(fā)展的源泉,,對(duì)科技發(fā)展起著非常重要的作用,。PCR實(shí)驗(yàn)室規(guī)范的操作:(1)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)人員必須進(jìn)行上崗培訓(xùn),經(jīng)培訓(xùn)合格后才能從事臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)的工作;(2)在實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中,,操作者必須戴手套,,并經(jīng)常更換。此外,,操作中使用一次性帽子也是一個(gè)有效地防止污染的措施;(3)清潔工作及時(shí),、正確。實(shí)驗(yàn)工作結(jié)束后,,必須立即對(duì)本區(qū)進(jìn)行清潔,。除常規(guī)的消毒液體對(duì)表面進(jìn)行擦拭消毒或紫外線燈的照射消毒外,對(duì)一些實(shí)驗(yàn)設(shè)備還應(yīng)進(jìn)行高壓消毒處理,。嚴(yán)格規(guī)范管理要求(1)嚴(yán)格控制進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室的人員,。與實(shí)驗(yàn)無(wú)關(guān)的人員不得隨意進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室,有條件的情況下要設(shè)置的通道和進(jìn)出整個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)的門(mén);(2)在各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域使用帶有明顯區(qū)別標(biāo)志的工作服(如不同顏色),,當(dāng)工作人員離開(kāi)時(shí)不得將本區(qū)的工作服帶至其它區(qū)域;(3)盡量減少在實(shí)驗(yàn)區(qū)內(nèi)不必要的走動(dòng)以減少交叉污染的可能性,。(4)擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)是較主要的擴(kuò)增產(chǎn)物污染來(lái)源,廢液不能在實(shí)驗(yàn)室中傾倒,,必須經(jīng)消毒液浸泡消毒后在遠(yuǎn)離實(shí)驗(yàn)室的地方棄掉,。PCR技術(shù)不僅可用于基礎(chǔ)研究,還適用于日常的臨床診斷、法醫(yī)學(xué)調(diào)查和農(nóng)業(yè)生物技術(shù)研究,。上海力康實(shí)驗(yàn)室PCR儀批發(fā)價(jià)格
在凈化車(chē)間內(nèi)工作的人員應(yīng)穿著符合要求的工作服,。工作服的選材,、式樣及穿戴方式應(yīng)與生產(chǎn)操作和空氣潔凈度級(jí)別要求相適應(yīng),并不得混用,。潔凈工作服的質(zhì)地應(yīng)光滑,、不產(chǎn)生靜電,、不脫落纖維和顆粒性物質(zhì),。無(wú)菌工作服必須包蓋全部毛發(fā)、胡須及腳部,,并能阻留人體脫落物,。不同空氣潔凈度級(jí)別使用的工作服應(yīng)當(dāng)分別清洗、整理,,必要時(shí)消毒或滅菌,。工作服洗滌、滅菌時(shí)不應(yīng)帶入附加的顆粒物質(zhì),。工作服應(yīng)制定清洗周期,。進(jìn)入各個(gè)區(qū)域必須嚴(yán)格按照單一方向進(jìn)行,不同的工作區(qū)域使用不同的工作服(例如不同的顏色),。工作人員離開(kāi)時(shí),,不得將工作服帶出。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立,、執(zhí)行人員進(jìn)出潔凈區(qū)的清潔程序和管理制度,,人員清潔程序合理。實(shí)驗(yàn)室需要至少配備兩名專(zhuān)業(yè)實(shí)驗(yàn)員,,能夠處理樣品,、提取核酸及核酸擴(kuò)增,熟練掌握超凈工作臺(tái),、生物安全柜,、自動(dòng)提取儀、實(shí)時(shí)熒光定量PCR的使用,,加強(qiáng)生物安全方面的培訓(xùn),,避免實(shí)驗(yàn)室污染。國(guó)產(chǎn)梯度PCR儀參考價(jià)格PCR儀被大量運(yùn)用于醫(yī)學(xué),、生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中,。
