PAS染色試劑配制及染色方法:1.材料與方1.1 實(shí)驗(yàn)材料新鮮小白鼠肝臟,、腎臟標(biāo)本各30例,,均來自我室實(shí)驗(yàn)材料。1.2 主要試劑1.2.1 AAF固定液又稱酒精醋酸福爾馬林混合固定液,其配方:無水乙醇80mL,,冰醋酸5mL,、甲醛10mL,。1.2.2 Carnoy固定液 氯仿300mL,,冰醋酸100mL,95%酒精600mL,。1.2.3 過碘酸溶液 0.5g過碘酸(HIO)溶于100mL蒸餾水或者70%酒精溶液中,,或者按如下配方配制:過碘酸0.8g,95%乙醇70mL,,醋酸鈉0.27g,,水20mL。待溶解后置于4℃冰箱避光保存,。1.2.4 無色品紅液(Schiff氏液) 在三角燒內(nèi)加入蒸餾水500mL,,煮沸后,,在保持微沸的情況下,,加入堿性品紅2.5g,,并不斷搖動(dòng)約5min(勿使之沸騰),使堿性品紅徹底溶解(溶解液為深紅色),。冷卻到50℃時(shí),,過濾,加入1N鹽酸50mL,,再待冷卻至25℃時(shí)加入偏重亞硫酸鈉2.5g,,塞住瓶口,搖動(dòng)容器以充分混合(此時(shí)顏色明顯變淡),,然后避光放置或冰箱內(nèi)24h切出的石蠟切片要好,,不能有皺褶或者刀痕,切片不能太厚,。江蘇品質(zhì)好的糖原染色試劑盒哪家便宜
糖元染色試劑盒細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面,。細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分普遍,主要包括。①細(xì)胞核,、染色體以及基因表達(dá)的研究,。②生物膜與細(xì)胞器的研究。③細(xì)胞骨架體系的研究,。④細(xì)胞增殖及其調(diào)控,。⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控。⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化,。⑧細(xì)胞工程,。PAS染色,全稱過碘酸雪夫染色(PeriodicAcid-SchiffStain),,主要用來顯示糖原和其他多糖物質(zhì),,因此也稱作糖原染色。另外,,此染色方法還可以顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì),,以及軟骨、垂體,、色素,、淀粉樣物質(zhì)、基底膜,、霉菌等,。PAS法的檢測(cè)原理在于:過碘酸(也成為高碘酸)是一種強(qiáng)氧化劑江蘇提供糖原染色試劑盒進(jìn)貨價(jià)擁有千錘百煉的專業(yè)人才隊(duì)伍,保證實(shí)驗(yàn)快速,、有效的完成,。
PAS染色的臨床意義:1.紅細(xì)胞系統(tǒng):①紅血病或紅白血病時(shí)幼紅細(xì)胞可呈陽性反應(yīng),,有時(shí)陽性反應(yīng)幼紅細(xì)胞的百分比增高,陽性反應(yīng)的程度也很強(qiáng),。有時(shí)紅細(xì)胞也呈陽性反應(yīng),。②缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙性貧血(又稱地中海貧血)以及骨髓增生異常綜合征時(shí)幼紅細(xì)胞可呈陽性反應(yīng),,有時(shí)陽性反應(yīng)幼紅細(xì)胞的百分比也較高,。有時(shí)紅細(xì)胞也可呈陽性反應(yīng)。③巨幼細(xì)胞性貧血,、溶血性貧血,、再生障礙性貧血和白血病等疾病時(shí),幼紅細(xì)胞為陰性反應(yīng),,有時(shí) 個(gè)別幼紅細(xì)胞呈陽性反應(yīng)
