外泌體是一種存在于細胞外的多囊泡體,,可通過細胞內(nèi)吞泡膜向內(nèi)凹陷形成多泡內(nèi)涵體,,內(nèi)涵體與細胞膜融合后釋放其中的小囊泡,。外泌體的直徑在40-110nm之間,其中包含RNA,、蛋白質(zhì),、microRNA、DN段等多種物質(zhì),,存在于血液,、唾液、尿液,、腦脊液和母乳等多種體液中,。外泌體從發(fā)現(xiàn)至今已有30多年的歷史,雖然較初被認為可能是細胞的“垃圾”,,所以才被排出來,,但是近年來研究表明外泌體具有功能活性并可進行細胞間信息傳遞。如今,,研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)外泌體在抗原提呈細胞中呈遞抗原程中、一些病癥細胞發(fā)生的發(fā)展,、神經(jīng)細胞信號轉(zhuǎn)導過程中都發(fā)揮著重要作用,。外泌體提?。褐貜碗x心操作還有可能對囊泡造成損害,從而降低其質(zhì)量,。南昌外泌體提取試劑產(chǎn)品介紹
1983年,,外泌體初次于綿羊網(wǎng)織紅細胞中被發(fā)現(xiàn),1987年Johnstone將其命名為“exosome”,。多種細胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體,。其主要來源于細胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,經(jīng)多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中,。所有培養(yǎng)的細胞類型均可分泌外泌體,,且外泌體天然存在于體液中,包括血液,、唾液,、尿液、腦脊液和乳汁中,。有關他們分泌和攝取及其組成,、“運載物”和相應功能的精確分子機制剛剛開始研究。外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡,,參與細胞間通訊,,對外泌體的研究興趣日益增長,,無論是研究其功能還是了解如何將其用于微創(chuàng)診斷的開發(fā),。如何高效地提取外泌體是實現(xiàn)這項新興液體活檢技術臨床常規(guī)化應用的關鍵唐山外泌體提取試劑供應商超濾離心法簡單高效,且不影響外泌體的生物活性,,是提取細胞外泌體的一種新方法,。
外泌體是一種存在于細胞外的多囊泡體,可通過細胞內(nèi)吞泡膜向內(nèi)凹陷形成多泡內(nèi)涵體,,內(nèi)涵體與細胞膜融合后釋放其中的小囊泡,。外泌體的直徑在40-110nm之間,其中包含RNA,、蛋白質(zhì),、microRNA等多種物質(zhì),存在于血液,、唾液,、尿液、腦脊液和母乳等多種體液中,。外泌體從發(fā)現(xiàn)至今已有30多年的歷史,,雖然較初被認為可能是細胞的“垃圾”,所以才被排出來,但是近年來研究表明外泌體具有功能活性并可進行細胞間信息傳遞,。如今,,研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)外泌體在抗原提呈細胞中呈遞抗原程中、一些病癥細胞發(fā)生的發(fā)展,、神經(jīng)細胞信號轉(zhuǎn)導過程中都發(fā)揮著重要作用,。利用化合物沉淀將法外泌體沉淀出來。
這一特性已被應用于開發(fā)心血管疾病,,神經(jīng)系統(tǒng)疾病和一些病癥的分子診斷方法,,也在肝腎肺相關疾病中進行研發(fā)測試。將沉淀物用PBS緩沖液進行懸浮,,使外泌體懸浮于液體上層,,外泌體與神經(jīng)退行性疾病:外泌體可能促進或限制大腦中未折疊和異常折疊的蛋白質(zhì)的聚集,。AD病人腦脊液外泌體中均可檢測到Tau和Aβ蛋白,。類似的現(xiàn)象也在PD和ALS疾病中發(fā)現(xiàn)。PD病人腦脊液外泌體可檢測到α-synuclein,,ALS病人外泌體中也可以檢測到SOD1或TDP-43,。外泌體與疾病診斷(應用潛能):外泌體生成機制表明,通過分析外泌體的組分,,可以幫助識別其來源的細胞類型,。用于外泌體提取的體液收集注意事項:選擇血清還是血漿?推薦大多數(shù)研究選擇血漿,。
外泌體因諾貝爾醫(yī)學獎而被眾人知曉,,也因其作為生命信息傳遞者,在體液中普遍存在及易獲得性等特點被譽為液體活檢"新貴",,成為疾病的精確診斷和治病研究的熱點,,尤其是在一些病癥研究領域[。外泌體作為細胞間通信載體的作用現(xiàn)在已被普遍接受,。外泌體包含胞質(zhì)環(huán)境中富含的DNA,,RNA,蛋白質(zhì)和其它分析物,,研究表明,,外泌體中的運轉(zhuǎn)RNA和蛋白質(zhì)與一些病癥的生長密切相關,有望作為診斷標志物,。研究發(fā)現(xiàn)Vps4A是一個外泌體的重要調(diào)控因子,,與肝病的發(fā)生有著密切的關系,Vps4A基因的表達下調(diào)肝病的發(fā)生及轉(zhuǎn)移相關,。通過microRNA高通量測序發(fā)現(xiàn)Vps4A基因能導致外泌體分泌肝病相關的重要microRNA,,與肝病的發(fā)生密切相關,。超速離心法是目前外泌體相關文章中的主流方法,由于離心步驟繁瑣,。太原外泌體提取試劑廠家現(xiàn)貨
外泌體的提取方法:超濾離心,。南昌外泌體提取試劑產(chǎn)品介紹
用于外泌體提取的體液收集注意事項:1、抽血技巧,。操作要輕柔迅速。試管可翻轉(zhuǎn)8-10次使樣本與抗凝劑混勻,,避免劇烈搖晃,。混勻后,,將試管固定垂直放置于離心分離器,,在頂部記錄抽血的準確時間,因為抽血與離心之間的時間間隔可能是一個影響因素,。外泌體在抽血后30分鐘內(nèi)是比較穩(wěn)定的,,若時間過長將導致外泌體數(shù)量增加。血小板極易因抽血時的物理因素而并釋放出外泌體,,其中包括接觸,、壓力、切力,。2,、抽血時間。除了血液黏度,,體內(nèi)血液的各項指標在1天中變化很大,。生理節(jié)律會對血小板的產(chǎn)生很大的影響。白細胞的募集和循環(huán)系統(tǒng)中促炎細胞和細胞會隨時間變化,。大量的具有特殊表面分子的微粒也被證明會隨時間變化,。目前尚無設計較好的實驗對證實不同時間血液中外泌體的變化,故應在相同的時間采集樣本,。目前飲食是否會對EV產(chǎn)生影響尚未可知,,但是由于脂蛋白可運載RNA且食物的攝取可以影響循環(huán)脂蛋白顆粒的類型、數(shù)量和作用,,故抽血可在較后一次用餐后一段確定的時間進行,。南昌外泌體提取試劑產(chǎn)品介紹