一對(duì)引物的Tm值相差盡量不超過(guò)2~3攝氏度,同時(shí)引物和產(chǎn)物的Tm值也不要相差太大,,20攝氏度范圍內(nèi)較好,。④引物的額外序列與退火溫度若有額外的序列信息要加到引物中,例如T7RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn),、限制酶切位點(diǎn)或者GC發(fā)夾結(jié)構(gòu)可以使用加長(zhǎng)的引物,。一般說(shuō)來(lái),,引物5’端添加無(wú)關(guān)序列不會(huì)影響引物特異序列的退火。有時(shí)候,,引物中添加了大量與模板不配對(duì)的堿基,,可以在較低退火溫度的條件下進(jìn)行4到5個(gè)擴(kuò)增循環(huán);然后在假定引物5’端序列已經(jīng)加入到模板中,,計(jì)算得出的退火溫度下進(jìn)行其余的循環(huán),。在引物上添加限制酶位點(diǎn)時(shí)一個(gè)重要的考慮是大多數(shù)限制酶的有效切割要求在它們的識(shí)別序列的5’端有2至3個(gè)非特異的額外堿基,這樣就會(huì)增加引物的非模板特異序列的長(zhǎng)度,。長(zhǎng)引物序列的另一個(gè)缺點(diǎn)是影響溶解溫度的精確計(jì)算,,而這對(duì)于確定PCR反應(yīng)時(shí)的退火溫度又是必須的。對(duì)于低于20個(gè)堿基的引物,,Tm值可以根據(jù)Tm=4(G+C)+2(A+T)計(jì)算,。而對(duì)于較長(zhǎng)的引物,Tm值需要考慮動(dòng)力學(xué)參數(shù),、從“近鄰位”的計(jì)算方式得到,,現(xiàn)有的PCR引物設(shè)計(jì)軟件大多數(shù)都采用這種方式。⑤引物的3’末端核苷酸組成引物3’末端和模板的堿基完全配對(duì)對(duì)于獲得好的結(jié)果是非常重要的,。
它能降解特異性熒光記探針,,因此使得間接的檢測(cè)PCR產(chǎn)物成為可能。(2)此后熒光雙標(biāo)記探針的運(yùn)用使在一密閉的反應(yīng)管中能實(shí)時(shí)地監(jiān)測(cè)反應(yīng)全過(guò)程,。這兩個(gè)發(fā)現(xiàn)的結(jié)合以及相應(yīng)的儀器和試劑的商品化發(fā)展導(dǎo)致real-timeQ-PCR方法在研究工作中的運(yùn)用,。PCR反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)方式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,,終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)方式生成模板,,從而進(jìn)入平臺(tái)期。在傳統(tǒng)的PCR中,,常用凝膠電泳分離并用熒光染色來(lái)檢測(cè)PCR反應(yīng)的終擴(kuò)增產(chǎn)物,,因此用此終點(diǎn)法對(duì)PCR產(chǎn)物定量存在不可靠之處。在real-timeQ-PCR中,,對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過(guò)程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的監(jiān)測(cè)和連續(xù)地分析擴(kuò)增相關(guān)的熒光信號(hào),,隨著反應(yīng)時(shí)間的進(jìn)行,監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)的變化可以繪制成一條曲線,。