研究表明被特定部位的細(xì)胞獲取的一些病癥外泌體可為一些病癥的轉(zhuǎn)移準(zhǔn)備轉(zhuǎn)移前微環(huán)境,。用肺轉(zhuǎn)傾向的一些病癥細(xì)胞來(lái)源的外泌體處理小鼠后可使骨轉(zhuǎn)傾向的一些病癥細(xì)胞重新定向,。外泌體的蛋白質(zhì)組學(xué)分析發(fā)現(xiàn)不同部位傾向性的一些病癥細(xì)胞來(lái)源的外泌體具有不同的整合素(integrin)表達(dá)譜,整合素α6β4和α6β1與肺轉(zhuǎn)有關(guān),而整合素αvβ5與肝轉(zhuǎn)有關(guān),。敲低整合素α6β4和αvβ5可減少外泌體被靶部位細(xì)胞獲取,進(jìn)而分別降低了肺和肝的轉(zhuǎn)移,。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)外泌體整合素被細(xì)胞獲取后啟動(dòng)了Src的磷酸化和促炎的S100基因的表達(dá),。較后通過(guò)臨床數(shù)據(jù)分析顯示外泌體整合素可作為預(yù)測(cè)一些病癥轉(zhuǎn)移的部位傾向性的診斷指標(biāo)。逐漸取代超速離心法并推廣開(kāi)來(lái),。有些試劑盒操作簡(jiǎn)便,,不用超速離心。武漢正規(guī)外泌體提取試劑報(bào)價(jià)
外泌體(exosome)是所有細(xì)胞釋放出的菌類大小的顆粒,。它們天然地存在于血液中,。根據(jù)來(lái)自美國(guó)德州大學(xué)MD安德森一些疾病中心的一項(xiàng)新的研究,對(duì)外泌體進(jìn)行基因操縱可能提供一種新的胰腺病治病方法,。論文通信作者為德州大學(xué)MD安德森一些疾病中心一些疾病生物學(xué)系研究員RaghuKalluri博士,。在這項(xiàng)新的研究中,經(jīng)過(guò)基因修飾的外泌體(被稱作iExosome)能夠運(yùn)送特異性地靶向KRAS突變基因的小RNA分子,,從而導(dǎo)致胰腺病模式小鼠病情緩解,,增加它們的總存活率。這些研究人員采用了一種被稱作RNA干擾(RNAi)的靶向方法:利用這些天然的納米顆粒(即外泌體)運(yùn)送小干擾RNA(siRNA)或短發(fā)夾RNA(shRNA)分子來(lái)靶向胰腺病細(xì)胞中的KRAS突變基因,,從而影響多種胰腺病模型的一些病癥負(fù)荷和存活,。他們證實(shí)外泌體能夠作為一種高效的RNAi載體發(fā)揮作用,這是因?yàn)檫@些納米大小的囊泡(即外泌體)輕松地在體內(nèi)遷移和進(jìn)入靶細(xì)胞(包括病細(xì)胞)中,。外泌體在免疫中抗原呈遞,、一些病癥的生長(zhǎng)與遷移、組織損傷的修復(fù)等生理病理上起著重要的作用,。徐州外泌體提取試劑廠家推薦外泌體提?。壕垡叶迹≒EG)為常用的多聚物,可與疏水性蛋白和脂質(zhì)分子結(jié)合共沉淀。
外泌體的提取方法,,先用含無(wú)外泌體血清的培養(yǎng)基對(duì)人脂肪來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行饑餓培養(yǎng),,這樣可使干細(xì)胞處于正常生長(zhǎng)狀態(tài),不會(huì)被克制生長(zhǎng)增殖,,其所分泌的外泌體所包含的有效物質(zhì)也更貼近其自然狀態(tài)下的外泌體,,然后將含有外泌體的培養(yǎng)上清液進(jìn)行低速差速離心(即先一離心處理、再第二離心處理)以去除細(xì)胞及其碎片,,用100kd超濾管對(duì)低速差速離心后的離心液進(jìn)行超濾濃縮得到外泌體濃度更高的超濾液,,將超濾液經(jīng)過(guò)第三離心處理去除雜質(zhì)后直接用0.22μm過(guò)濾器過(guò)濾除菌,過(guò)濾掉粒徑為220nm以上的物質(zhì),,進(jìn)一步得到含顆粒粒徑小于220nm的濃縮液,,因超濾濃縮處理和第三離心處理使得液體量濃縮,這樣過(guò)濾除菌效率得到較大提高,,較后將濃縮液進(jìn)行超速離心的第四離心處理分離提取到外泌體,。
