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南昌RNA提取試劑

來源: 發(fā)布時(shí)間:2023-03-01

RNA抽取一般使用Trizol法抽提:Trizol是一種總RNA抽提試劑,,內(nèi)含異硫氰酸胍等物質(zhì),能迅速裂解細(xì)胞,,壓制細(xì)胞釋放出的核酸酶活性,。目前常用Trizol法進(jìn)行提取組織或細(xì)胞中的RNA。Trizol作用原理:在勻質(zhì)化或溶解樣品中,,Trizol試劑可保持RNA的完整性,,同時(shí)能破壞細(xì)胞及溶解細(xì)胞成分。加入氯仿離心后,,裂解液分層成水相和有機(jī)相,。RNA存在于水相中。水相轉(zhuǎn)移后,,RNA通過異丙醇沉淀回收,。移去水相后,用乙醇可從中間相沉淀得到DNA,,加入異丙醇沉淀可從有機(jī)相得到蛋白質(zhì),。細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核RNA提取試劑盒特點(diǎn):細(xì)胞質(zhì)RNA不含DNA,直接用于RT-PCR/qRT-PCR,。南昌RNA提取試劑

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BIOG血液RNA快速提取試劑盒:BIOG血液RNA快速提取試劑盒是我公司研發(fā)團(tuán)隊(duì)在綜合比較了國外同類較好產(chǎn)品的基礎(chǔ)上反復(fù)研制優(yōu)化而成,,專門用于血液RNA的快速提取純化。本試劑盒采用獨(dú)特的裂解液配方,,可直接從新鮮,、冷凍或陳舊的全血中提取高質(zhì)量的RNA,操作簡(jiǎn)便快速,,只需15分鐘即可完成血液RNA提取,。RNA提取得率較高,可在200μL全血中提取5μg左右RNA,。BIOG血液RNA快速提取試劑盒采用了較新的較好離子膜,,裂解液和洗脫液經(jīng)過多次優(yōu)化,有效地去除了蛋白,、色素,、脂類等雜質(zhì)污染,特別適用于血液包括細(xì)菌,、病菌等傳染的分子檢測(cè),。蕪湖RNA提取試劑廠家現(xiàn)貨細(xì)菌總RNA提取試劑盒:提取的總RNA純度高,沒有DNA和蛋白質(zhì)污染,,適用于RT-PCR,。

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DNA和RNA的鑒別染色:利用吖啶橙的變色特性可鑒別DNA和RNA,。吖啶橙作為一種熒光染料已被用于染色固定,非固定細(xì)胞核酸,,或作溶酶體的一種標(biāo)記,。觀察死亡細(xì)胞熒光變色性變化以及區(qū)別分裂細(xì)胞和靜止細(xì)胞群體。雖然測(cè)定DNA和RNA含量時(shí)較難獲得好的重復(fù)性結(jié)果,,但該方法已被許多實(shí)驗(yàn)室普遍采用,。RNA是核糖核酸,DNA是脫氧核酸,。區(qū)別:溶解性:都溶于水而不溶于乙醇,,因此,常用乙醇來沉淀溶液中的DNA和RNA,。DNA溶于苯酚而RNA不溶,,故可用苯酚來沉淀RNA。

RNA提取試劑的選擇:選擇合適的提取試劑是較重要的一步,。好的提取試劑在確保成功的同時(shí),,操作方便且經(jīng)濟(jì)實(shí)用。對(duì)于動(dòng)物組織,、簡(jiǎn)單的植物材料,、各種微生物、培養(yǎng)細(xì)胞的totalRNA提取,,Takara公司的RNAisoPlus具有諸多的成功案例,。隨著2013年7月柱型提取試劑TaKaRaMiniBESTUniversalTotalRNAExtractionKit的成功上市,進(jìn)一步豐富了TakaraRNA提取的產(chǎn)品線,。該產(chǎn)品采用了獨(dú)特的細(xì)胞裂解系統(tǒng),,無需苯酚氯仿抽提等步驟,簡(jiǎn)單快捷,。組織或細(xì)胞裂解后,,提取操作光需20分鐘便可完成當(dāng)然還有其它的進(jìn)口試劑盒,但是均存在價(jià)格高,、訂貨周期長(zhǎng)的問題,。

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細(xì)胞RNA提取的方法:異丙醇主要用于沉淀RNA。取出EP管后可以見到側(cè)壁沉淀,,輕輕吸棄上清。向EP管中加入75%酒精洗滌沉淀,,幫助分離剩余的有機(jī)試劑(剩余有機(jī)試劑過多會(huì)影響OD值和PCR反應(yīng)),,輕彈沉淀,使其浮在酒精,,靜置1-2min,讓酒精充分接觸沉淀,充分溶解有機(jī)試劑,,然后4度離心5min,。輕輕吸棄上清。將EP管再次放于離心機(jī)中瞬時(shí)離心,,棄掉管壁殘余液體,。然后將EP管置于超凈臺(tái)中干燥5-10min.。注意RNA樣品不要過于干燥,,否則很難溶解,。加入50ulDEPC處理水,震蕩充分溶解沉淀,。測(cè)量RNA濃度,。將RNA保存于-80度。血漿/血清RNA提取試劑盒:高效去除植物組織中的色素,、酚類等雜質(zhì),,提取RNA的純度高,產(chǎn)量大,。長(zhǎng)沙RNA提取試劑單價(jià)

tRNA是mRNA上遺傳密碼的識(shí)別者和氨基酸的轉(zhuǎn)運(yùn)者,。南昌RNA提取試劑

經(jīng)典Trizol法并不能獲得總RNA:這個(gè)事實(shí)可能會(huì)刷不少新手甚至老手的三觀,但確有實(shí)驗(yàn)支持:經(jīng)典Trizol法會(huì)選擇性丟失低GC比的miRNA,。這一點(diǎn),,源自一則作者自撤稿的故事。V.NarryKim是韓國鼎鼎大名的美女科學(xué)家,,專做RNA相關(guān)的研究,,包括miRNA。幾年前她們組發(fā)現(xiàn)一個(gè)奇怪的“現(xiàn)象”,,即貼壁細(xì)胞在消化之后,會(huì)有一些miRNA的豐度突然降低,,看起來好像是被快速“降解”掉了,,并據(jù)此寫了一篇文章發(fā)到MolecularCell上。但很快她們就發(fā)現(xiàn),,這個(gè)“現(xiàn)象”難以重復(fù):如果用Trizol做實(shí)驗(yàn),,就一定是陽性結(jié)果,,而用試劑盒提RNA,,就重復(fù)不出來。難道是號(hào)稱能提總RNA的Trizol方案出了問題,?確實(shí)如此,。經(jīng)進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)后發(fā)現(xiàn),,經(jīng)典的Trizol方案會(huì)使得低GC比的miRNA丟失,。南昌RNA提取試劑

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