在PCR反應(yīng)早期,,產(chǎn)生熒光的水平不能與背景明顯地區(qū)別,而后熒光的產(chǎn)生進(jìn)入指數(shù)期,、線性期和終的平臺(tái)期,,因此可以在PCR反應(yīng)處于指數(shù)期的某一點(diǎn)上來(lái)檢測(cè)PCR產(chǎn)物的量,并且由此來(lái)推斷模板初的含量,。為了便于對(duì)所檢測(cè)樣本進(jìn)行比較,,在real-timeQ-PCR反應(yīng)的指數(shù)期,,首先需設(shè)定一定熒光信號(hào)的域值,一般這個(gè)域值(threshold)是以PCR反應(yīng)的前15個(gè)循環(huán)的熒光信號(hào)作為熒光本底信號(hào)(baseline),。 DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑,。
PCR基因擴(kuò)增法在遺傳性疾病產(chǎn)前診斷中的應(yīng)用,遺傳病是由于遺傳物變化而引起的機(jī)體某一功能或缺陷或異常所致的疾病,,其根本變化在于遺傳物質(zhì),。苯西酮尿癥(PKU)是一種常染色體隱性遺傳病,患者因苯丙酸羥化酶轉(zhuǎn)化為酷氨酸,,使苯氨酸及其代謝物在體內(nèi)大量蓄積,,出現(xiàn)腦組損傷及不可逆性智力發(fā)育障礙。PKU患者出生時(shí)正常,,新生兒一經(jīng)確診為PKU停止母乳喂養(yǎng)采用低苯丙氨酸欽食療法8—10年,可使患者智力水平發(fā)展維持正常,。由于低苯丙氨酸欽食非常昂貴,,一般家庭難以承受,因此,,施行產(chǎn)前診斷,,防止患兒出生是比較好的選擇。PAH只在肝細(xì)胞中表達(dá),,不能用血細(xì)胞,,成纖維細(xì)胞、羊水,、絨毛細(xì)胞進(jìn)行酶活性分析,,只能進(jìn)行基因診斷。PKU的基因變化并非全部PAH基因的缺失,,而是以點(diǎn)突變?yōu)橹饕憩F(xiàn)形式,,而且其突變位點(diǎn)很多。必須使用PCR擴(kuò)增結(jié)合,,ASO,,SSCP或使用擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析(AmpFLA)進(jìn)行檢測(cè),這些技術(shù)都較復(fù)雜,,檢驗(yàn)人員須經(jīng)專(zhuān)業(yè)培訓(xùn),。 PCR擴(kuò)增儀通常由熱蓋部件、熱循環(huán)部件,、傳動(dòng)部件,、控制部件和電源部件等部分組成。上海力康梯度PCR儀價(jià)格比較
PCR技術(shù)不但能檢測(cè)基因的突變,而且能準(zhǔn)確檢測(cè)特定基因的表達(dá)量,可據(jù)此進(jìn)行早期診斷,分型,分期和預(yù)后判斷.上海力康實(shí)驗(yàn)室PCR儀批發(fā)價(jià)格
移動(dòng)箱式PCR實(shí)驗(yàn)室嚴(yán)格按照生物安全實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)準(zhǔn)建造,,配備有各類(lèi)儀器設(shè)備,,注重保障實(shí)驗(yàn)人員安全,,同時(shí)具備機(jī)動(dòng)靈活、反應(yīng)迅速等特點(diǎn),,協(xié)助前線醫(yī)院開(kāi)展檢測(cè)工作,,為防控奉獻(xiàn)綿薄之力。由于集裝箱在出廠前已經(jīng)完成了單個(gè)箱體里面配置的所有安裝,,水,、電、風(fēng),、廢水和廢氣排放等系統(tǒng)已經(jīng)在箱體配備,,同時(shí)保證了外面環(huán)境的安全。在現(xiàn)場(chǎng)基礎(chǔ)平整的條件下,,只需要簡(jiǎn)單的進(jìn)行箱體吊裝安放,、給水和用電對(duì)接即可——在極端情況下甚至可以在無(wú)水無(wú)電的情況下短時(shí)運(yùn)行,真正做到組裝迅速,。對(duì)接安裝本身不需要非常專(zhuān)業(yè)的人員,,常規(guī)的疾控維修人員或工程人員就可以完成對(duì)接。箱體安放位置一般在室外,,對(duì)于病人的隔離或控制病毒擴(kuò)散都是有利的,。