糖原染色是病理學(xué)中常規(guī)的染色方法之一,,McManus在1946年較先使用高碘酸-雪夫技術(shù)顯示黏蛋白,該法常用來顯示糖原和其他多糖,,該染色試劑盒不僅能夠顯示糖原,,還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)以及軟骨、垂體,、霉菌,、色素、淀粉樣物質(zhì),、基底膜等,。過碘酸(又稱高碘酸)是一種強(qiáng)氧化劑,它能氧化糖類及有關(guān)物質(zhì)中的1,,2-乙二醇基,,使之變?yōu)槎┎籗chiff試劑能結(jié)合成一種品紅化合物,,產(chǎn)生紫紅色,。由于高碘酸還可氧化細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì),使用時(shí)應(yīng)注意選擇好高碘酸濃度和氧化時(shí)間,,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于過氧化,,這是很關(guān)鍵的步驟。PAS技術(shù)是很少可檢測(cè)不同種類的黏液物質(zhì)(如糖原,、黏蛋白和糖蛋白)的方法,,但PAS技術(shù)卻不能區(qū)別黏蛋白和糖原。若要冸確鑒別黏液物質(zhì)(如黏蛋白或糖原),,需加入糖原消化步驟,。大多數(shù)情冴下可用α–淀粉酶或麥芽淀粉酶來催化糖原的糖苷鍵水解,形成水溶性的雙糖-麥芽糖,,在應(yīng)用PAS技術(shù)之前將糖原從組織切片上除去,。人類的唾液被認(rèn)為是消化糖原的一種有效手段,,但是出于安全以及缺乏標(biāo)冸唾液的考慮,不主張應(yīng)用唾液切取材料時(shí)刀要銳利,,避免因擠壓細(xì)胞使其受到損傷,。
糖原染色在使用過程中需要注意以下幾個(gè)方面:盡可能選取小塊新鮮組織及時(shí)固定。糖原易溶于水,,在酶的作用下很容易分解葡萄糖,,更易溶于水,,固定之前決不能用水或生理鹽水等浸洗,。應(yīng)避免用水溶性固定液,宜采用酒精性固定液,,如Carnoy液,,能較好地保存糖原,但有使糖原流動(dòng)到細(xì)胞一側(cè)的現(xiàn)象,,多數(shù)人認(rèn)為是由于固定劑把細(xì)胞內(nèi)的糖原推向固定劑對(duì)組織浸透的方向而造成,。其他組織應(yīng)用中性福爾馬林固定為佳。組織在4℃左右溫度內(nèi)固定與保存,,是針對(duì)糖的性質(zhì)和避免糖原溶于水而采取的相應(yīng)措施,。乙醇能沉淀白蛋白、球蛋白,,亦能 白和糖原沉淀,,但仍可溶于水,因此較好不單獨(dú)使用乙醇固定,,以乙醇為溶劑的混合固定液固定為佳推薦用于骨和軟骨的染色,。江蘇提供糖原染色試劑盒單價(jià)
在染色過程中較好不要在玻片上貼標(biāo)簽紙。江蘇品質(zhì)好的糖原染色試劑盒哪家便宜
糖原染色是病理學(xué)中常規(guī)的染色方法之一,,McManus在1946年較先使用高碘酸-雪夫技術(shù)顯示黏蛋白,,該法常用來顯示糖原和其他多糖,該染色試劑盒不僅能夠顯示糖原,,還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)以及軟骨,、垂體、霉菌,、色素,、淀粉樣物質(zhì)、基底膜等,。過碘酸(又稱高碘酸)是一種強(qiáng)氧化劑,,它能氧化糖類及有關(guān)物質(zhì)中的1,2-乙二醇基,,使之變?yōu)槎?,醛不Schiff試劑能結(jié)合成一種品紅化合物,,產(chǎn)生紫紅色。由于高碘酸還可氧化細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì),,使用時(shí)應(yīng)注意選擇好高碘酸濃度和氧化時(shí)間,,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于過氧化,這是很關(guān)鍵的步驟,。江蘇品質(zhì)好的糖原染色試劑盒哪家便宜