Exosome,,中文名外泌體,,是一種能被大多數(shù)細胞分泌的微小膜泡,具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu),直徑大約40-100nm,。盡管外泌體較初在1983年就被發(fā)現(xiàn),但人們一直認為它只是一種細胞的廢棄物,。然而較近幾年,,人們發(fā)現(xiàn)這種微小膜泡中含有細胞特異的蛋白、脂質(zhì)和核酸,,能作為信號分子傳遞給其他細胞從而改變其他細胞的功能,。這些發(fā)現(xiàn)點燃了人們對細胞分泌膜泡的興趣。較近的研究發(fā)現(xiàn)外泌體在很多生理病理上起著重要的作用,,如免疫中抗原呈遞,、一些病癥的生長與遷移、組織損傷的修復(fù)等,。不同細胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能,,可作為疾病診斷的生物標(biāo)志物。外泌體具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu),,能很好的保護其包被的物質(zhì),,且能靶向特定細胞或組織,因此是一種很好靶向給藥系統(tǒng)(targeteddeliverysystem),。外泌體提?。旱退匐x心去除細胞和凋亡碎片。石家莊正規(guī)外泌體提取試劑廠家現(xiàn)貨
外泌體在肺病進程中的作用:肺病細胞來源外泌體(LCC-exosome)可以通過刺激一些病癥血管的形成來促進一些病癥的生長,。據(jù)相關(guān)報道稱,,LCC-exosome中的miR-210可以通過調(diào)節(jié)基質(zhì)細胞中酪氨酸受體激酶A3的含量,促進一些病癥血管的生成,;而LCC-exosome中的miR-23a則可以通過啟動脯氨酰羥化酶及壓制緊密結(jié)合蛋白ZO-1來促進肺病的生血管作用,。此外,有研究發(fā)現(xiàn),,外泌體中的內(nèi)容物可以觸發(fā)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT),。晚期肺病患者血清中外泌體波形蛋白表達增加,促使人正常支氣管上皮細胞出現(xiàn)EMT,,從而使肺支氣管正常上皮細胞出現(xiàn)增殖,,遷移能力。色譜法,。這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一,,但是需要特殊的設(shè)備,,應(yīng)用不普遍天津正規(guī)外泌體提取試劑廠家直銷由于這些核酸被囊膜包裹而被保護,穩(wěn)定性高,,不易降解,。
外泌體是細胞間進行物質(zhì)運輸和信息交流的重要工具,可以通過調(diào)節(jié)免疫功能促進一些病癥的增殖,,血管新生和一些病癥轉(zhuǎn)移,。與細菌傳染,幫助細菌逃避免疫關(guān)系很大,,并與心血管疾病,,老年癡呆等疾病具有密切關(guān)系。外泌體可通過流式,、WB(檢測指標(biāo)有CD9,CD63,CD81),、電鏡觀察、NTA粒徑追蹤等手段檢測,,普遍應(yīng)用于藥物載體,、疾病診斷marker、精細醫(yī)療,、一些病癥治病等方面研究,。由于外泌體直徑小,樣本含量低,,提取十分困難,。已有的外泌體分離方式有密度梯度離心、超濾離心法,、免疫磁珠抗體捕獲,、商用試劑盒等。但到目前為止,,仍沒有一種提取方法能同時保證外泌體的含量,、純度以及生物活性。
外泌體是指包含了復(fù)雜RNA和蛋白質(zhì)的小膜泡(30-150nm),,現(xiàn)今,,其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。1983年,,外泌體初次于綿羊網(wǎng)織紅細胞中被發(fā)現(xiàn),,1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體,。其主要來源于細胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,,經(jīng)多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。所有培養(yǎng)的細胞類型均可分泌外泌體,,且外泌體天然存在于體液中,,包括血液、唾液,、尿液,、腦脊液和乳汁中。有關(guān)他們分泌和攝取及其組成,、“運載物”和相應(yīng)功能的精確分子機制剛剛開始研究,。外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡,參與細胞間通訊,,對外泌體的研究興趣日益增長,,無論是研究其功能還是了解如何將其用于微創(chuàng)診斷的開發(fā)。有關(guān)他們分泌和攝取及其組成,、“運載物”和相應(yīng)功能的精確分子機制剛剛開始研究,。
當(dāng)其由宿主細胞被分泌到受體細胞中時,外泌體可通過其攜帶的蛋白質(zhì),、核酸,、脂類等來調(diào)節(jié)受體細胞的生物學(xué)活性。外泌體介導(dǎo)的細胞間通訊主要通過以下三種方式:一是外泌體膜蛋白可以與靶細胞膜蛋白結(jié)合,,進而啟動靶細胞細胞內(nèi)的信號通路,。二是在細胞外基質(zhì)中,外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切,,剪切的碎片可以作為配體與細胞膜上的受體結(jié)合,,從而啟動細胞內(nèi)的信號通路。有報道稱一些外泌體膜上蛋白在其來源細胞膜上未能檢測出,。三是外泌體膜可以與靶細胞膜直接融合,,非選擇性的釋放其所含的蛋白質(zhì)、mRNA以及microRNA,。人體內(nèi)多種細胞及體液均可分泌外泌體,,包括內(nèi)皮細胞、免疫細胞,、血小板,、平滑肌細胞等。外泌體提?。撼x法是較常用的外泌體純化手段,,采用低速離心、高速離心交替進行,。北京正規(guī)外泌體提取試劑廠家批發(fā)價
離心除去細胞器,,留取上清。石家莊正規(guī)外泌體提取試劑廠家現(xiàn)貨
外泌體的提取、分離方法:聚合物沉淀法,。聚合物沉淀法用于分離病毒和其他的生物大分子已有50多年歷史,,近幾年,將其作為一種新的方法來分離外泌體,。目前,,市場已經(jīng)有應(yīng)用聚乙二醇(polyethyleneglycol,PEG)溶液提取外泌體的試劑盒,較常見的是SystemBiosciences公司的ExoQuick?和ExoQuick-TC?kits,,該試劑盒操作簡單不需要特殊的儀器,,但是價格昂貴。提取外泌體的試劑盒主要成分是PEG8000(30%~50%),將試劑盒與體液或細胞培養(yǎng)液4℃孵育過夜,,之后再低速離心,。石家莊正規(guī)外泌體提取試劑廠家現(xiàn)貨