室外空氣流通快,不會(huì)像室內(nèi)空氣那樣高度聚集及停留產(chǎn)生氣溶膠導(dǎo)致病毒擴(kuò)散的風(fēng)險(xiǎn)加大,,箱式PCR實(shí)驗(yàn)室有效的避免了聚集性和傳染性,,當(dāng)箱式PCR實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部環(huán)境受到污染時(shí),可以快速通過(guò)送排風(fēng)系統(tǒng)置換新鮮的空氣達(dá)到實(shí)驗(yàn)室凈化的要求,。箱式PCR實(shí)驗(yàn)室可以重復(fù)使用,,當(dāng)結(jié)束以后,經(jīng)過(guò)專(zhuān)業(yè)人員的消毒,,可以重新運(yùn)到疾控中心,、醫(yī)院、港口或者第三方檢測(cè)等單位再次使用,,也可經(jīng)過(guò)專(zhuān)業(yè)存放和維護(hù),,待需要時(shí)重新投入使用。上海力康實(shí)驗(yàn)室PCR儀批發(fā)價(jià)格
力新儀器(上海)有限公司是一家三類(lèi):6815注射穿刺器械,,6821醫(yī)用電子儀器設(shè)備(不含植入類(lèi)重點(diǎn)監(jiān)管),,6822醫(yī)用光學(xué)器具、儀器及內(nèi)窺鏡設(shè)備(不含植入類(lèi)重點(diǎn)監(jiān)管),,6823醫(yī)用超聲儀器及有關(guān)設(shè)備,,6824醫(yī)用激光儀器設(shè)備,6825醫(yī)用高頻儀器設(shè)備,6826物理***及康復(fù)設(shè)備,,6828醫(yī)用磁共振設(shè)備,,6830醫(yī)用x射線設(shè)備,6832醫(yī)用高能射線設(shè)備,,6833醫(yī)用核素設(shè)備,,6845體外循環(huán)及血液處理 設(shè)備,6854手術(shù)室,、急救室,、診療室設(shè)備及器具,6858醫(yī)用冷療,、低溫,、冷藏設(shè)備及器具,6864醫(yī)用衛(wèi)生材料及敷料,,6866醫(yī)用高分子材料及制品(不含重點(diǎn)監(jiān)管),,6870軟件,6877介入器材(不含重點(diǎn)監(jiān)管)***的公司,,致力于發(fā)展為創(chuàng)新務(wù)實(shí),、誠(chéng)實(shí)可信的企業(yè)。力新儀器作為三類(lèi):6815注射穿刺器械,,6821醫(yī)用電子儀器設(shè)備(不含植入類(lèi)重點(diǎn)監(jiān)管),6822醫(yī)用光學(xué)器具,、儀器及內(nèi)窺鏡設(shè)備(不含植入類(lèi)重點(diǎn)監(jiān)管),,6823醫(yī)用超聲儀器及有關(guān)設(shè)備,6824醫(yī)用激光儀器設(shè)備,,6825醫(yī)用高頻儀器設(shè)備,,6826物理***及康復(fù)設(shè)備,6828醫(yī)用磁共振設(shè)備,,6830醫(yī)用x射線設(shè)備,,6832醫(yī)用高能射線設(shè)備,6833醫(yī)用核素設(shè)備,,6845體外循環(huán)及血液處理 設(shè)備,,6854手術(shù)室、急救室,、診療室設(shè)備及器具,,6858醫(yī)用冷療、低溫,、冷藏設(shè)備及器具,,6864醫(yī)用衛(wèi)生材料及敷料,6866醫(yī)用高分子材料及制品(不含重點(diǎn)監(jiān)管),6870軟件,,6877介入器材(不含重點(diǎn)監(jiān)管)***的企業(yè)之一,,為客戶提供良好的數(shù)字化手術(shù)室,實(shí)驗(yàn)室儀器,,新生兒科設(shè)備,,ICU重癥產(chǎn)品。力新儀器繼續(xù)堅(jiān)定不移地走高質(zhì)量發(fā)展道路,,既要實(shí)現(xiàn)基本面穩(wěn)定增長(zhǎng),,又要聚焦關(guān)鍵領(lǐng)域,實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)型再突破,。力新儀器始終關(guān)注醫(yī)藥健康行業(yè),。滿足市場(chǎng)需求,提高產(chǎn)品價(jià)值,,是我們前行的力量,。