外泌體的提取方法：1.超速離心法（差速離心）,。超離法是較常用的外泌體純化手段，采用低速離心,、高速離心交替進(jìn)行,，可分離到大小相近的囊泡顆粒。超離法因操作簡(jiǎn)單,，獲得的囊泡數(shù)量較多而廣受歡迎,，但過(guò)程比較費(fèi)時(shí)，且回收率不穩(wěn)定（可能與轉(zhuǎn)子類型有關(guān)）,，純度也受到質(zhì)疑,；此外，重復(fù)離心操作還有可能對(duì)囊泡造成損害,，從而降低其質(zhì)量,。2.密度梯度離心。在超速離心力作用下,，使蔗糖溶液形成從低到高連續(xù)分布的密度階層,，是一種區(qū)帶分離法。通過(guò)密度梯度離心,，樣品中的外泌體將在1.13-1.19g/ml的密度范圍富集,。此法獲得的外泌體純度較高，但步驟繁瑣,，耗時(shí),，對(duì)離心時(shí)間極為敏感由于外泌體的特殊結(jié)構(gòu)和功能，使得它具有潛在的應(yīng)用價(jià)值,。唐山外泌體提取試劑廠家批發(fā)價(jià)

外泌體的提取分離：1,、超速離心法（差速離心）。超離法是常用的外泌體純化手段,，采用低速離心,、高速離心交替進(jìn)行（如圖所示），可分離到大小相近的囊泡顆粒,。超離法因操作簡(jiǎn)單,，獲得的囊泡數(shù)量較多而廣受歡迎，但過(guò)程比較費(fèi)時(shí),，且回收率不穩(wěn)定（可能與轉(zhuǎn)子類型有關(guān)）,，純度也受到質(zhì)疑；此外,，重復(fù)離心操作還有可能對(duì)囊泡造成損害,，從而降低其質(zhì)量。2,、密度梯度離心,。在超速離心力作用下,，使蔗糖溶液形成從低到高連續(xù)分布的密度階層，是一種區(qū)帶分離法,。通過(guò)密度梯度離心,，樣品中的外泌體將在1.13-1.19g/ml的密度范圍富集。此法獲得的外泌體純度較高,，但步驟繁瑣，耗時(shí),。金華正規(guī)外泌體提取試劑產(chǎn)品介紹用于外泌體提取的體液收集注意事項(xiàng)：抽血時(shí)間,。

外泌體是一種存在于細(xì)胞外的多囊泡體，可通過(guò)細(xì)胞內(nèi)吞泡膜向內(nèi)凹陷形成多泡內(nèi)涵體,，內(nèi)涵體與細(xì)胞膜融合后釋放其中的小囊泡,。外泌體的直徑在40-110nm之間，其中包含RNA,、蛋白質(zhì),、microRNA、DN段等多種物質(zhì),，存在于血液,、唾液、尿液,、腦脊液和母乳等多種體液中,。外泌體從發(fā)現(xiàn)至今已有30多年的歷史，雖然較初被認(rèn)為可能是細(xì)胞的“垃圾”,，所以才被排出來(lái),，但是近年來(lái)研究表明外泌體具有功能活性并可進(jìn)行細(xì)胞間信息傳遞。如今,，研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)外泌體在抗原提呈細(xì)胞中呈遞抗原程中,、一些病癥細(xì)胞發(fā)生的發(fā)展、神經(jīng)細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程中都發(fā)揮著重要作用,。

外泌體的提取,、分離方法：微流控技術(shù)。微流控是利用微納米級(jí)尺寸的管道來(lái)處理和操控流體所涉及的一門(mén)技術(shù),，其在外泌體分離方面的應(yīng)用受到越來(lái)越多學(xué)者的關(guān)注,。Jie等[16]課題組開(kāi)發(fā)了一種三維納米結(jié)構(gòu)微流控芯片，微柱陣列通過(guò)化學(xué)沉積將交叉多壁碳納米管功能化,，然后其就可以識(shí)別特定的分子(CD63)并利用獨(dú)特拓?fù)浼{米材料高效的捕獲外泌體,。Wunsch等[17]利用硅工藝生產(chǎn)納米級(jí)確定性側(cè)向位移(Nano-DLD)芯片，得到了均勻的間隙尺寸,，該芯片可以靈敏地將20~110nm的顆粒分離,。該研究證明了外泌體基于大小的位移,，從而揭示了利用芯片分選和量化納米級(jí)生物膠體的潛力。在體內(nèi)參與細(xì)胞通訊,、細(xì)胞遷移,、促血管新生和抗一些病癥免疫等生理過(guò)程，與多種疾病的發(fā)生和進(jìn)程密切相關(guān),。

外泌體(exosomes,，Exos)是細(xì)胞分泌的一種膜囊泡，因其可以將供體細(xì)胞的信息通過(guò)其攜帶的蛋白質(zhì),、mRNA,、miRNA等傳遞到受體細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)細(xì)胞之間的信息交流及物質(zhì)交換,，并且可以作為藥物載體轉(zhuǎn)運(yùn)藥物而引起科學(xué)家的普遍關(guān)注(Fig1),。外泌體作為內(nèi)源性的天然藥物載體有著獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，表面由脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成,，使其可以穿透許多生物膜,，提高藥物的運(yùn)輸效率和靶向性，可以穩(wěn)定存在于血液中,，納米級(jí)尺寸明顯增強(qiáng)藥物在瘤部位的滲透滯留效應(yīng)(permeabilityandretentioneffect,EPR),。目前，許多抗藥物,、基因藥物及藥物均被成功載入外泌體,。但是由于沒(méi)有較好的外泌體分離純化和載藥的方法，使得其作為藥物載體的應(yīng)用受到限制,。逐漸取代超速離心法并推廣開(kāi)來(lái),。有些試劑盒操作簡(jiǎn)便，不用超速離心,。北京外泌體提取試劑生產(chǎn)廠家

可將外泌體吸附并分離出來(lái),。唐山外泌體提取試劑廠家批發(fā)價(jià)

近年來(lái)，隨著外泌體研究的不斷深入,，它的應(yīng)用已經(jīng)涉及一些病癥治病領(lǐng)域,、醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)和免疫領(lǐng)域、寄生蟲(chóng)領(lǐng)域,；臨床研究上已涉及心血管系統(tǒng),、內(nèi)分泌代謝系統(tǒng)等。外泌體來(lái)源及內(nèi)含物,。幾乎所有類型的細(xì)胞都可以分泌外泌體,，同時(shí)外泌體也普遍存在于體液中，包括血液、眼淚,、尿液,、唾液、乳汁,、腹水等,。目前研究發(fā)現(xiàn)外泌體中富含核酸（microRNA、lncRNA,、circRNA,、mRNA、tRNA等）,、蛋白,、膽固醇等。外泌體的表面marker主要有CD63,、CD81、CD9,、TSG101,、HSP27等。外泌體鑒定,。目前對(duì)于外泌體的鑒定主要有四種方法：透射電子顯微鏡（TEM）,、Nanosight、WesternBlot,、流式細(xì)胞術(shù),。唐山外泌體提取試劑廠家批發(fā)價(jià)