復(fù)蘇方:法1)從冰箱里取出細(xì)胞冷凍保存管,,立即放入37℃振動(dòng)水浴槽中快速解凍。2)待凍存管中細(xì)胞混合液完全融化后,,立即加入1ml細(xì)胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞混合,,再將細(xì)胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細(xì)胞培養(yǎng)基的試管中,混合均勻,。3)離心收集培養(yǎng)細(xì)胞(參考離心條件:1,000~2,000rpm,,4℃,3~5min),,移去上清液,。4)清洗細(xì)胞,充分洗凈殘留凍存液,。5)加入適量的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基,,使用移液管緩緩地均勻細(xì)胞混合液。適量地稀釋后,,將細(xì)胞混合液移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)瓶中,。6)鏡檢后,研究者可根據(jù)各自方法和需要來(lái)進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),。無(wú)血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢(shì):通用型,,適用于凍存各種細(xì)胞系、原代細(xì)胞。北京無(wú)血清細(xì)胞凍存液廠家現(xiàn)貨
血清血液成分(加入抗凝劑)血液凝固析出的淡黃色透明液體,。如將血液自血管內(nèi)抽出,,放入試管中,不加抗凝劑,,則凝血反應(yīng),,血液迅速凝固,形成膠凍,。凝血塊收縮,,其周?chē)龀鲋S色透明液體即為血清,也可于凝血后經(jīng)離心取得,。在凝血過(guò)程中,,纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白塊,所以血清中無(wú)纖維蛋白原,,這一點(diǎn)是與血漿比較大的區(qū)別,。而在凝血反應(yīng)中,血小板釋放出許多物質(zhì),,各凝血因子也都發(fā)生了變化,。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化,如凝血酶原變成凝血酶,,并隨血清存放時(shí)間逐漸減少以至消失,。這些也都是與血漿區(qū)別之處。但大量未參加凝血反應(yīng)的物質(zhì)則與血漿基本相同,。為避免抗凝劑的干擾,,血液中許多化學(xué)成分的分析,都以血清為樣品,。開(kāi)封無(wú)血清細(xì)胞凍存液報(bào)價(jià)無(wú)血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢(shì):因不含血清,,批次間差異小。
永生化的細(xì)胞系往往相當(dāng)健壯,,因此,,使用實(shí)驗(yàn)室自制的凍存培養(yǎng)基,效果也不錯(cuò),。典型的配方是在生長(zhǎng)培養(yǎng)基中加入5%到10%的DMSO和5%到40%的血清,,或只是在血清中加入10%的DMSO。DMSO的作用是取代細(xì)胞中的一些水,,以防止冰晶形成,,刺穿細(xì)胞。據(jù)賽默飛世爾科技的較深科學(xué)家RhondaNewman介紹,,DMSO還能防止細(xì)胞在冷凍期間發(fā)生收縮,,而后在解凍時(shí)又變得腫脹。血清,這種富含營(yíng)養(yǎng)成分的物質(zhì),,直接支持細(xì)胞,?!爱?dāng)細(xì)胞處于這種營(yíng)養(yǎng)豐富的環(huán)境時(shí),,它們能夠更好地復(fù)蘇。
無(wú)血清快速細(xì)胞凍存液凍存細(xì)胞復(fù)蘇方法:1,、從冰箱里取出細(xì)胞冷凍保存管,,立即放入37℃振動(dòng)水浴槽中快速解凍。2,、待凍存管中細(xì)胞混合液完全融化后,,立即加入1ml細(xì)胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞混合,再將細(xì)胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細(xì)胞培養(yǎng)基的試管中,,混合均勻,。3、離心收集培養(yǎng)細(xì)胞(參考離心條件:1,000~2,000rpm,,4℃,,3~5min),移去上清液,。4,、清洗細(xì)胞,充分洗凈殘留凍存液,。5,、加入適量的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基,使用移液管緩緩地均勻細(xì)胞混合液,。適量地稀釋后,,將細(xì)胞混合液移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)瓶中。6,、鏡檢后,,研究者可根據(jù)各自方法和需要來(lái)進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。在細(xì)胞內(nèi)外進(jìn)行雙重保護(hù),,較大提高了細(xì)胞復(fù)蘇存活率,。
冷凍速率:冷凍速率是指降溫的速度,直接關(guān)系到冷凍效果,。冷凍速度不同,,細(xì)胞內(nèi)水分向外流動(dòng)的情況也不相同,不同的冷凍速度既然能使細(xì)胞內(nèi)發(fā)生不同的生理變化,,也可以對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生不同的損傷,。超快速玻璃化冷凍對(duì)細(xì)胞存活來(lái)說(shuō)是較為理想的冷凍方法。細(xì)胞內(nèi)外呈玻璃化凝固,無(wú)冰晶形成或形成很小的冰晶,,對(duì)細(xì)胞膜和細(xì)胞器不致造成損傷,,細(xì)胞也不會(huì)在高濃度的溶質(zhì)中長(zhǎng)時(shí)間暴露而受損。不同細(xì)胞的較適冷凍速率不同,。小鼠骨髓干細(xì)胞,、酵母、人紅細(xì)胞的較適冷凍速率分別為1.6℃/min,、7℃/min和200℃/min,。細(xì)胞與細(xì)胞之間的較適冷凍速率可在1.6℃~300℃/min,故對(duì)一種細(xì)胞進(jìn)行冷凍保存之前,,首先需要測(cè)定其較適冷凍速率,,以保證獲得較高的冷凍存活率。無(wú)血清細(xì)胞凍存液不含牛血清,,無(wú)動(dòng)物源組份,。杭州北京無(wú)血清細(xì)胞凍存液
無(wú)血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品特色:成分明確,無(wú)批次差異,。北京無(wú)血清細(xì)胞凍存液廠家現(xiàn)貨
無(wú)血清凍存液通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株(tumour細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞),,凍存細(xì)胞可在-80℃長(zhǎng)期保存(>5年)。配方成分明確,,不含動(dòng)物來(lái)源性蛋白,,不含血清,可減少各類(lèi)細(xì)菌,、病毒和支原體等污染,,保證凍存細(xì)胞的安全。該凍存液含DMSO,、葡萄糖等各種細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)成分,,提高細(xì)胞存活率和活力,亦適合于無(wú)血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞,。該產(chǎn)品添加了細(xì)胞沉降穩(wěn)定劑,,可延緩細(xì)胞在凍存過(guò)程中的沉降速率,防止細(xì)胞互相擠壓,,影響細(xì)胞凍存效果,。另外,添加了細(xì)胞膜保護(hù)劑,、滲透性細(xì)胞膜內(nèi)保護(hù)劑,、非滲透性細(xì)胞保護(hù)劑等多種冷凍保護(hù)劑,這些成分在溶液中同水分子結(jié)合,,發(fā)生水合作用,,弱化水的結(jié)晶過(guò)程使溶液的粘性增加從而少冰晶的形成,,能較大降低細(xì)胞在凍存過(guò)程中冰晶對(duì)于細(xì)胞的損傷,有效提高細(xì)胞復(fù)蘇存活率,。該產(chǎn)品配方成分明確,,不含血清、不含動(dòng)物源性蛋白,,可減少各類(lèi)細(xì)菌,、病毒和支原體等污染,保證凍存細(xì)胞的安全,;不光適用于常規(guī)細(xì)胞系,、原代細(xì)胞,同時(shí)亦適合于無(wú)血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞,。北京無(wú)血清細(xì)胞凍存液廠家現(xiàn)貨