使用方法:1,、細(xì)胞培養(yǎng)器皿的表面包被:以包被濃度為2μg/cm2為例,,用無菌0.006mol/L乙酸將膠原蛋白稀釋到0.012mg/mL,。加到相應(yīng)的培養(yǎng)器皿中,,確保膠原蛋白溶液鋪滿器皿的表面,。開蓋在超凈臺上過夜晾干,也可以在室溫放置1小時后,,用PBS洗3~4次后直接使用,。包被好的器皿在4~25℃至少可保存三個月以上的時間,。2、三維膠原凝膠的制備:A,、無細(xì)胞三維膠原凝膠的制備(以配制1mg/mL三維膠1mL為例)將200μL本品加到置于冰浴的離心管中,,加入690μL雙蒸水,然后加到12μL0.1mol/LNaOH中(如果反過來把12μL0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,,會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)),,立即混勻。再加入100μL10×PBS或10×培養(yǎng)液,,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH為7左右,,如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,初次使用時需要測定pH值),。將培養(yǎng)器皿在室溫放置20min待膠凝固后,,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi)。如果配制中使用的是10×PBS,,使用前需要加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液預(yù)平衡,。鼠尾膠原醋酸溶解:在室溫中攪拌1-3小時直到完全溶解。昆明鼠尾膠原直銷價
膠原的立體結(jié)構(gòu)與一般的球狀蛋白質(zhì)完全不同,,每一條亞基形成一股左手旋轉(zhuǎn)的螺旋,,其中每3個氨基酸殘基形成一圈螺旋,。3條左手螺旋再扭在一起形成一個右手大螺旋,。這樣的螺旋稱為3股螺旋。小的甘氨酸殘基位于3股螺旋內(nèi)部,。3股螺旋式的棒狀膠原分子的大小約是3000×15埃,,這些棒狀分子首尾相連,并側(cè)向排列形成膠原微絲(其直徑可從50埃至數(shù)千埃),。膠原分子在兩端及沿軸向每隔680埃的距離存在極性區(qū),,這些極性區(qū)能和重金屬離子結(jié)合,使膠原纖維在電子顯微鏡下形成間距為680埃的明暗相間的特征性的橫紋結(jié)構(gòu),。蕪湖正規(guī)鼠尾膠原廠家現(xiàn)貨將黏稠的膠體溶液進(jìn)行高速冷凍離心處理,。
膠原蛋白的提取方法:酸法提取:酸法提取主要采用低離子濃度酸性條件浸漬處理原料,,從而破壞分子間的鹽鍵和希夫堿,,而引起纖維膨脹、溶解,。作為溶劑使用的酸,,主要有鹽酸或亞硫酸、磷酸,、硫酸,、醋酸,、檸檬酸和甲酸等。酸法是提取膠原蛋白比較常用和有效的方法,,用酸法提取的膠原較大程度地保持了其三股螺旋結(jié)構(gòu),。此法處理快速,所得產(chǎn)品的分子量是連續(xù)的,,適用于醫(yī)用生物材料及原料的制備,,但產(chǎn)品得率低,設(shè)備腐蝕嚴(yán)重,,污染重,。趙蒼碧等[2]采用0.3%的醋酸溶液在4℃下從牛腱中提取膠原蛋白,得到高純度的膠原蛋白溶液,。
鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項:通過醋酸抽提,、氯化鈉沉淀、磷酸氫二鈉沉淀等步驟制備的,。鼠尾膠原蛋白可用于包被細(xì)胞培養(yǎng)器皿,,培養(yǎng)一些在普通細(xì)胞培養(yǎng)器皿中不易貼壁的細(xì)胞。也可用于制備三維膠,,模擬真實的生長環(huán)境,,使細(xì)胞在三維環(huán)境中生長。1,,在使用鼠膠原蛋白型包被的細(xì)胞培養(yǎng)皿中檢查到PC-12細(xì)胞的貼壁和生長,。1mg/ml濃度以上,pH左右時可形成具有一定強度的三維膠,,檢查到NIH-3T3細(xì)胞在三維膠內(nèi)正常生長,、PC-12細(xì)胞在三維膠表面正常生長。使用方法:1,、細(xì)胞培養(yǎng)器皿的表面包被推薦濃度:1-5ug/cm0.012mg/ml,。按以下表格體積加到相應(yīng)的培養(yǎng)器皿中。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,,并且制作簡便,成本低廉,。細(xì)胞培養(yǎng)器皿的表面包被以包被濃度為2μg/cm2為例,。
鼠尾膠原蛋白的用途是什么:將尾巴從動物身體切除后,會冷凍起來,,并提取尾巴里的筋腱,。然后,將筋腱切成小塊,,并在離心處理之前添加到由醋酸和水勾兌而成的混合物中,。用這種方法,,能將膠原蛋白從動物材料中分離出來。在食品加工領(lǐng)域,,鼠尾膠原蛋白用于生產(chǎn)明膠并添加到布丁和棉花糖中,。它還可以當(dāng)作酸奶,冰淇淋,,果醬和奶油芝士等食品的增稠劑使用,。在一些低脂肪食品中,它用于模仿全脂食品的感覺和質(zhì)地,。它還用于生產(chǎn)膳食保健品,,據(jù)說能讓手指甲和皮膚看起來更好。此外,,還有基于膠原蛋白的保健品,,可用于促進(jìn)關(guān)節(jié)健康。一種基于鼠尾膠原蛋白:根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,。蕪湖重慶鼠尾膠原
鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基,,它具有促進(jìn)體外培養(yǎng)細(xì)胞(特別是上皮細(xì)胞)貼壁的作用。昆明鼠尾膠原直銷價
膠原蛋白的應(yīng)用:1.膠原天然的緊密的纖維結(jié)構(gòu),,使膠原材料顯示出很強的韌性和強度,,適用于薄膜材料的制備;2.大較膠原被用作制造腸衣等可食用包裝材料.其獨特之處是:在熱處理過程中.隨著水分和油脂的蒸發(fā)和熔化.膠原幾乎與肉食的收縮率一致,。而其他的可食用包裝材料還沒被發(fā)現(xiàn)具有這品質(zhì),;3.由于膠原分子鏈上含有大量的親水基團(tuán).所以與水結(jié)合的能力很強.這一性質(zhì)使膠原在食品中可以用作填充劑和凝膠;4.膠原在酸性和堿性介質(zhì)中膨脹,,這一性質(zhì)也應(yīng)用于制備膠原基材料的處理工藝中,。昆明鼠尾膠原直銷價
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