人體內(nèi)多種細(xì)胞及體液均可分泌外泌體,包括內(nèi)皮細(xì)胞,、免疫細(xì)胞,、血小板、平滑肌細(xì)胞等,。當(dāng)其由宿主細(xì)胞被分泌到受體細(xì)胞中時(shí),,外泌體可通過(guò)其攜帶的蛋白質(zhì)、核酸,、脂類等來(lái)調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的生物學(xué)活性,。外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊主要通過(guò)以下三種方式:一是外泌體膜蛋白可以與靶細(xì)胞膜蛋白結(jié)合,進(jìn)而啟動(dòng)靶細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路,。二是在細(xì)胞外基質(zhì)中,,外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切,剪切的碎片可以作為配體與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合,,從而啟動(dòng)細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路,。有報(bào)道稱一些外泌體膜上蛋白在其來(lái)源細(xì)胞膜上未能檢測(cè)出。三是外泌體膜可以與靶細(xì)胞膜直接融合,,非選擇性的釋放其所含的蛋白質(zhì),、mRNA以及microRNA。由于國(guó)內(nèi)有關(guān)外泌體提取試劑的缺乏,,我國(guó)對(duì)外泌體的研究還基本依賴于過(guò)程繁瑣的超速離心和進(jìn)口提取試劑盒,。
2015年,隨著精細(xì)醫(yī)學(xué)概念的提出,,越來(lái)越多的人開(kāi)始關(guān)注如何能做到疾病的精確診斷和治病,。外泌體作為一個(gè)新型的研究熱點(diǎn),,由于它在體內(nèi)存在的普遍性和獲取的便捷性,已經(jīng)成為了疾病診斷治病的潛在有效方式,,在精細(xì)醫(yī)學(xué)發(fā)展上有著光明的前景,。多泡內(nèi)體的腔內(nèi)囊泡,要么分選進(jìn)溶酶體將物質(zhì)降解,,要么作為外泌體分泌到胞外環(huán)境中,。將膜分選到不同的腔內(nèi)囊泡群中的機(jī)制尚不清楚。該研究發(fā)現(xiàn)物質(zhì)被分選到內(nèi)體膜上的不同子域中,,并且外泌體相關(guān)結(jié)構(gòu)域向內(nèi)體腔的轉(zhuǎn)移不取決于ESCRT(運(yùn)輸所需的內(nèi)體分選復(fù)合體)的功能,,但是需要鞘脂神經(jīng)酰胺。純化的外體富含神經(jīng)酰胺,,并且在神經(jīng)鞘磷脂酶被壓制后外泌體釋放減少,。這些結(jié)果確定了內(nèi)體內(nèi)膜運(yùn)輸和外泌體形成的途徑。使用可截留100KD分子量的膜,,通過(guò)離心截留上清中的外泌體,,截留完成后。珠海外泌體提取試劑產(chǎn)品介紹
超濾離心法簡(jiǎn)單高效,,且不影響外泌體的生物活性,但同樣存在純度不高的問(wèn)題,。武漢正規(guī)外泌體提取試劑報(bào)價(jià)
外泌體的提取方法,,先用含無(wú)外泌體血清的培養(yǎng)基對(duì)人脂肪來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行饑餓培養(yǎng),這樣可使干細(xì)胞處于正常生長(zhǎng)狀態(tài),,不會(huì)被克制生長(zhǎng)增殖,,其所分泌的外泌體所包含的有效物質(zhì)也更貼近其自然狀態(tài)下的外泌體,然后將含有外泌體的培養(yǎng)上清液進(jìn)行低速差速離心(即先一離心處理,、再第二離心處理)以去除細(xì)胞及其碎片,,用100kd超濾管對(duì)低速差速離心后的離心液進(jìn)行超濾濃縮得到外泌體濃度更高的超濾液,將超濾液經(jīng)過(guò)第三離心處理去除雜質(zhì)后直接用0.22μm過(guò)濾器過(guò)濾除菌,,過(guò)濾掉粒徑為220nm以上的物質(zhì),,進(jìn)一步得到含顆粒粒徑小于220nm的濃縮液,因超濾濃縮處理和第三離心處理使得液體量濃縮,,這樣過(guò)濾除菌效率得到較大提高,,較后將濃縮液進(jìn)行超速離心的第四離心處理分離提取到外泌體。該外泌體的提取方法,,既結(jié)合了差速離心,,又結(jié)合了超濾和超速離心,通過(guò)該提取流程,,較終可高效地從人脂肪來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)培養(yǎng)上清液中提取到高濃度,、高純度的外泌體,,具有操作簡(jiǎn)單、成本低,,適合產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)的特點(diǎn),。武漢正規(guī)外泌體提取試劑報(bào)價(jià)